Как плести прическу колосок. Фото инструкция

Прическа колосок подразумевает плетение косы, начиная где-то от макушки, прихватывая пряди волос по бокам.

Фото

Кому подходит прическа колосок?

Данная прическа очень практична и разнообразна. Носить колосок можно каждый день, а внося в простое плетение некоторые изменения и аксессуары, можно сделать отличную прическу на вечер.

Колосок плетется как на средних, так и на длинных волосах любой структуры, делая свою обладательницу неподражаемой дамой с настоящей русской косой.

Классический колосок или русская коса

Данная прическа станет отличным вариантом на каждый день, ведь волосы убраны и не мешают заниматься нужными делами. Особенно хорош этот прочный вариант прически для маленьких девочек, ведь многие укладки растрепываются в течении школьного дня, а колосок отлично сохранит форму.

Как заплести колосок?

1. Расчесать волосы и разделить прядь на макушке на три части, как на фото.
2. Плести обычную косу, только прихватывая сбоку волосы, как показано на инструкции.
3. Когда плетение дойдет до затылка и прихватывать будет нечего, просто плести косичку до конца и закрепить.

 

Как сделать прическу колосок видео?

На данном видео можно подробно разобрать, как заплести колосок своими руками:

Так же можно заплести колосок из косы рыбий хвост, что так же подробно описано в этом видео:

Обратный или вывернутый колосок

Обратный колосок подразумевает плести все по той же схеме, только вот пряди кладутся не одна на одну, а наоборот, каждую прядь нужно подкладывать под другую.

Как заплести обратный колосок?

1. Расчесать волосы, и выбрать прядь на макушке.
2. Разделить эту прядь на три части, как на фото 1.
3. Перемещаем прядь № 1 под прядь № 2, а прядь № 3 кладем под прядь № 1.
4. Повторять все то же самое, только подхватывая боковые пряди из основной массы волос.
5. Плести до конца и закрепить кончик резинкой.

По завершению плетения можно немного распустить получившуюся косичку, потихоньку вытягивая прядки. Так коса выйдет очень объемная.

Видео: как заплести обратный (вывернутый) колосок?

На данном видео подробно описано, как заплести вывернутый колосок самой себе:

Как заплести «колосок» ребенку: пошаговая инструкция с фото

«Колосок» – это одна из лучших техник плетения для повседневной и праздничной причёски. Такой вид косы можно заплетать на коротких, средних и длинных волосах. Вариантов техник плетения большое количество. Они прекрасно подходят маленьким детям и подросткам. Как заплести колосок ребёнку (пошаговая инструкция), рассказано в данной статье. В принципе, ничего сложного.

Разновидности «колосков»

Выделяют такие основные виды:

— Стандартный «колосок» из трёх локонов, где соединяются все волосы.

— Нетугой, где прядки небрежно вытягиваются.

— Обратный или, как ещё его называют, «колосок наоборот».

— Косы из двух и четырёх локонов, так называемый «рыбий хвост».

— «Дракончики» с добавлением лент.

— Несколько «колосков», плавно переходящих в афрокосички.

— Коса, имитирующая обруч, и многое другое.

Условия плетения кос

Некоторые основные особенности:

— Необходимо знать технику плетения обычных кос.

— Шевелюра должна быть вымыта.

— Все пряди тщательно расчёсывают, чтобы не было запутывания.

— Начинают с верхней части головы.

— Для более оригинальной причёски аккуратно вытаскивайте пряди, чтобы создать эффект объёма.

— Непослушные волосы смазывают гелем или водой.

— Тугое плетение нужно только на коротких волосах.

Как заплести колосок ребёнку (пошаговая инструкция)

1) Выбирают сверху (у основания лба) часть волос. При этом локоны у висков не трогают.

2) Делят этот пучок на три равных локона.

3) Сперва начинают перебрасывать локоны как в обычной косе. Буквально три переплетения.

4) Соединяют две пряди. Берут поочерёдно с боковых сторон тонкий локон и вплетают в косу (правый перекрещивают с левым).

5) Все волосы должны войти в косу. Когда они закончатся, доплетают, как обычную косу, или собирают в хвост.

6) Косичка очень похожа на колосок. Смотрится прическа очень привлекательно.

Теперь вы знаете, как заплести «колосок» ребёнку. Пошаговая инструкция (фото представлены выше) четко и ясно дает понять, как это сделать. Ничего сложного.

Как заплести два «колоска» ребёнку (пошаговая инструкция)

Можно просто разделить волосы пополам ровным пробором и плести по описанию в начале статьи. Но можно попробовать оригинальную схему плетения, которую сможет проделать самостоятельно каждая мама.

Стандартная схема:

1) Чистые волосы разделяют пополам ровным пробором.

2) Одну часть волос, чтобы не мешала, фиксируют резинкой.

3) Заплетают так же, как и обычный колосок. Сначала — с одной стороны, затем — с другой.

Особую изюминку в такой технике добавит атласная лента (любого цвета). Как заплести 2 колоска ребёнку (пошаговая инструкция, необычный вариант):

1) Вымытые волосы разделяют ровным пробором пополам.

2) Одну часть фиксируют резинкой, во второй вверху отделяют прядь.

3) Прикрепляют ленту невидимками так, чтобы она имела 2 равные половины (является основой для плетения косы). Должно получиться: по бокам — лента, в середине — локон.

4) Далее плетут простой «колосок», переплетая боковые волосы с лентой. Такое действие проделывают до конца (если края ленты остались, завязывают ими косу).

5) Такое действие проделывают и со второй стороны.

На короткие волосы

На недлинных локонах такое плетение приносит некоторые неудобства. Для новичков специалисты рекомендуют тренироваться на хвосте, который связан резинкой. Как заплести «колосок» ребёнку — пошаговая инструкция (на короткие волосы):

1) Начинают с макушки. Собирают все волосы и закрепляют резинкой в хвост.

2) Делят на две равномерные пряди.

3) С двух частей отделяют по тонкому локону.

4) Начинают перекладывать пряди (с правой части в левую и наоборот).

5) Такие манипуляции проделывают до конца (по всей длине).

На длинные волосы

Если обладательница имеет длину волос от 20 см, тут есть где разгуляться фантазии. Например, очень оригинально и празднично смотрится ажурная коса.

Как заплести «колосок» ребёнку? Пошаговая инструкция (на длинные волосы):

1) Сама по себе коса создаётся техникой вытягивания прядей.

2) Заплетают стандартный «колосок» из 3 прядей, сильно не затягивают.

3) Одновременно немного вытягивают пряди.

4) Предварительно продумывают место основания косы, так как оно будет предназначено для фиксации цветка.

5) Доплетают до конца и скручивают косу в цветок, закрепляют шпильками.

Оригинально будет смотреться с вплетёнными лентами разной цветовой гаммы. Или украшениями в виде шпилек с бусинками.

Круговой «колосок»

После освоения обычного плетения вам не составит труда сделать такую косу. Все очень просто. Итак, как заплести круговой колосок ребёнку (пошаговая инструкция):

1) В чем особенности? Чтобы спрятать основание косы, рекомендуют начинать плетение за ухом.

2) На вымытых волосах делают строго ровный пробор. Расчёской около уха проводят вертикальную линию и отделяют локоны.

3) Отделённую прядь за ухом делят на три ровные части.

4) Начинают заплетать обычную косу. Буквально несколько проплётов. Затем складывают два локона вместе.

5) Поочерёдно добавляют волосы с боковых частей. С правой стороны выбирают тонкий локон и укладывают на левую прядь.

6) С левой стороны укладывают на правую.

7) Такими движениями плетут по кругу до второго уха.

8) Когда все волосы закончатся, доплетают обычную косу и фиксируют резинкой.

9) Слегка вытягивают волосы из косы (придают объём). Затем ею обворачивают вокруг головы и закрепляют невидимками.

Французский «колосок» наоборот

В моду входят неординарные вытянутые косы. Схема этого плетения на первый взгляд может показаться тяжёлой. Но на практике всё очень легко.

Как заплести такой колосок ребёнку? Пошаговая инструкция:

1) Аккуратно расчёсывают вымытые волосы.

2) Сверху отделяют локон и делят на 3 части.

3) Захватывают левый локон и заводят его вниз (под два оставшихся).

4) Третий локон заводят под первый и второй (плетение происходит внутрь).

5) Поэтапно проделывают такое действие, добавляя оставшиеся волосы.

6) Берутся крупные и мелкие пряди.

7) Чтобы придать объём, легонько растягивают пряди.

Такой вид косы можно делать зигзагами. Или заплести две косы.

«Колосок» набок

1) При помощи бокового пробора волосы разделяют на две неровные части. Одна должна быть значительно больше другой.

2) Большую часть волос разделяют горизонтальным пробором.

3) Сверху выбирают локон и делят на три части. Заплетают косу, поочерёдно добавляют боковые волосы.

4) Центр косы должен быть не ровный, а смещённый в сторону.

5) Когда плетение дошло до уха, меняют направление, проделывают манипуляцию наискось.

6) Фиксируют резинкой.

«Рыбий хвост»

«Рыбий хвост» – простое и в то же время не совсем обыкновенное плетение. Украсить волосы такой причёской можно не только длинные, но и короткие.

Как заплести такой «колосок» ребёнку? Пошаговая инструкция:

1) Понадобится: массажная расчёска, вода (чтобы сделать волосы послушными), аксессуар (заколка или резинка, шпильки, по желанию — лента).

2) Тщательно расчёсывают волосы, чтобы не пушились, сбрызгивают водой.

3) Всю шевелюру зачёсывают назад, а у висков выделяют небольшие локоны. Эти пряди совмещают друг с другом (правая находится сверху левой). Держат перекрещенные пряди в одной руке.

4) В свою очередь, другой рукой, с левой стороны выделяют ещё один локон. Он должен быть такого же размера, и совмещают с правой (которая осталась в руке). Делают это так, чтобы она оказалась сверху правой.

5) Готовые плетения прижимают рукой.

6) С другой стороны делают такие же манипуляции (новую прядь перекрещивают уже с плетеными локонами).

7) Продолжают до конца косы, поочерёдно добавляя волосы с противоположных сторон.

Двойная объёмная коса

1) Предварительно расчёсывают всю шевелюру. В теменной зоне отделяют прядь и делят её на три локона.

2) Начинают плетение как «рыбий хвост».

3) К главным плетениям добавляют небольшие пряди.

4) Когда немного косы уже заплетено (к макушке фиксируют заколкой), выделяют из оставшейся шевелюры локоны для второго слоя.

5) Делают подхват и плетение производят под низ. Продолжают плести без подхвата до конца. Свободные волосы должны остаться.

6) Возвращаются к верхней части. Освобождают от заколки и доплетают по технике обычной косы, постепенно добавляя свободные пряди.

7) Как только две косы готовы, соединяют их резинкой.

«Колосок» зигзагом

Схема плетения, как и у стандартного «колоска». К примеру, начинают с правой стороны, а заканчивают плетение противоположной (слева). Поворотов в виде зигзага может быть от двух и более.

Со временем стандартная коса «колосок» не забылась, а видоизменилась до неузнаваемости. Варианты и техника плетения, следуя за модой, стали разнообразны. Такая причёска способна своей оригинальностью и неординарностью украсить волосы ребенка как для повседневного, так и для праздничного мероприятия.

фото пошагово. Рыбий хвост (дракончик) по всей голове

Как самой себе заплести колосок: фото пошагово. Рыбий хвост (дракончик) по всей голове

4.5 (90%) 2 votes

Еще одно прекрасное плетение из волос, которое создает оригинальный стиль и подходит всем девушкам с длинными волосами. Существует много разновидностей косичек, одна из таких прекрасных кос — колосок из волос.

Колоском также могут называть французскую косу, но все же правильно называть колоском косичку, которая плетется по технике рыбий хвост, только по всей голове, вплетая новые прядки с каждой стороны. Если вы искали именно плетение французской косы — смотрите эту статью. Еще одно название колоска — дракончик.

Как научиться плести колосок? Сегодня Pricheskina.ru покажет как заплести колосок самой себе на волосах в подробном фото-уроке. Также предлагаю посмотреть интересное видео, после уже точно не останется вопросов. Всего несколько тренировок перед зеркалом и колосок будет получаться быстро и легко. Главное следить за прядками, четко знать схему плетения и держать ее в голове.

Плести такую прическу значительно проще, чем трехпрядную французскую косу. Ведь плетется она из двух частей волос. Для начала советуем вам научиться плести обычную косичку рыбий хвостик, чтобы понять принцип плетения, а затем уже пробовать заплетать ее по всей голове. Классический вариант — плетение колоска по центру головы, начиная со лба и заканчивая на затылке, далее колосок переходит в плетение косы рыбий хвост из свободных волос. Конечно, на основе этого плетения можно создавать различные прически и укладки. Колосок можно заплести по диагонали на бок, сделать два боковых, уложить свободные волосы в пучок или создать оригинальную прическу из плетения, которая будет похожа на ракушку.

Как заплести колосок: фото пошагово

Для начала волосы нужно хорошо расчесать. Если волосы очень гладкие, сделайте легкий начес у корней. Это укрепит плетение. Тонкие и жидкие волосы предварительно лучше завить в кудри.

Есть два варианта, две техники плетения колоска с подхватом прядок и без. Первая это добавление новых прядок по бокам без соединения (без подхвата) их с уже имеющимися боковыми прядками.

Второе это добавление новых прядок из общей массы волос, которые добавляются к части прядки (с подхватом) и уже перекидываются на другую сторону. Оба варианта выглядят практически одинаково, но второй вариант делает плетение более крепким.

Отделяем у лба секцию волос и делим ее на 2 части.

Теперь нужно взять новую прядку из общей массы волос слева (№3). На этом этапе выбираем технику плетения. В первом варианте (без подхвата) отделенную прядку №3 можно сразу перекинуть на другую сторону через верх прядки №1 и соединить ее в одну прядь с прядью №2. Либо плести второй вариант с подхватом.

Для второго варианта нужно от первой прядки отделить тонкую прядочку с краю. Соединить ее с новой прядкой №3 и уже ее перекинуть через верх прядки №1 и соединить вместе с прядью №2.

Сделайте аналогичный шаг с другой стороны: отделите новую прядку из общей массы волос справа и перекиньте через верх к первой пряди и соедините их в одну прядь. Т. е. в руках у вас должно оставаться всего 2 широкие прядки. На этом этапе уже виден рисунок плетения.

Продолжаем плетение, захватывая новые прядки по бокам головы и перекрещиваем, перекидываем на другую сторону. Главное следить за толщиной новых прядок, они должны быть одинаковые.

После того, как свободные волосы закончились и вы вплели в колосок все волосы слева и справа, продолжаем заплетать косу — отделяем с краю тонкую прядь и через верх перекладываем ее на другую сторону.

Получился красивый колосок! Прическу можно зафиксировать лаком для волос, так она будет лучше держаться.

Видео1. Как заплести колосок

Видео2: как заплести колосок самой себе

Прически с колоском: фото

Колосок подходит для длинных и средних волос. Его можно заплетать в качестве ежедневной прически, либо как вариант на праздник, украсив при этом прическу аксессуарами. Косичку можно немного расправить, сделав ее немного толще и объемней. По центру косы можно вставить бусинки или уложить косичку по кругу в элегантный цветок, распушив перед этим прядки. Посмотрите, как стильно и женственно выглядит колосок на волосах. Тренируйтесь в плетении и у вас обязательно получится!

Шикарный колосок на бок. По голове можно заплести французскую косу из тонких прядок и закончить плетение колоском из свободных волос. Если брать очень тонкие прядки при плетении колоска, на голове получается такой красивый изгиб, в котором практически не заметно прядок и самого плетения.

 

Вы уже пробовали заплетать себе колосок? Делитесь в комментариях!

Как плести колосок: пошаговая инструкция для начинающих

Прическа колосок — одна из самых часто используемых в наше время. Также имеет названия «французская коса» или «дракончик». Не сложно догадаться, что придумана она была во Франции.

Идеальна для прогулок в ветреную погоду, когда шевелюра обычно лезет в глаза и всячески мешает. Очень удобна для девочек школьного возраста, поскольку коса за целый день не расплетается. Эта прическа — сочетает в себе черты простоты и элегантности одновременно.

Для идеального плетения вы можете посмотреть, как плести колосок на видео:

Выполнив технику несколько раз, вы можете с легкостью разнообразить прическу лентами или цветными прядями, а также сделать более сложный вариант прически. Преимущество в том, что такая коса подойдет обладательницам любого типа волос: тонких, прямых, волнистых или кудрявых. Обладательницам пышной шевелюры придется потрудиться, но это того стоит.

Правила, как плести колосок

Для начала ознакомимся с некоторыми правилами, чтобы плетение выглядело как можно более выигрышно:

• Перед началом нужно тщательно вымыть голову с шампунем и бальзамом. Такая нехитрая процедура сделает шевелюру послушной.
• Желательно сначала попробовать заплести косу на другом человеке, чтобы пальцы привыкли к нужным движениям.
• Можно поставить пару зеркал, чтобы поправлять выбившиеся локоны.
• Чтобы избежать «петухов», каждую прядь туго затягивайте.
• Старайтесь выхватывать прядки одинаковой толщины. Для большей элегантности выбирайте пряди потоньше.
• Для создания легкой небрежности можно выбрать несколько прядок и не заплетать их в косу.
• Небольшая хитрость: если вы сделаете дракончика на ночь, то на утро получите шикарные волнистые прядки без всяких плоек и специальных расчесок.

Варианты плетения колосок (с фото)

Плетение колосок можно разнообразить различными способами, для этого далее вы найдете инструкцию и варианты плетения.

Итак, пошаговая инструкция, как плести колосок:

1. Соберите хвостик на макушке. Закрепите резинкой того же цвета, что и локоны. Если такой резинки не имеется, можно спрятать ее в дальнейшем следующей прядкой волос.
2. Захватите волосы с обеих сторон от зафиксированной пряди.
3. Пряди справа перенесите влево, а центральную перенесите над правой.
4. Левую прядь отправьте вправо, она должна пройти над правой, как показано на рисунке.
5. Центральные локоны пронесите над левой. У вас должен получиться тугой узел.
6. Продолжайте пока не доберетесь до области шеи.
7. После этого заплетайте обычную косу или оставьте хвостик, закрепив резинкой.
8. Наша французская коса готова. Резинку, удерживающую первую прядь, вы можете разрезать и убрать или спрятать. Немного расправьте локоны для придания объема. Сбрызните лаком, чтобы прически держалась дольше. Вот вы и узнали, как плести колосок.

Существует множество вариантов плетения со своими тонкостями. Самые известные:

Рыбий хвост

Отлично подходит как на каждый день, так и для торжественного мероприятия. Чтобы укладка смотрелась празднично, добавьте широкую атласную ленту или повяжите громоздкую резинку. За основу берется плетение из двух прядок и выглядит очень аккуратно и в то же время не замысловато. Существует несколько способов заплести «щучий хвост», вот один из них:

• Вымойте голову, разделите пряди на 2 ровные части. Если вы пока не решаетесь заплести на распущенных волосах, попробуйте за основу взять конский хвост. Сделайте хвостик, завяжите резинкой и начинайте плести от основания резиночки.
• Гребешком с редкими зубчиками отдели одну прядку и накрест наложи ее на прядь с другой стороны, а потом наоборот — левую на правую.
• Повторяйте это действие до конца длины, на кончиках можно заплести косичку или оставить кончики распущенными.
• Закрепите резинкой.

В моде легкая небрежность, это огромное преимущество для тех, кто еще не успел набить руку и боится «петухов». Теперь можно гладко и туго не затягивать, наоборот, лучше будет смотреться неплотное плетение. Также вы можете выпустить пару прядок около ушей и закрутить на плойку. Не забывайте пользоваться термозащитными средствами. Выбирайте известных проверенных производителей, лучше приобретайте уходовые средства в профессиональных магазинах. Так вы можете не опасаться, что ваша шевелюра через какое-то время станет ломкой и безжизненной.

Даже у такой простой укладки есть несколько вариантов плетения. Вы можете начинать заплетать не с макушки, а, например, задействуя длинную челку, ее также можно заплести в косу. Если хотите необычного образа или присматриваете прическу для выпускного бала, заплетите две косички и повяжите кончики яркой атласной лентой.

Можно сделать «мальвинку». Возьмите две прядки с двух сторон головы, сплетите их и скрепите небольшой резиночкой нейтрального цвета. Такой образ отлично подойдет для свидания или романтической прогулки.

Подходит как ребенку в школу, так и взрослой девушке. С маленьким колоском вы всегда будете выглядеть очень нежно и женственно. На ночь можно не расплетать, тогда на утро вы получите роскошные волны—локоны.

Рыбий хвост наоборот

Такое плетение походит для обладательниц тонких прядок, ведь оно более объемное. Для начала вымойте голову и воспользуйтесь стайлинговым среством, чтобы локоны были послушнее и ничего не расплеталось. Плести нужно также, пропуская одну прядку под другой.

Водопад

Коса—водопад прекрасно подойдет и для средних волос, но эффектнее будет смотреться на длинных. Сначала попрактикуйтесь на подруге, чтобы набить руку или посмотрите обучающее видео и можно приступать к процессу. Небольшая инструкция:

• Вымойте голову и нанесите стайлинговое средство. Можно нанести пенку для придания большего объема, высушите.
• Отделите 3 пряди сбоку у виска. Они должны быть одинаковы по толщине.
• Начинайте плести обычную косу, как показано на рисунке ниже. Вы можете заплетать косичку до противоположного виска или заплести 2 косы с обеих сторон и посередине скрепить резинкой.
• Для закрепления немного сбрызните результат лаков или спреем.

Плетение наоборот и множество других

Вы можете заплетать не одну, а две или более кос. Даже можно сделать ободок из косы.

Чтобы научиться делать такую укладку на собственных волосах, сначала можно потренироваться на другой девушке или на дочке. Если вы решили сделать себе, то обязательно используйте 2 зеркала — впереди и сзади, так вы добьетесь большей симметричности. Если прядки длинные и густые, возьмите несколько заколок и заколите ненужные, чтобы не путались и не мешались. При придания дополнительного объема воспользуйтесь специальным средством. Не старайтесь все сделать идеально, легкая небрежность добавит дополнительный шарм. Сначала освойте классический вариант колоска, затем переходите к более сложным техникам. Создавая каждый день новый образ, вы сможете очаровать ваших знакомых и просто прохожих на улице.

Практикуясь, вы сможете освоить любую технику. Достаточно будет 15-20 минут, немного усидчивости и ваш образ готов.

Понравилась статья? Помоги нашему сайту, расскажи о статье друзьям:

Как заплести колосок ребенку: пошаговая инструкция 🚩 Прически

Колосок уже не один десяток лет удерживает планку лидерства среди других причёсок, подходящих взрослым и детям. Он выигрышно смотрится с любым нарядом, на любых волосах, даже коротких — до плеч.

Существует несколько видов колосков. Освоить тонкости их плетения, следуя инструкции, просто. С этим справится даже ребёнок.

Пошаговая инструкция

• Взять толстую прядь волос на уровне макушки. Разделить её на 3 равных части, как для обычной косы. Принцип плетения аналогичный, только пряди не накладываются друг на друга, а подкладываются снизу.
• Сделав первое переплетение, к боковым прядям, захватываются новые, из свободных волос.
• Ведём одинаковый рисунок до тех пор, пока не закончатся распущенные волосы и мы не дойдём до шеи.
• Коса плетётся также, с подкладыванием прядей друг под друга.
• Чтобы колосок стал более объёмным, можно немного вытянуть боковые части.

• Разделить волосы на 2 равные части, по направлению от лба к шее. Каждая половина будет основанием для косы.
• Взять толстую прядь, отступив от линии начала роста волос 5-7 см. Разделить её на 3 части.
• Приступить к плетению кос по классическому варианту.

• Взять прядь в 5 см. от лба. (По желанию можно начинать плетение с макушки). Разделить её на 2 половины.
• От каждой части отделить небольшую прядь и перекинуть на вторую половину.
• После 3 переплетений к каждому перекиду присоединяются новые прядки. Они пойдут в основу косы.
• Техника «рыбьего хвоста» используется до кончика колоска. Он будет более объемным, если аккуратно потянуть каждое переплетение.

Используя технику плетения «рыбьего хвоста», заплетаем колосок не туго, иначе воздушности добиться не удастся. Лучше начинать такую косу с затылочной части головы. Причёска будет смотреться максимально объёмно, если в конце работы над причёской немного повытягивать некоторые пряди.

Усвоив принцип создания разных видов колоска, можно смело экспериментировать. Проплетать косу, обрамляя лоб, как ободок, пускать её по окружности головы, либо переплести между собой сразу несколько колосков. Всё зависит от фантазии.

На плетение подобных колосков у новичка, в среднем, уходит около 10 минут. При отработке техники, это время сокращается до 3-5 минут, в зависимости от сложности причёски и длины волос. Какой бы вариант не был выбран, коса даже у самой активной девочки, продержится целый день. Поэтому колоски для детей — оптимальный вариант. Волосы долгое время не выбиваются из причёски, не лезут в глаза. 

Для закрепления информации о способах плетения колоска, можно воспользоваться видео-уроками в интернете. 

Как заплести колосок самой себе на длинные волосы пошагово 🚩 Прически

 

Чтобы прическа получилась аккуратной и не рассыпалась, ее лучше делать на второй день после мытья волос. Пряди тщательно расчесать, обработать любым увлажняющим спреем. Препарат сделает волосы более послушными и гладкими, придаст им блеск.

Если хочется заплести идеально гладкую косу, пряди можно выпрямить утюжком. Но делать это не обязательно, «колосок» красив на любых волосах: кудрявых, слегка волнистых, прямых.

Начать лучше с простого базового «колоска». Отделить широкую прядь на лбу, разделить ее на 3 части. Челку можно заколоть, либо вплести в косу.

Левую прядку провести под правую, над центральной частью волос. Слегка затянуть, повторить процедуру с правой прядкой. При следующем переплетении взять с левой стороны немного волос из основной части и добавить их к рабочей прядке. То же повторить с правой стороны.

Продолжать плетение, постепенно вводя в работу тонкие прядки слева и справа. Они должны иметь одинаковую толщину, иначе коса получится неравномерной. Степень натяжения средняя, слишком слабое плетение быстро распадется, а туго затянутая коса не будет выглядеть объемной.

Довести плетение до затылка, в этом месте свободные волосы должны быть полностью вплетены в косу. Дальше перекрещивать пряди в обычном порядке, дойдя до конца, закрепить косичку тонкой резинкой в цвет волос.

На основе базовой прически можно придумать интересные укладки в различных стилях. «Колосок» подходит для повседневной носки и вечерних выходов, все зависит от подобранных аксессуаров.

Самый простой вариант – оставить косу свободной, украсив кончик объемной резинкой или заколкой интересной формы. Для вечернего выхода косу можно подвернуть внутрь плетенки, заколов шпильками. «Колосок» приобретет дополнительный объем и будет выглядеть очень празднично. Такую прическу украшают декоративными гребнями, искусственными цветами, шпильками с дополнительным декором.

Обладательницам красивых длинных волос понравятся и прически, сочетающие «колосок» с распущенными прядями. Доплетя до затылка, работу останавливают, закрепляют волосы резинкой или заколкой, оставляя пышный конский хвост на спине. Еще один вариант – плести «колосок» поверх распущенных волос. Для этого в косу вплетают только тонкие прядки из верхней части волос, оставляя нижние свободными. В тоге плетенка покрывает всю голову и заканчивается тонкой косичкой, теряющейся в массе волос.          

Простой и эффектный «колосок» должны освоить все девушки с длинными волосами. Прическа  выручит в любой ситуации, легко трансформируясь из повседневной в вечернюю.

Как плести косу на выворот: пошаговая инструкция, видео, фото

Обыкновенной косичкой сегодня никого не удивить, поэтому мы предлагаем вам изучить, как плести изумительную косу на выворот. Она не только красиво выглядит, но и имеет свойство преображать негустую шевелюру, прибавляя ей привлекательного объема. Мы не только расскажем вам о технике плетения такой косы, но и научим делать стильные прически с ней в основе. Будет интересно и познавательно!

[youtube]https://www.youtube.com/watch?v=2eO4Fw7kOHU[/youtube]

Все готовы к уроку?

Принцип плетения такой косички поначалу может показаться сложным, однако на самом деле он слишком элементарен, чтобы не получиться. Такая прическа непременно удастся у всех, кому знакомо плетение стандартной косички. Но даже если не знакомо, никогда не поздно научиться.

• Первый шаг – это расчесывание волос. Это нельзя пропускать, чтобы прядки легко выделялись и не травмировались при плетении.
• Выделите 3 пряди. Если вы начинаете плести от самой макушки, то отделяйте локоны сверху головы.
• Левую прядь положите под центральную, затем правую направьте на центральную, а потом левую наверх пряди справа.
• При плетении стоит довольно туго затягивать пряди, чтобы коса получилась надежнее.
• Теперь нужно сделать так, чтобы левая прядь оказалась в центре. Для этого переложите все прядки в правую руку и переверните наверх 2 крайние части волос.
• Проберитесь под левую прядку с краю, подхватите немного свободных волос и присоедините их к центральной пряди.
• Левой рукой держите основание косички, 2 крайние пряди переверните наверх.
• Крайнюю правую прядь положите на центральную прядку, подключив к ней часть свободных волос.
• Вот и весь принцип плетения французской косы.

Интересно: Коса Рыбий хвост: как плести, схемы и фото

2 милые косички

Самой себе можно также заплести 2 косички таким способом. Этот фото-урок подскажет вам, как это правильно делать.

Косы с канекалоном

2019 сезон предлагает модницам добавить в свой имидж новых красок и подчеркнуть свою индивидуальность. Если на яркое окрашивание волос вы не готовы, можете использовать канекалон – синтетические прядки различных оттенков.

Принцип плетения такой косы имеет лишь одну особенность: создайте несколько плетений, а затем присоедините к каждой из 3 частей волос прядь канекалона.

Интересно: Ультрамодные прически с канекалоном

Коса набок

Невероятно женственно и романтично выглядит французская коса, заплетенная набок. Ее отличие от классической техники в том, что вы начинаете плетение от виска и направляетесь к противоположному уху.

Такая техника легко превращается в изящную вечернюю прическу, если вы завьете пару прядей у лица, а отдельные звенья косы растяните в противоположные стороны для объемности. Также отличной идеей будет украшение прически цветами, декоративными шпильками, красивой заколкой или вплетение лент.

Коса сбоку

Потрясающе смотрится прическа, в которой французская коса занимает боковое положение.

Обучившись плетению диагональной косы, вы без труда повторите и этот вариант. Для ее создания следует выделить 3 пряди и плести французскую косичку сначала вдоль лба, а затем по направлению вниз сбоку.

Вывернутая коса «рыбий хвост»

Потрясающе будет смотреться коса в технике «рыбий хвост» на выворот. Это замечательный выбор прически как для будней, так и для праздничных событий.

• Соберите верхнюю часть волос в хвост чуть ниже макушки.
• С помощью пальцев проделайте над резинкой отверстие и протяните сквозь него весь хвост.
• С двух боков захватите параллельные пряди волос, снова свяжите их хвостом вместе с предыдущим и протяните над резинкой по уже знакомой технике.
• После этого начинается плетение вывернутой косы «рыбий хвост». Для этого отделяйте крайние прядки и по центру одну располагайте под другой.
• В конце закрепите косу и растяните отдельные звенья.

Рыбий хвост с использованием резиночек

Интересно: Прически с косами: фото

Косичка на выворот из 4 прядок

Это еще более интересный вариант на тему обратной косы. Плетение из 4 прядок выглядит более объемным и креативным – такая прическа точно не оставит вас без внимания.

• Отделите в области макушки часть волос и разделите ее на 4 равные доли.
• Процесс начинается с левой прядки. Ее следует расположить под следующие 2 прядки, а затем провести над самой правой.
• Затем наступает очередь правой пряди, которую продевают под двумя соседними и проводят поверх левой.
• Свободные волосы заводятся под 2 левые части и выводятся над правой.
• Такие же манипуляции нужно провести с правой частью.
• Вот, собственно, и весь принцип плетения такой оригинальной косички.

 Загрузка …

Коса с лентой

Плести косу на выворот с лентой совсем не так трудно, как может показаться на первый взгляд. Освоив простую технику, вы легко повторите эту задумку на любое торжественное мероприятие.

Весь принцип плетения строится на данной схеме.

Эти пошаговые фото в команде с нашим описанием помогут вам быстрее разобраться в премудростях этого эффектного плетения.

• Выделите прядь у виска и закрепите под ней ленточку.
• Разделите выбранный локон на 3 части. При этом лента возьмет на себя роль 4 пряди, которая располагается третьей по счету.
• Первую прядку расположите под второй, а потом под нее направьте ленту.
• К крайним прядям подключите добавочную часть из свободных волос и положите ее под низ.
• По такому принципу создавайте всю косу, а кончик в завершении слегка начешите.

Идеи причесок

Идей №1

Обратное плетение способно преобразить любую прическу и сделать ее гораздо интереснее. Например, 2 пучка выигрышней смотрятся с косичками от затылка. Попробуйте сами!

• Первым делом разделите волосы на 2 половины путем вертикального пробора по центру.
• Одну половину завяжите в высокий пучок, чтобы она не мешала.
• Из второй части волос плетите обратную косу от затылка по направлению вверх. Проще всего это сделать, наклонив голову вниз.
• Когда вы доберетесь до верха, заберите волосы в хвост.
• Те же манипуляции с плетением косы и созданием высокого хвостика проделайте со второй половиной волос.
• Получившиеся хвостики начешите и сформируйте в пучки.

[stextbox id=’warning’]

Интересно! Пучки получатся объемнее и текстурнее, если разделите хвост на 2 широких пряди, начешите, переплетите вокруг другу друга и только потом закрутите в пучок.

[/stextbox]

Идея №2

Хотите создать потрясающий образ без особых усилий? Тогда эффектная французская коса – это идеальный для вас вариант. Начинайте плести такую косичку от самого затылка, а потом пустите по голове в виде ободка. Если длины ваших волос недостаточно для такого варианта, заплетите 2 косички, каждая из которых будет выполнять роль половины импровизированного ободка.

Интересно: Простые прически на каждый день

Идея №3

Длинные волосы – это ваша гордость? Но, согласитесь, всегда ходить с распущенной шевелюрой – это невероятно скучно. Совершенно другой результат получится, если заплести 2 косы в дополнение к ниспадающим локонам.

Идея №4

Сочетание хвоста и косы – ультрамодный вариант прически, на который мы советуем обратить внимание всем модницам. С таким подходом даже банальный хвостик приобретает более креативное выражение. Техника выполнения этой прически элементарна – нужно лишь выделить широкую прядь и плести косу до основания хвоста. После того как хвостик будет сформирован, выделите одну прядку и перекрутите ее вокруг резинки.

Идея №5

Трендовые прически также делают ставку на легкую небрежность. Например, можно заплести 2 обратные косички и сформировать калачик из них в нижней части головы. Чтобы добиться модного эффекта беспорядка можно выправить из прически отдельные прядки или же отправиться с ней спать – наутро трендовый образ получится сам собой.

Идея №6

Данный мастер-класс пошагово с фото рассказывает, как плести косу на выворот и превращать ее в стильный пучок.

Идея №7

Данная прическа схожа по принципу с предыдущим вариантом, однако в финале создается один небрежный пучок в области затылка.

Идея №8

Если же закончить плетения не пучками, а низкими хвостиками, получится такая оригинальная прическа на каждый день. Такой вариант можно заплести ребенку, но и на взрослой девушке он будет смотреться замечательно.

Если вы хотите узнать, как плести косу на выворот, фото, видео и описания из нашей статьи могут стать лучшими помощниками для вас. Потратьте на такой урок всего 10 минут своего времени и потом вы сможете как угодно часто создавать эффектные прически.

[youtube]https://www.youtube.com/watch?v=XrgFLSjPMPI[/youtube]

Как плести колоск: поэтапное обучение

Все мы с детства знаем выражение «длинная коса — девичья красота», мы помним, что мальчики, желая выразить свою симпатию девочкам, тянут их за косички. Коса — это прическа, которую люди научились плести много лет назад и которая вряд ли когда-нибудь выйдет из моды. Есть много разных способов плести косы: афрокосы, «драконы», рыбий хвост, французские косички, корзиночки и др. Сегодня мы поговорим о том, как плести колосок.

Для начала нужно хорошо расчесать волосы.Если волосы спутанные, то отделить пряди друг от друга будет намного сложнее. И даже если вы умеете плести косичку-колосок и умеете это делать, на спутанных волосах прическа будет смотреться неаккуратно и некрасиво.

Возьмите три пряди волос на самом верху, переплетите их один раз между собой, как при создании обычной косы. Затем поочередно добавляйте тонкие пряди слева и справа к имеющимся основным прядям. Таким образом, вскоре все волоски станут частью этой сложной структуры.Украшением прически могут служить шиньоны, шпильки, невидимки и ленты. Если вы собираетесь вплести ленту в волосы, то первый виток ленты вокруг косы должен быть у самого ее основания. Для выпускного вечера или свадебного торжества подойдет прическа, украшенная жемчужными бусинами.

Помимо традиционного варианта прически, которая плетется сверху вниз, в настоящее время распространены нестандартные ее варианты. Далее поговорим о том, как научиться плести колоск, идя снизу вверх и заплетать вокруг головы.

Чтобы создать асимметричную и небанальную прическу, можно набросить волосы модели на лицо и взять три прядки на затылке. Их также необходимо скрестить между собой, как обычно вы перекрещиваете основные верхние. Затем поднимайтесь снизу вверх, каждый раз вставляя с боков дополнительные пряди. В общем, все так же, только в обратном направлении. Когда кома достигнет макушки, продолжайте плести его по обычному сценарию. Результат вас сильно удивит: косичка сначала идет вверх по голове, а потом падает вниз.

Можно попробовать сделать шип с уклоном в сторону. Возьмите три пряди не посередине головы, а справа или слева. После этого добавьте волосы с той стороны, с которой осталось больше, к каждой из трех основных прядей по очереди. Ту небольшую часть волос, которая осталась с другой стороны, можно либо добавить в косу на любом из этапов работы с волосами, либо оставить простую распущенную прядь. В последнем случае завейте его занавеской, чтобы образ выглядел законченным.

Хотите узнать, как сплести колосок, похожий на искусственную косу украинской дивы Тимошенко? Это такая же косичка, только к основной прядке по кругу добавлены волосы. Такую прическу часто называют корзиной, ведь плетение волос по внешнему виду напоминает плетеную корзину. Корзинки часто включают не все волосы, а только тонкие пряди. В этом случае получается, что коса идет вокруг распущенных волос девушки. Конец косички фиксируется невидимкой или обычной шпилькой.Количество косичек вокруг головы может быть разным. Один, два или пять? Решать только вам! В этом вопросе лучшими советчиками будут не ваши парикмахеры и инструкции, а ваша собственная фантазия и чувство стиля.

Если волосы недостаточно длинные и не покрывают всю голову, сделайте половину волос. Если вы умеете плести колосок, то полуволос не будет для вас проблемой. Техника плетения у них такая же. Если у вас густые и густые волосы, поэкспериментируйте с вариантами из пяти или семи основных прядей, и вы получите широкую объемную косу с одной стороны и красиво уложенные волосы с другой.Совмещая половину волос с остальными волосами, можно использовать не шпильки, а большие шпильки: они будут выглядеть ярче и эффектнее!

Теперь вы знаете, как плести колосок, и можете порадовать друзей своим мастерством!

Стадии развития колосков и роль АБК в аборте зачатков колосков влияют на конечный урожай ячменя (Hordeum vulgare L.) | Ботанические исследования

Аббас Г., Сакиб М., Ахтар Дж., Хак МАУ (2015) Интерактивные эффекты засоления и дефицита железа на различные генотипы риса.J Plant Nut Soil Sci 178: 306–311

CAS Google Scholar

Абдель-Карим (1996) Исследования устойчивости некоторых сортов винограда к стрессу. Кандидат наук. диссертация Факультет сельского хозяйства Каирского университета

Ахмед И.М., Дай Х, Чжэн В., Цао Ф, Чжан Дж, Сан Д., Ву Ф (2013) Генотипические различия в физиологических характеристиках устойчивости к засухе и засолению, комбинированному стрессу между тибетскими дикими животными. и культурный ячмень.Биология растений 63: 49–60

CAS Google Scholar

Albacete A, Ghanem ME, Martínez-Andújar C, Acosta M, Sánchez-Bravo J, Martínez V, Lutts S, Dodd IC, Pérez-Alfocea F (2008) Гормональные изменения, связанные с разделением биомассы и нарушением роста побегов у засоленных растений томата ( Solanum lycopersicum L.). J Exp Bot 59: 4119–4131

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Aldesuquy HS (1991) Снижение солевого стресса на содержание углеводов и азота в флаговых листьях пшеницы во время наполнения гормональными обработками.J Appl Sci 1: 103–127

Google Scholar

Аль-Хаффаф С., Аднан А., Аль-Асади Н.М. (1990) Динамика роста корней и побегов практически при различных уровнях солености и водного стресса. Argic Water Manage 18: 63–75

Google Scholar

Alqudah A, Schnurbusch T (2014) От зачатка ости до опрокидывания является наиболее решающая фаза развития для выживания колосков ячменя.Funct Plant Biol 41: 424–436

Google Scholar

Amzallage GN, Lerner HR, Poljakoff Mayber A (1992) Взаимодействие между минеральными питательными веществами, цитокиненом и гиббереллином во время роста сорго при высокой солености NaCl. J Exp Bot 43: 81–87

Google Scholar

Arisnabarreta S, Miralles DJ (2006) Урожайность двух- и шестирядного ячменя, выращенного в контрастных азотных средах.J Agric Crop Sci 192: 178–185

Google Scholar

Аслам М.П., ​​Куреши Р.Х., Ахмед Н. (1993) Метод быстрого скрининга на толерантность к соли в рисе ( Oryza sativa L.). Растительная почва 150: 99–107

Google Scholar

Аткинсон Н.Дж., Лилли К.Дж., Урвин П.Е. (2013) Идентификация генов, участвующих в ответе на одновременные биотические и абиотические стрессы. Физиология растений 162: 2028–2041

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Бэкон М.А. (1999) Биохимический контроль разрастания листьев во время засухи.Регламент выращивания растений 29: 101–112

CAS Google Scholar

Bacon MA, Wilkinson S, Davies WJ (1998) pH-регулируемое размножение листовых клеток у засушливых растений зависит от абсцизовой кислоты. Физиология растений 118: 1507–1515

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Багес М., Сараби Б., Гашгайе Дж., Сули И., Нагаз К. (2018) Достоверность дискриминации изотопов углерода в качестве критерия отбора зерна в двух староместных сортах ячменя при недостаточном орошении соленой водой на юге Туниса.Биотехнология растений 35: 1–14

Google Scholar

Basalah MO (2010) Влияние засоления на прорастание семян и рост рассады Solanum melongena L. J Agric Res Kafer El-Sheikh Univ 36: 64–73

Google Scholar

Бен Ганем Х., Эль Фела М. (2011) Inscription d’une varété d’orge ‘kounouz’ в официальном каталоге Туниса, где хранятся источники.Annales de l’INRAT 84: 168

Google Scholar

Бен Юсеф С., Эль Фела М., Чакрун М. (2011 г.) Inscription d’une varété d’orge ‘Lemsi’ в официальном каталоге Туниса, где хранятся источники. Annales de l’INRAT 84: 171

Google Scholar

Буссен Х., Бен Салем М., Слама А., Маллек-Маалей Э., Резгуи С. (2016) Оценка индексов засухоустойчивости рекомбинантных инбредных линий твердой пшеницы.https: //www.researchgatenet/publication/268268090

Брессан Р.А., Сингх Н.К., Ханда А.К., Кононович А., Хас-Эгава П.М. (1985) Стабильная и нестабильная толерантность к NaCl в культивируемых клетках табака. В: Freeling M (ed) Генетика растений. Liss, New York, pp 755–769

Google Scholar

Cao WX, Wang Z, Dai TB (2000) Изменения уровней эндогенных гормонов растений во время развития цветков у генотипов пшеницы с разным размером колоса.J Integr Plant Biol 42: 1026–1032

CAS Google Scholar

Chaabane R, El Faleh M, Ben Salah H, Ben Naceur M, Abdelly C, Ramla D, Nada A, Saker M (2009) Молекулярная характеристика генотипов тунисского ячменя ( Hordeum vulgare L.) с использованием микросателлитов ( SSR) маркеры. Eur J Sci Res 36: 6–15

Google Scholar

Colla E, Coune P, Liu Y, Pletnikova O, Troncoso JC, Iwatsubo T, Schneider BL, Lee MK (2012) Стресс эндоплазматического ретикулума важен для проявлений α-синуклеинопатии in vivo .J Neurosci 32: 3306–3320

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Коллинз Дж. К., Керриган А. П. (1974) Влияние кинетина и абсцизовой кислоты на водный и ионный транспорт в изолированном корне кукурузы. Новый Фитол 73: 309–314

CAS Google Scholar

Крамер Г.Р., Кришнан К., Абрамс С.Р. (1998) Кинетика удлинения листьев кукурузы. IV. Действие (+) — и (-) — абсисовой кислоты.J Exp Bot 49: 191–198

CAS Google Scholar

Дай А (2011) Засуха в условиях глобального потепления: обзор. хитрые междисциплинарные обзоры. Clim Change 2: 45–65

Google Scholar

Дэвис В.Дж., Чжан Дж. (1991) Корневые сигналы и развитие растений, растущих в высыхающей почве. Ann Rev Plant Physiol Mol Biol 42: 55–76

CAS Google Scholar

Додд И.К., Дэвис В.Дж. (1996) Взаимосвязь между ростом листа и накоплением АБК в зоне удлинения листа травы.Среда растительных клеток 19: 1047–1056

CAS Google Scholar

Du H, Wu N, Chang Y, Li X, Xiao J, Xiong L (2013) Дефицит каротиноидов ухудшает биосинтез ABA и IAA и по-разному влияет на устойчивость риса к засухе и холоду. Завод Мол Биол 83: 475–488

CAS PubMed Google Scholar

Dunlap JR, ​​Binzel ML (1996) NaCl снижает уровни индол-3-ацетиловой кислоты в корнях томатов независимо от вызванной стрессом абсциссовой кислоты.Физиология растений 112: 379–384

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Фарук М., Хуссейн М., Вакил А., Сиддик К.Х.М. (2015) Солевой стресс кукурузы: эффекты, механизмы устойчивости и управление. Обзор. Agron Sustain Dev 35: 461–481

CAS Google Scholar

Freundl E, Steudle E, Hartung W (2000) Апопластический транспорт абсцизовой кислоты через корни кукурузы: эффект экзодермы.Planta 210: 222–231

CAS PubMed Google Scholar

Ghanem ME, Albacete A, Martínez-Andújar C, Acosta M, Romero-Aranda R, Dodd IC, Lutts S, Pérez-Alfocea F (2008) Гормональные изменения во время старения листьев томатов, вызванного засолением ( Solanum lycopersicum л.). J Exp Bot 59: 3039–3050

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ghassemi F, Jakeman AJ, Nix HA (1995) Засоление земельных и водных ресурсов: человеческие причины, масштабы, управление и тематические исследования.UNSW, Сидней

Google Scholar

Grattan SR, Zeng LH, Shannon MC, Roberts SR (2002) Рис более чувствителен к солености, чем считалось ранее. Калифорния-сельское хозяйство 56: 189–195

Google Scholar

Хэнкс Р.Дж., Дандли Л.М., Карти Р.Л., Мейс В.Р., Помела Э., Кидман Р.Л., Рэйф Дж.М. (1989) Использование соленых сточных вод электростанций для орошения. Отчет часть 1.Изучение поливной воды и урожайности почв. Res Rep Utah Agr Exp Statia 128: 1–60

Google Scholar

Holloway RE, Alston AM (1992) Влияние соли и бора на рост пшеницы. Aust J Agric Res 43: 987–1001

CAS Google Scholar

Hose E, Sauter A, Hartung W (2002) Абсцизовая кислота в корнях — биохимия и физиология. В: Waisel Y, Eshel A, Kafkavi U (ред.) Корни растений: скрытая половина.Marcel Dekker Inc, Нью-Йорк, стр. 435–448

Google Scholar

Джамил А., Риаз С., Ашраф М., Foolad MR (2011) Профилирование экспрессии генов растений в условиях солевого стресса. Crit Rev Plant Sci 30: 435–458

Google Scholar

Каусар Ф, Шахбаз М., Ашраф М. (2013) Защитная роль окиси азота, нанесенной на листья, в Triticum aestivum при солевом стрессе. Turk J Bot 37: 1155–1165

CAS Google Scholar

Кернич Г.К., Халлоран Г.М., Флад Р.Г. (1997) Вариация продолжительности предцветовых фаз развития ячменя ( Hordeum vulgare ).Aust J Agric Res 48: 59–66

Google Scholar

Kirby EJM, Appleyard M (1987) Развитие и структура растения пшеницы. В: Lupton FGH (ed) Селекция пшеницы. Chapman & Hall, Лондон, стр. 287–311

Google Scholar

Кодзима М., Камада-Нобусада Т., Комацу Х, Такей К., Куроха Т., Мизутани М., Асикари М., Уегучи-Танака М., Мацуока М., Сузуки К., Сакакибара Х. (2009) Высокочувствительный анализ с высокой пропускной способностью гормонов растений с использованием модификации MS-зонда и жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии: приложение для профилирования гормонов в Oryza sativa .Физиология растительных клеток 50: 1201–1214

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Кумар В., Кумар Д., Сингх С.П., Чаучан С.П. (1987) Ответ баджры и пшеницы на различные уровни азота и фосфора, выращенные с соленой водой. Curr Agric 11: 59–64

Google Scholar

Läuchli A, Epstein E (1990) Реакция растений на солевые и натриевые условия.В: Танджи К.К. (ред.) Оценка и управление засолением сельского хозяйства. Руководства и отчеты ASCE по инженерной практике, том 17. ASCE, Нью-Йорк, стр. 113–137

Google Scholar

Lee SC, Luan S (2012) Передача сигнала ABA на перекрестке биотических и абиотических стрессовых реакций. Среда растительной клетки 35: 53–60

CAS PubMed Google Scholar

Mansour MMF (1994) Изменение роста, осмотического потенциала и проницаемости клеток сортов пшеницы при солевом стрессе.Биол Завод 36: 429–434

Google Scholar

Маркум К., Пессаракли М. (2006) Устойчивость к засолению и эффективность выделения солевых желез сортов дерновой травы бермудских. Crop Sci 46: 2571

Google Scholar

Маршнер П. (1971) Минеральное питание высших растений. Academic Press, Нью-Йорк

Google Scholar

Масленкова Л.Т., Занев Ю.Ю., Попова Л.П. (1993) Адаптация к засолению по данным реакций выделения кислорода ФСII в тилакоидах ячменя.J Plant Physiol 142: 629–634

CAS Google Scholar

Matsoukas IG (2014) Взаимодействие между сигнальными путями сахара и гормонов модулирует передачу сигнала цветков. Фронт Жене 5: 218. https://doi.org/10.3389/fgene.2014.00218

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

Miralles DJ, Ричардс Р.А., Слафер Г.А. (2000) Продолжительность периода удлинения стебля влияет на количество плодородных соцветий у пшеницы и ячменя.Aust J Plant Physiol 27: 931–940

Google Scholar

Миттал Р., Дубей Р.С. (1991) Влияние засоления на активность рибонуклеазы и статус нуклеиновых кислот в проростках риса, различающихся по солеустойчивости. Plant Physiol Biochem 18: 57–64

Google Scholar

Moral GLF, Miralles DJ, Slafer GA (2002) Инициирование и появление вегетативных и репродуктивных структур в процессе развития ячменя.В: Slafer JL, Molina R, Savin JL, Araus DA, Romagosa I (eds) Наука о ячмене: последние достижения от молекулярной биологии до агрономии урожайности и качества пищевых продуктов. Harworth Press, Нью-Йорк, стр. 243–268

Google Scholar

Маннс Р. (2005) Гены и солеустойчивость: объединяя их. Новый Фитол 167: 645–663

CAS PubMed Google Scholar

Naseer S, Nisar A, Ashraf M (2001) Влияние солевого стресса на прорастание и рост проростков ячменя ( Hordeum vulgare L.). Pak J Biol Sci 4: 359–360

Google Scholar

Netondo GW, Onyango JC, Beck E (2004) Физиология культур и метаболизм сорго и соленость II — газообмен и флуоресценция хлорофилла сорго в условиях солевого стресса. Crop Sci 44: 806–811

Google Scholar

Николас М.Э., Маннс Р., Самаракун А.Б., Гиффорд Р.М. (1994) Повышенный уровень CO2 улучшает рост пшеницы при засолении.Aust J Plant Physiol 20: 349–360

Google Scholar

Nilsen ET, Orcutt DM (1996) Физиология растений в условиях стресса: абиотические факторы. Wiley, New York, p 689

. Google Scholar

Okamoto M, Hanada A, Kamiya Y, Yamaguchi S, Nambara E (2009) Измерение абсцизовой кислоты и гиббереллинов с помощью газовой хроматографии / масс-спектрометрии. Методы Мол Биол 495: 53–60.https://doi.org/10.1007/978-1-59745-477-3_5

CAS Статья PubMed Google Scholar

Оуэнс С. (2001) Соль земли. Генная инженерия может помочь восстановить сельскохозяйственные угодья, утраченные из-за засоления. Представитель EMBO 2: 877–879

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Пирс С., Ванцетти Л.С., Дубковски Дж. (2013) Экзогенные гиббереллины вызывают развитие колосьев пшеницы в короткие дни только при наличии яровизации.Физиология растений 163: 1433–1445

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Пуркхейрандиш М., Комацуда Т. (2007) Важность генетики и одомашнивания ячменя в глобальной перспективе. Энн Бот 100: 999–1008

PubMed PubMed Central Google Scholar

R Основная команда (2018). R: Язык и среда для статистических вычислений.R Фонд статистических вычислений, Вена. https://www.R-project.org/

Reggiani R, Aurisano N, Mattana M, Bertani A (1994) ABA индуцирует накопление 4-аминобутрирата в проростках пшеницы. Phytochem 34: 605–609

Google Scholar

Riggs TJ, Kirby EJM (1978) Последствия для развития двухрядного и шестирядного колосов ярового ячменя: 1. Генетический анализ и сравнение характеристик зрелых растений.J Agric Sci 91: 199–205

Google Scholar

Сакр М.Т., Эль-Метвалли М. (2009) Снижение вредного воздействия солевого стресса почвы на рост, урожайность и содержание эндогенных антиоксидантов в растениях пшеницы путем применения антиоксидантов. Пакистан J Biol Sci 12: 624–630

CAS Google Scholar

Sakr MT, El-Hadidy M, Abo El-Kheer AM, Farouk S (2004) Физиологические исследования некоторых осмо-регуляторов на кануллах.Международный разговор микробиология и биотехнология в Африке и арабский Рейган 27–29, стр. 295–321

Сакр М.Т., Эль-Эмери М.Э., Фауда Р.А., Мовафи М.А. (2007) Роль некоторых антиоксидантов в смягчении стресса, связанного с засолением почвы. J Agric Sci Mansoura Univ 32: 9751–9763

Google Scholar

Sarabi B, Bolandnazar S, Ghaderi N, Ghashghaie J (2017) Генотипические различия физиологических и биохимических реакций на стресс засоления у дыни ( Cucumis melo L.) растения: перспективы отбора солеустойчивых староместных сортов. Plant Physiol Biochem 119: 294–311

CAS PubMed Google Scholar

Seo M, Jikumaru Y, Kamiya Y (2011) Профилирование гормонов и родственных метаболитов в исследованиях покоя и прорастания семян. В: Кермод Р.А. (ред.) Покой семян: методы и протоколы. Humana Press, Totowa, pp 99–111

Google Scholar

Шахзад А., Ахмад М., Икбал М., Ахмед И., Али Г.М. (2012) Оценка генотипов староместных сортов пшеницы на устойчивость к засолению на вегетативной стадии с использованием морфологических и молекулярных маркеров.Genet Mol Res 11: 679–692

CAS PubMed Google Scholar

Шеннон М.К. (1984) Селекция, селекция и генетика солеустойчивости. В: Staples RC, Toenniessen GH (eds) Устойчивость к засолению растений: стратегии улучшения сельскохозяйственных культур. Wiley, New York, pp. 231–254

. Google Scholar

Su YH, Liu YB, Zhang XS (2011) Взаимодействие ауксин-цитокинин регулирует развитие меристемы.Завод Мол 4: 616–625

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Suzuki N, Bassil E, Hamilton JS, Inupakutika MA, Zandalinas SI, Tripathy D, Luo Y, Dion E, Fukui G, Kumazaki A, Nakano R, Rivero RM, Verbeck GF, Azad RK, Blumwal E, Mittler R (2016) АБК требуется для адаптации растений к сочетанию солевого и теплового стресса. PLoS ONE 11: e0147625

PubMed PubMed Central Google Scholar

Taghipour F, Salehi M (2008) Изучение солеустойчивости иранского ячменя ( Hordeum vulgare L.) генотипы на стадиях роста проростков. Am – Eur J Agric Environ Sci 4: 525–529

Google Scholar

Томпсон Д.С., Уилкинсон С., Бэкон М.А., Дэвис В.Дж. (1997) Множественные сигналы и механизмы, которые регулируют рост листьев и поведение устьиц во время дефицита воды. Physiol Planta 100: 303–313

CAS Google Scholar

Тореч Ф. Р., Томпсон Л. М. (1993) Почвы и плодородие почв.Oxford University Press, Нью-Йорк

Google Scholar

Waddington SR, Cartwright PM, Wall PC (1983) Количественная шкала начального развития колоса и пестика у ячменя и пшеницы. Энн Бот 51: 119–130

Google Scholar

Wang R, Yu Z, Pan Q, Xu Y (1999) Изменения содержания эндогенных гормонов растений во время развития зерна пшеницы. Цзо Ву Сюэ Бао 25: 227–231

Google Scholar

Wang Z, Cao W, Dai T, Zhou Q (2000) Влияние экзогенных гормонов на развитие цветков и завязку зерна пшеницы.Регулятор роста растений 35: 222–231

Google Scholar

Whingwiri EE, Stern WR (1982) Выживаемость цветков у пшеницы: значение времени зарождения цветков по отношению к формированию конечных колосков. Дж. Сельскохозяйственные науки (Камб) 98 (25): 268

Google Scholar

Wilkinson S, Davies WJ (2010) Засуха, озон, АБК и этилен: новые идеи от клетки к растению и сообществу.Среда растительной клетки 33: 510–525

CAS PubMed Google Scholar

Willenborg CJ, Gulden RH, Johnson EN, Shirtliffe SJ (2004) Характеристики прорастания семян канолы с полимерным покрытием ( Brassica napus L.), подвергнутых воздействию влаги при различных температурах. AgroJournal 96: 786–791

Google Scholar

Wu Y, Kuzma J, Maréchal E, Graeff R, Lee HC, Foster R, Chua NH (1997) Передача сигналов абсцизовой кислоты через циклическую АДФ-рибозу в растениях.Наука 19: 2126–2130

Google Scholar

Youssef HM, Hansson M (2019) Перекрестные помехи между гормонами в колосье ячменя влияют на урожайность. Реплика растительной клетки 1: 1. https://doi.org/10.1007/s00299-019-02430-0

CAS Статья Google Scholar

Youssef HM, Eggert K, Koppolu R, Alqudah AM, Poursarebani N, Fazeli A, Sakuma S, Tagiri A, Rutten T, Govind G et al (2017) VRS2 регулирует опосредованное гормонами формирование паттерна соцветий ячменя.Нат Генет 49: 157–161

CAS PubMed Google Scholar

Цзэн Л., Шеннон М.К. (2000) Влияние засоления на урожай зерна и компоненты урожая риса при разной плотности посева. Agron J 92: 418–423

Google Scholar

Zhao GQ, Ma BL, Ren CZ (2007) Рост, газообмен, флуоресценция хлорофилла и содержание ионов голозерного овса в зависимости от засоления.Crop Sci 47: 123–131

CAS Google Scholar

Zhu B, Su J, Chong M, Verma DPS, Fare Y, Wu R (1998) Сверхэкспрессия гена Δ-пироллин-5-карбоксилатсинтетазы и анализ устойчивости к водному и солевому стрессу у трансгенного риса . Plant Sci 139: 41–48

CAS Google Scholar

Колосок — обзор | Темы ScienceDirect

17.3.2.3 Репродуктивное развитие

Репродуктивные органы семейства Poaceae (травы) являются основными единицами, определяющими урожай зерновых культур.Колоски являются основными единицами соцветий риса и обычно состоят из цветка, состоящего из переплетенных чешуек и палеи, образующих шелуху, двух лодикул, шести тычинок и одного пестика. Как сверхэкспрессия miR396 с результирующей подавляющей регуляцией его генов-мишеней, так и двойные мутанты по osgrf6 — osgrf10 показали аномальные колоски с открытой шелухой, длинные стерильные чешуйки и аномальное количество пестиков и тычинок (Liu et al., 2014). В частности, было высказано предположение, что открытая шелуха является результатом того, что лемма и палеа не растут достаточно нормально, чтобы дотянуться друг до друга.

Часть функции OsGRF6 и OsGRF10 в развитии рисовых цветков может быть объяснена прямой регуляцией транскрипции домена 2 рисового джумонжи (JMJD2) семейства jmjC , гена 706, который кодирует деметилазу h4K9 (

J ; Sun and Zhou, 2008) и O. sativa crinkly4 рецептор-подобная киназа ( OsCR4 ; Pu et al., 2012), два гена, необходимые для целостности шелухи, идентичности и количества органов цветка. Эта регуляция транскрипции, по-видимому, опосредуется прямым связыванием OsGRF6 или OsGRF10 с GA-чувствительными элементами (TAACARA, R = G или A), присутствующими в промоторах OsJMJ706 и OsCR4 , как было продемонстрировано in vitro с помощью сдвига электрофоретической подвижности анализ (EMSA) и in vivo с помощью ChIP или репортерных анализов в протопластах Arabidopsis .Интересно, что авторы также показали, что взаимодействие с OsGIFs усиливает транскрипционную активность как GRF6, так и GRF10 на промоторах OsJMJ706 и Os CR4 .

Было показано, что мутант риса rdh2 с измененной датой заголовка (эквивалентной времени цветения) имеет пониженные уровни OsGRF1 (Luo et al., 2005). Целенаправленное подавление OsGRF1 посредством РНК-интерференции привело к образованию маленьких листьев и задержке цветения, что указывает на то, что OsGRF участвует в регуляции не только роста и развития органов в вегетативной и репродуктивной фазах, но также может участвовать в регуляции времени цветения. в рисе (Луо и др., 2005).

Стоит отметить, что некоторые из выявленных к настоящему времени ТФ, которые, по-видимому, регулируют транскрипцию GRF в Arabidopsis , участвуют в идентичности цветочной меристемы и формировании цветочного паттерна (Pajoro et al., 2014; Schiessl et al., 2014 ; Winter et al., 2011; Янт и др., 2010). Удивительно, но ни у одного или нескольких мутантов GRF , проанализированных до сих пор у этого растения, фенотипы формирования цветочного рисунка не наблюдались (Liang et al., 2014; Kim et al., 2003). В любом случае, две линии доказательств подтверждают роль GRF в развитии двудольных цветов.

Во-первых, Arabidopsis gif1 — gif2 — gif3 тройной мутант имеет дефекты в развитии цветков, включая уменьшенное количество органов в каждом обороте, маленькие чашелистики и лепестки, неслитые или отсутствующие плодолистики, короткие кожные покровы семяпочек, дефектные гаметогенез и органы с мозаичной идентичностью, среди прочего (Lee et al., 2009, 2014; Liang et al., 2014).Во-вторых, сверхэкспрессия miR396 вызвала аналогичные фенотипы у Arabidopsis (Pajoro et al., 2014; Liang et al., 2014; Рисунок 17.3E) и табака (Yang et al., 2009), которые полностью дополнялись сверхэкспрессией нечувствительный к miR396 GRF (Liang et al., 2014).

Интересно, что некоторые из фенотипов, наблюдаемых у однодольных и двудольных растений, которые имели дефекты в комплексах GRF-GIF, такие как открытая шелуха у риса или маленькие лепестки и короткие покровы у Arabidopsis , были интерпретированы как результат дефекта в пролиферация клеток на уже установленных зачатках органов.Вместо этого др. Фенотипы, такие как мозаичные органы и количество дефектных органов в каждом обороте, подчеркивают роль сети miR396– GRF – GIF в формировании паттерна и спецификации цветочных органов.

Конечным продуктом репродуктивного развития являются семена, и их размер является основным фактором, определяющим урожайность сельскохозяйственных культур. Анализ экспрессии генов в различных линиях рапса ( Brassica napus ) выявил положительную корреляцию между содержанием масла и экспрессией BnGRF2 (Liu et al., 2012). Гетерологичная сверхэкспрессия BnGRF2 в Arabidopsis от промотора, специфичного для семян, увеличивала размер семян и содержание масла приблизительно. 30% из-за большего количества клеток в эмбрионе, не влияя на его структуру или размер клеток (Liu et al., 2012).

Spadix — обзор | Темы ScienceDirect

7 Дифференциация колосков

Дифференциация колосков начинается с появления цветочных зачатков. В то время как цветочные зачатки зарождаются в колоске, каждый зачаток цветка дифференцирует различные органы, составляющие цветочек (например,g., чешуйки у основания колоска, чешуи, чешуи, тычинок и пестика). В результате наступает период времени, в течение которого зачатки колосков, зачатки цветков и части цветков зарождаются одновременно.

С началом зачатия цветочного зачатка происходит фундаментальное изменение морфологического паттерна развития колоса, которое сохраняется до физиологической зрелости. До этого момента зачатки листьев и колосков инициируются и развиваются акропетально. Однако базальные колоски не начинают дифференцироваться первыми.Цветки в средней и нижней части зрелого колоса (около позиций колоска 5–13) первыми начинают зарождение цветков, причем дифференциация колосков происходит как акропетально, так и базипетально из средней и нижней части. Существует некоторое несоответствие между основными (Кирби, 1974) или дистальными колосками (Whingwiri, Stern, 1982), дифференцируемыми первыми. Некоторое несоответствие происходит из-за того, что инициация начинается в нижней средней центральной области, что приводит к более вероятным дистальным, чем проксимальным, колоскам; таким образом, самые дистальные колоски могут начать дифференцироваться последними, если равномерное развитие происходит как акропетально, так и базипетально.Внутри колоска зачатки цветков начинаются акропетально. МС начинает формирование цветков раньше побегов.

Удлинение стебля только начинается (т. Е. Стебель меньше 5 мм, а вершина находится ниже поверхности почвы), когда закладываются первые соцветия (Baker and Gallagher, 1983a; Nicholls, 1974). Это означало бы, что колоски начинают дифференцироваться очень скоро после двойного гребня, если предположить, что двойной гребень и начало удлинения междоузлий являются одновременными.

В литературе согласованы сообщения о том, что формирование цветков начинается до стадии TS, но сообщалось о значительных вариациях в количестве зачатков цветков на один колосок на стадии TS.Например, Кирби (1974, 1985) обнаружил около двух или трех цветков на колосках около средней и нижней части колоса на стадии TS. Whingwiri и Stern (1982) сообщают, что все колоски на стебле начали зарождение цветков до образования TS. Они отметили, что большинство четвертых цветков зарождались между 1 и 8 днями после образования TS, обычно в течение 3 дней. Около 48% третьих цветков зародились до образования TS, 40% после TS, а остальные одновременно с TS. Время посева, по-видимому, не сильно изменило интервал между зарождением цветков и образованием TS.За некоторыми исключениями, поступление азота, по-видимому, способствовало зарождению цветков, но не формированию TS, хотя N не влияло на скорость или продолжительность зарождения цветков (Langer and Hanif, 1973; Whingwiri and Stem, 1982). На более поздних побегах меньше цветков закладывалось до образования TS.

До того, как у Norin 10 и его производных произойдет значительное развитие цветков, чешуйки и зачатки чешуек разрастаются внутри колоска в большей степени, чем у стандартных сортов пшеницы (Fisher, 1973). Фишер объясняет это различие между генетическими линиями различиями в апикальном доминировании.Различия в апикальном доминировании могут объяснять различия в количестве зачатков цветков в колоске до появления зачатков тычинок, и что Norin 10 и его производные (т. Е. С большей склонностью к кущению и, предположительно, уменьшенным верхушечным доминированием) будут давать больше зачатков цветков перед тычинками. primordia зарождаются, чем у стандартной пшеницы (Fisher, 1973). Уильямс (1966a) дает относительные темпы роста, объемы, вес и длину различных органов колоса, а также всего колоса, показывает, что объем тычинок и плодолистиков в последовательных цветках внутри колоса меньше, и показывает, что продолжительность роста короче внутри колоса. последовательные соцветия; более короткая продолжительность следующих друг за другом цветков приводит к синхронности внутри колоса (Hay and Kirby, 1991).

Скорость развития колосков значительно варьируется в пределах колоса, при этом конечные колоски, центральные колоски, колоски чуть выше и ниже центральных колосков и базальные колоски имеют последовательно снижающиеся темпы развития (Barnard, 1955). Однако это не абсолютный образец скорости развития спайков (Barnard, 1955). Кирби (1974) обнаружил, что разница в количестве цветков в колосках различалась не из-за разной скорости зарождения, а скорее потому, что продолжительность зарождения была короче у нецентрально расположенных колосков, а Кирби и Апплярд (1987) предполагают, что скорость зарождения цветков практически одинаков для всех колосков.Расчетная скорость зарождения цветков обычно составляет от 0,02 до 0,04 цветков ° C ⁻¹ день ^−l (Kirby, 1974; Kirby and Appleyard, 1987; Whingwiri and Stern, 1982), или около 25 GDD между последовательными цветочками (Williams, 1966b). Температура и, возможно, свет являются основными факторами, влияющими на скорость развития колосков (Friend et al. , 1963; Hay and Kirby, 1991; Masle et al. , 1989a). Сообщается, что температуры выше 30 ° C во время формирования цветков вызывают полную стерильность (Owen, 1971; Saini and Aspinall, 1982).

Максимум 8–12 инициалов зачатков цветков присутствует на каждом среднем центральном колоске и около 6–8 на базальных и дистальных колосках, но менее половины из них являются плодовитыми соцветиями в период цветения, потому что по крайней мере половина из них прерывается или развивается недостаточно. до цветения, чтобы быть плодородным (Barnard, 1955; Engledow and Ramiah, 1930; Hay and Kirby, 1991; Herzog, 1986; Kirby, 1974,1985,1988; Kirby and Appleyard, 1987; Langer and Hanif, 1973; Siddique et al. , 1989; Single, 1964; Whingwiri, Stern, 1982).

Зарождение цветочных зачатков прекращается в нижних средних центральных колосках внутри шипа, когда начинает появляться флаговый лист (Baker and Gallagher, 1983a; Kirby, 1988). Неясно, прекращается ли зарождение цветочного зачатка одновременно для всех стеблей и всех колосков на стебле.

Прерывание цветков начинается при зарождении бутонов, или когда флаговый лист полностью вырос и зарождение цветков прекратилось и длится около двух филлохронов, после чего дальнейший аборт цветков не происходит; аборт заканчивается примерно при заголовке или цветении (Kirby, 1985, 1988; Langer and Hanif, 1973; Siddique et al., 1989). Предсказать, какие соцветия вырастут, сложно, но данные литературы согласуются с тем, что по крайней мере половина от общего числа инициалов цветков в колоске прервется или разовьется недостаточно для того, чтобы оплодотворить цветение. Whingwiri и Stern (1982) предполагают, что все соцветия, образовавшиеся после формирования конечного колоска, не разовьют зерно.

Гибель цветков наступает в период, когда стебель и цветонос растут наиболее быстрыми темпами (Siddique et al. , 1989).Предпоследняя междоузлия имеет максимальную скорость роста, и скорость роста цветоноса быстро увеличивается. В течение этого периода площадь листьев медленно уменьшается, хотя общий уровень фотосинтеза может изначально не снижаться, особенно когда включен фотосинтез колоса. Кирби (1988) интерпретирует это как поддержку гипотезы о том, что гибель цветков частично происходит из-за конкуренции между колосом и стеблем за ресурсы, предположительно, углеводы. Одна из трудностей с этой гипотезой состоит в том, что во время этой фазы часто доступны избыточные углеводы, и эти углеводы хранятся в ткани междоузлий, хотя резервы обычно хранятся ближе к периоду, близкому к цветению или после него (Asana and Williams, 1965; Blacklow ). и другие., 1984; Джудель и Менгель, 1982; Wardlaw, 1970).

Барнард (1955) обрисовал гистогенез спайка и пришел к следующим выводам. Лиственный лист, чешуйка, лемма, палеа, лодикулы и плодолистик рассматриваются как листовые придатки. Тычинки, боковые зачатки колосков и цветочные зачатки считаются гомологами пазушным вегетативным побегам. Фишер (1973) согласился с этой интерпретацией.

Как плести шипы: пошаговая инструкция

Если вам нравится стиль Джессики Альбы, то такую ​​же прическу вы легко сможете сделать и себе.

Внимательно посмотрите, как плести «колосок». Пошаговая инструкция демонстрирует весь процесс создания такого модного элемента. Легко научиться, немного потренируешься — и ты легко сможешь делать прически на основе суперпопулярного «колоска».

Прическа в стиле Джессики Альбы в 5 шагов

Прелесть этой прически — необычное сочетание гладких блестящих волос и рельефного «колоска». Сочетание разных фактур всегда выглядит свежо и оригинально.К тому же такая прическа просто идеальный состав — направление плетения полностью дублирует изгиб глянцевых прядей.

1. Разделите начесанные волосы, которые будут собираться в хвосте. Закрепите их, чтобы они не мешали дальнейшей работе, ведь плести себе «колоски» непросто. Это требует некоторой подготовки.
2. Начинайте плести «колоски» от противоположного виска, используя только те волосы, которые находятся в отделенной зоне.
3. Присоедините конец косы под волосы, используя шпильки в тон, как у Джессики.
4. Сформируйте «хвостик» с помощью гребешка. Свяжите его резинкой.
5. Последний шаг — взять прядь с изнанки хвоста и обернуть ею жевательную резинку. Шпильки надежно фиксируют волосы. Покройте волосы лаком.

Как плести «колоски»: пошаговая инструкция по созданию кружевной косы

Если вы отращиваете челку, то эта прическа идеально подходит для того, чтобы выглядеть стильно в этот непростой период.

· Перед тем, как плести колоски (пошаговая инструкция представлена ​​ниже), тщательно расчешите пряди и отделите небольшую часть волос ото лба.

Три блокирующих элемента переплетаются между собой. Сначала как на классической вертеле, а потом как на «френч» или «колоск». Это означает, что на каждом повороте к плетению прикрепляется определенное количество волос. В этом случае волосы плетутся только с одной стороны, как показано на фото. Попробуйте наклонить косу прямо на лицо, ближе к линии бровей. В этом случае имитацией челки станет ажурный «колосок».

· Продолжая постепенно добавлять пряди в плетение, вы дойдете до подбородка, а дальше нужно переходить к формированию правильной косички.Зафиксируйте его конец.

· Придайте волосам некоторую волнистость, ведь именно эта текстура локонов очень подчеркивает элемент прически «колоск».

Варианты прически с косами

Сегодня плетение на пике моды, а самый популярный элемент — «колосок». Прическа (как ее плести — мы рассмотрели подробно) имеет множество модификаций: все зависит от того, где и в каком направлении создается эта стильная деталь. Очень интересное сочетание взбитых волос, собранных в узел, и этого трендового элемента.Посмотрите на прическу, в которой хорошо видно, как плести «колоски». Пошаговые инструкции, наверное, не понадобятся, ведь большинство оригинальных причесок в своей основе, как правило, имеют стандартный алгоритм. Узнай это, и ты всегда будешь выглядеть как кинозвезда.

Контроль судьбы меристемы колосков кукурузы с помощью APETALA2-подобного гена undeterminate spikelet1

1. Джордж Чак,
2. Роберт Б.Мили и
3. Сара Хейк

1. Департамент биологии растений и микробов, Калифорнийский университет, Беркли, Калифорния 94720, США; Pioneer Hi-Bred International, Джонстон, Айова 50131, США; Центр экспрессии генов растений, Министерство сельского хозяйства и Служба сельскохозяйственных исследований США (USDA-ARS), Олбани, Калифорния 94710, Соединенные Штаты Америки

Аннотация

Упорядоченное производство меристем с определенной судьбой имеет решающее значение для правильной разработки архитектуры растений.Кукуруза меристема соцветия разветвляется несколько раз, образуя боковые меристемы с определенными судьбами. Образовалась первая меристема, меристема пары колосков дает две меристемы колосков, каждая из которых дает две цветочные меристемы. Мы определили ген, названный undeterminate spikelet1 ( ids1 ), который определяет детерминированную судьбу меристемы колосков и тем самым ограничивает количество продуцируемых цветочных меристем.В отсутствие Из-за функции гена ids1 меристема колосков становится неопределенной и дает дополнительные соцветия. Члены семейства злаковых различаются по количеству цветков в их колосках, предполагая, что ids1 могут играть роль в архитектуре соцветий у других видов трав. ids1 является членом семейства транскрипционных факторов APETALA2 ( AP2 ), которое участвует в широком диапазоне ролей в развитии растений.Выражение ids1 был обнаружен во многих типах зачатков боковых органов, а также в меристемах колосков. Наш анализ мутантного фенотипа ids1 и паттерна экспрессии показывает, что ids1 определяет детерминированные судьбы путем подавления неопределенного роста в меристеме колосков.

Развитие тела растения зависит от активности апикальных меристем, групп неопределенных клеток, обнаруженных на советы по выращиванию.Способность апикальных меристем побегов оставаться неопределенными позволяет им постоянно инициировать органы, ткани и вторичные меристемы, необходимые для нормального развития. Это свойство требует, чтобы меристема выделяла популяцию. клеток для обновления и восполнения клеток, потерянных каждым боковым органом или вторичной меристемой. Провал этого процесса произойти приводит к прекращению роста кончика. Некоторые меристемы, например цветочные меристемы, потребляются при производстве боковых органов и могут быть описаны как имеющие определенную судьбу.Соцветие кукурузы особенно полезно для изучение детерминированности меристемы, поскольку она претерпевает несколько четко определенных событий ветвления, чтобы произвести меристемы со все более ограниченные судьбы.

Соцветия травы организованы в группы, называемые колосками, каждый из которых состоит из пары стерильных прицветников, называемых чешуйками, покрывающими фиксированное количество цветков (Clifford 1987). Регулирование количества цветков на колоске является основным фактором, определяющим архитектуру колосков среди членов травы. семья.Колосок кукурузы является детерминантным, дает только два цветочка в определенных положениях на оси, называемой рахиллой. (Weatherwax 1923). Родственники кукурузы характеризуются колосками с неопределенным количеством цветков, например пшеница, или содержат только по одному цветочку на колоск, как у ячменя. Один из классических критериев, используемых для различения различных видов трав, заключается в том, являются ли они колоски содержат определенное или неопределенное количество цветков (Clifford and Watson 1977).Сам колоск — лишь один из компонентов сложного разветвленного соцветия кукурузы. В отличие от двудольных у таких растений, как Arabidopsis , у которых цветки образуются непосредственно апикальной и боковой меристемами (Hempel and Feldman 1994), у кукурузы есть по крайней мере две отчетливые стадии ветвления соцветий до того, как меристема колосков завершится в производстве. из двух цветочков. Эти дополнительные ступени ветвления обеспечивают большее морфологическое разнообразие трав.

У кукурузы был описан ряд мутантов, которые приводят к появлению дополнительного количества цветков в колоске (Veit et al. 1993). У разветвленных бесшелковых мутантов появляются дополнительные цветочки у мужских колосков кисточки (Kempton 1934), хотя более радикальная трансформация наблюдается в женских колосках уха, у которых цветочки превращаются в длинные индетерминантные ветви (Veit et al. 1993). Исследования мутации Tasselseed6 показали, что меристема колосков задерживается в достижении детерминированности, что позволяет ей запускать соцветия. в течение более длительного периода времени (Irish et al.1994). Анализ мутантов Tasselseed6 привел к модели (Irish 1997), в которой меристема соцветия и ее производные ветви проходят через упорядоченную, определенную серию детерминированных онтогенетических групп. состояний, заканчиваясь превращением терминальной меристемы колосков в верхний цветочек. Подобные ветвящиеся мутанты имеют также описаны для других видов трав и включают мутацию multiflorous ячменя (Bossinger et al., 1992) и доминирующий мутант Naked овса (Ougham et al.1996).

Множество генетических и молекулярных исследований выявило несколько генов, важных для развития цветков. Один такой ген, гомеотический ген APETALA2 ( AP2 ) из Arabidopsis, выполняет несколько функций в развитии цветков, семян и семяпочек (Kunst et al. 1989; Jofuku et al. 1994; Modrusan et al. 1994). Помимо своей роли в определении идентичности цветочных органов, AP2 влияет на регуляцию идентичности цветочной меристемы.Например, двойные мутанты слабого аллеля ap2-1 с мутантами идентичности цветочной меристемы, такими как листовой или apetala1 , дают больше боковых ответвлений соцветия вместо цветков (Bowman et al. 1993). Кроме того, слабые аллели ap2 в короткие дни вызывают образование третичных цветочных побегов в пазухах трансформированных чашелистиков (Schultz and Haughn 1993). Ген AP2 принадлежит к большому семейству генов, 12 из которых были идентифицированы в Arabidopsis (Okamuro et al.1997). Многочисленные гомологи были идентифицированы как у однодольных, так и у двудольных (Jofuku et al. 1994; Ohme-Takagi and Shinshi 1995; Moose and Sisco 1997). Мутации в AP2 -подобном гене, AINTEGUMENTA, нарушают развитие яйцеклетки (Elliot et al. 1996; Klucher et al. 1996). Недавно было показано, что ген glossy15 кукурузы является геном, подобным AP2 , который функционирует, подавляя признаки взрослых листьев в молодых листьях (Moose and Sisco 1997).

Здесь мы описываем новый мутант ветвления кукурузы, undeterminate spikelet1 ( ids1 ), который мы получили путем анализа фенотипа, обусловленного потерей функции гена, подобного AP2 кукурузы. ids1 Мутанты имеют неопределенный колоск, в котором образуется несколько цветков вместо двух, характерных для кукурузы дикого типа. ids1 Экспрессия наблюдалась во множестве боковых органов, а также в паре колосков и меристемах колосков. Наш анализ указывает на то, что ген ids1 является критическим для регуляции детерминированности меристемы колосков кукурузы.

Результаты

Выделение гена

ids1

Ген AP2 из Arabidopsis был использован для скрининга двух библиотек кДНК кукурузы с низкой строгостью, одна получена из незрелых початков, а другая — из вегетативных. меристемы.Один и тот же класс кДНК был выделен из каждой библиотеки. Самый длинный клон этого класса состоял из 1967 нуклеотидов и содержала ORF из 433 аминокислот (фиг.) с несколькими доменами, демонстрирующими поразительное аминокислотное сходство с геном AP2 Arabidopsis (Jofuku et al. 1994). Было обнаружено два тандемно повторяющихся мотива из 68 аминокислот, которые на 86% идентичны аминокислотам с доменом AP2 белка Arabidopsis AP2. Семейство гена AP2 можно разделить на две группы, обозначенные как EREBP-подобные или AP2-подобные, в зависимости от того, обладают ли они один или два повтора AP2 соответственно (Okamuro et al.1997). Белок IDS1 относится к последнему классу, который включает белки AP2, AINTEGUMENTA, GLOSSY15 и RAP2.7 (рис.) (Jofuku et al. 1994; Klucher et al. 1996; Moose and Sisco 1997; Okamuro et al. 1997). Белки табака ERE-BP, которые имеют только один из этих повторов, связывают ДНК (Ohme-Takagi and Shinshi 1995). Таким образом, по аналогии вполне вероятно, что IDS1 функционирует как фактор транскрипции. В подтверждение этого краткий отрезок основных аминокислоты, которые могут функционировать как домен ядерной локализации, присутствуют в белке IDS между 100 и 110 аминокислотами. (Рис.). Белок AP2 из Arabidopsis содержит богатый серином кислотный домен на аминоконце, который может функционировать как домен активации (Jofuku et al. 1994). Хотя подобный участок находится на аминоконце белка IDS1 в положениях 9–45, этот участок намного меньше и имеет меньше кислотных и сериновых остатков по сравнению с AP2. За пределами домена AP2 существует очень небольшое сходство последовательностей между AP2 и IDS1. Учитывая это открытие, удивительно, что положения шести интронов в домене AP2 сохраняются. между ids1 и AP2 (рис.). Аналогичный результат был получен для гена gl15 кукурузы (Moose and Sisco 1997).

Нуклеотидная и выведенная аминокислотная последовательность IDS1. Аминокислотные числа показаны слева от ; нуклеотидов пронумерованы справа . Подчеркнутые аминокислотные последовательности представляют два домена AP2 (Jofuku et al.1994). Серины и кислые аминокислоты на амино-конце обозначены коротким подчеркиванием. Аминокислотные последовательности выделены жирным шрифтом представляют собой основной регион с предполагаемой активностью ядерной локализации. Жирные нуклеотидные последовательности соответствуют ZAP2-1. праймер, используемый для скрининга ПЦР. (▿) шесть положений интронов между IDS, AP2, и GL15 сохраняются; (▾) другой интрон.

Сравнение между доменами AP2 AP2 -подобных генов.Выведенные аминокислотные последовательности доменов AP2 IDS1 (номер доступа в GenBank AF048900), RAP2.7 (AF003100), GL15 (U41466) и ANT (U40256) сравниваются с AP2 (ATU12546). Область между двумя повторами AP2, то есть линкерная область, начинается с аминокислоты 78 и заканчивается на 102. Для облегчения совмещения были введены зазоры, представленные точками. Аминокислоты, общие для всех пяти белки выделены жирным шрифтом и на согласованной последовательности внизу .

ids1 был картирован на длинном плече первой хромосомы в положении 192 с использованием рекомбинантных инбредных линий (Burr et al. 1988), зондированных неповторяющимся фрагментом ДНК с 3′-конца ids1. Никакие известные морфологические мутанты не были картированы в этой позиции.

Выделение рецессивных

ids1 мутаций

Чтобы выяснить функцию ids1, , мы использовали обратную генетическую стратегию для генерации аллелей с потерей функции. ПЦР использовали на большой популяции растений, несущих Mutator ( Mu ) транспозонов для поиска вставок в ids1 (Bensen et al.1995; Мили и Бриггс 1995). Праймеры, фланкирующие домен AP2 ids1 в комбинации с праймерами Mu , дали два независимых события вставки через этот скрининг. Секвенирование продуктов ПЦР позволило локализовать вставки. точнее. Как показано на рисунке, вставка Mu в ids1-mum1 была локализована в пятом консервативном интроне домена AP2, тогда как вставка ids1-mum2 была локализована в первом консервативном интроне на расстоянии 6 п.н. акцепторный сайт сплайсинга.Поскольку элементов Mu генерируют дупликацию 9 пар оснований при вставке (Bennetzen et al. 1993), акцепторный сайт сплайсинга также обнаруживается на 5′-конце Mu.

Локализация элементов Mu в ids1 – mum1 и ids1 – mum2. ids1 Последовательности интронов и экзонов показаны нормальным и жирным шрифтом соответственно.Номера интронов и экзонов показаны выше. последовательности ДНК. Подчеркнутые последовательности представляют характерную дупликацию 9 п.н., связанную со вставками Mu .

Линии, несущие ids1 – mum1 и ids1 – mum2 аллелей, демонстрировали рецессивный цветочный фенотип, который был более серьезным у ids1 – mum2 линий.Чтобы убедиться, что вставки в ids1 ответственны за цветочный фенотип, мы проанализировали ДНК из 104 растений F2, используя ген ids1 в качестве зонда на гель-блотах ДНК. Косегрегация новых RFLP с цветочным фенотипом наблюдалась для 29 хромосом. содержащий аллель ids1-mum1 и 91 хромосому, содержащую ids1-mum2 (данные не показаны). Не было обнаружено рекомбинантов между цветочным фенотипом и ids1 – mum -специфическими полиморфизмами ни для одного из аллелей.

Мы проанализировали фенотипы ids1 – mum растений после обратного скрещивания с A632 и самоопыления. Наиболее устойчивым фенотипом у мутантов ids1 – mum был дефект в колоске. Зрелые колоски кисточки дикого типа содержат два цветочка, каждый из которых состоит из трех тычинок. и две лодикулы, заключенные в прицветники палеи и леммы (рис. B). Палеа отличается от леммы в силу того, что его положение и тот факт, что он двухкилочный с двойной средней жилкой (Clifford and Watson 1977).Колоски кисточек ids1 – mum2 больше, чем у кистей дикого типа (Рис. A), из-за того, что присутствуют лишние соцветия (Рис. C). Номер Количество цветков колеблется от минимум 3 из ids1 – mum1 растений до целых 10 из ids1 – mum2 растений. Помимо этих соцветий, между ними обычно можно увидеть тонкую рахиллу, содержащую несколько более мелких соцветий. два самых верхних цветочка (рис. F). Эти более мелкие соцветия, как правило, постепенно уменьшаются, так что оставшиеся кончик рахиллы едва заметен.Более крупные дополнительные соцветия показывают нормальный образец половой дифференциации и имеют правильное количество тычинок и лодикул, окруженных палеей и леммой (рис. C).

Фенотипы у ids1 – мамы мужских и женских колосков. ( A ) Колосок с кисточкой нормальный A632 ( левый, ) и ids1 – mum2 колосок с кисточкой ( правый ).( B ) Рассеченный нормальный колоск кисточки A632, показывающий боковые органы верхних и нижних соцветий. ( C ) Расщепленный ids1 – mum2 колосок с кисточкой, показывающий четыре цветочка вместо двух. У каждого цветочка по три тычинки, окруженные палеой и леммой, как в A632. ( D ) Ушной колосок нормальный A632 ( левый ) и ids – mum1 ушной колоск ( правый ). Стрелки указывают на шелк. ( E ) Срединные продольные срезы неоплодотворенного 25-дневного ребенка ids1 – mum2 ушной колоск ( левый ) и ушной колоск A632 ( правый ).Черные стрелки указывают на цветочки. Колоски А632 имеют одиночный цветочек с увеличенным нуцеллусом; ids1 – mum2 ушные колоски имеют по крайней мере три цветочка со значительно сниженным развитием боковых органов. ( F ) ids1 – mum2 колосок с удлиненной рахиллой, содержащей два цветочка. Одиночная стрелка указывает на кончик рахиллы. (st) тычинки; (il) внутренняя лемма; (па) палеа; (ol) внешняя лемма; (ig) внутренняя чешуйка; (og) наружная чешуйка; (уф) верхний цветочек; (lf) ниже цветочек; (ra) рахилла; (фл) цветочек.

Колоски самок ids1 – mum также имеют больший размер из-за наличия лишних цветков (рис. D, E). Колоски нормальные женские содержат только один зрелый цветочек из-за аборта нижнего цветочка (Делонг и др., 1993). Развитие вторичных половых признаков у женских цветков включает в себя прерывание тычинок и развитие гинецея, на примере образования длинных шелков, состоящих из двух сросшихся плодолистиков (Randolph 1936). ids1 – mum1 колоски самок часто содержат более одного шелка, расположенного в эктопических положениях (Рис. D). Эти шелка, однако, обычно не развиваются нормально; они часто не сплавляются и не удлиняются до нужной длины. Если проявляющееся ухо вручную После вскрытия и опыления развиваются несколько зерен, что позволяет предположить, что все другие аспекты оплодотворения и развития плодов нормальный. Достигнув зрелости, эти ядра демонстрируют гомозиготных фенотипов ids1 – mum , и поэтому не представляют собой изъятия из зародыша элементов Mu .Аллель ids1 – mum2 кажется более серьезным, поскольку большинство лишних цветков не могут развить полностью сформированные боковые органы (Рис. E, слева). Приблизительно 5% из ids1 – mum2 женских колосков имеют удлиненную рахиллу, выходящую из колоска (Рис. F). В таких случаях можно заметить, что рахилла не оканчивается верхним цветком, что еще раз подтверждает ее неопределенный характер. Нет очевидного и последовательного фенотипы наблюдались в листьях и корнях ids1 мутантов, несмотря на то, что ids1 экспрессируется в этих органах.

Анализ с помощью растровой электронной микроскопии

Растровая электронная микроскопия использовалась для определения точки, в которой развитие меристемы колосков ids1 – mum отличается от развития меристемы колосков дикого типа. Меристема соцветия обычно инициирует пару колосков. меристемы акропетально, которые, в свою очередь, разветвляются, образуя две меристемы колосков (рис.А) (Ченг и др., 1983). Меристемы колосков также разветвляются, образуя нижние и верхние соцветия. Эти цветочки образуют необычный узор, то есть, чередующиеся на 180 градусов друг от друга (рис. B). Хотя нижняя цветочная меристема инициирует сначала, боковой орган В верхнем цветке развитие происходит значительно раньше, чем в нижнем (рис. C, D). Палеа — первый боковой орган чтобы дифференцироваться, и вскоре после этого развиваются три тычинки (Cheng et al.1983 г.). Половая дифференциация происходит на более поздних стадиях, когда гинецей прерывается у мужских цветков, а тычинки — у самок. цветочки (Dellaporta, Calderon-Urrea, 1993).

Сканирующая электронная микроскопия нормальных и ids1 – mum2 ушей. ( A ) A632 зачаток уха с инициирующими зачатками пары колосков и зачатками колосков.Пруток, 300 мкм. ( B ) A632 неразветвленная меристема колосков ( верхняя ) и несколько более старая ветвистая меристема колосков ( нижняя ). Более старая меристема колосков подвергается боковому ветвлению, инициируя нижний цветочек. Бар, 102 мкм. ( C ) Развитие боковых органов у ушных колосков A632. В первую очередь развиваются боковые органы верхнего цветочка. Пруток, 80 мкм. ( D ) Созревающие боковые органы верхнего цветочка ушных колосков A632 с инициирующим гинецальным гребнем.Бар, 104 мкм. ( E ) Ветвление ids1 – mum2 меристем колосков. Самая верхняя меристема колосков еще не разветвлена ​​и выглядит удлиненной. Одновременное ветвление цветков зарождение леммы происходит на противоположных сторонах средней и нижней меристем колосков. Штанга, 156 мкм. ( F ) Дальнейшее развитие ids1 – mum2 меристем колосков с удаленными чешуйками, что свидетельствует о развитии цветочных меристем в пазухах лемм. Колоск меристема сохраняется после каждого события ветвления.Пруток, 58 мкм. ( G ) Старые ids1 – mum2 меристема колосков с удаленными чешуйками. Остаточная меристема колосков удлиняется, образуя новый цветочек. Пруток, 60 мкм. ( H ) ids1 – mum2 колоск, показывающий созревающие боковые органы. Нет различия между верхним и нижним цветочками с точки зрения бокового органа. разработка. Самый молодой цветочек, отходящий от меристемы колосков, не виден леммой. Бар, 171 мкм. (spm) Колоск парная меристема; (см) колосковая меристема; (lfm) нижняя цветочная меристема; (gy) гинецей; (fm) цветочная меристема; (ле) лемма.

ids1 – mum мутанты обнаруживают нормальное развитие до стадии, на которой меристема колосков начинает ветвиться. На этом этапе меристемы колосков ids1 – mum кажутся слегка удлиненными (Рис. E, вверху). В несколько более старых меристемах колосков (рис. E, посередине) два отчетливых события ветвления можно увидеть по наличию двух лемм (стрелок).Затем в пазухах этих пазух образуются цветочные меристемы. леммы (рис. E, внизу и F). Эти события ветвления происходят на противоположных сторонах меристемы колосков в определенном порядке. Меристема колосков сохраняется после каждого события ветвления и остается между двумя последними сформированными цветочками (Рис. G, H). Этот остаточная меристема колосков продолжает дистично инициировать дополнительные леммы и соцветия (рис. F, G). Скорость бокового органа Развитие между первыми двумя ids1 – mum соцветиями аналогично (рис.H), в отличие от дикого типа, у которого первыми развиваются органы верхнего цветочка.

Мы использовали ген гомеобокса кукурузы узлов1, ( kn1 ), который экспрессируется в меристемах, а не в определенных боковых органах, чтобы проследить за событиями ветвления. в ids1 – мама колосков. kn1 экспрессируется в меристемах колосков и цветков кукурузы (рис. A, B) (Jackson et al. 1994).Гибридизация с антисмысловым зондом kn1 на меристемах колосков ids1-mum2 показала нормальную экспрессию в меристемах колосков (фиг. C). Однако, как только меристема колосков ids1-mum2 разветвляется с образованием цветков, меристема колосков становится больше, и, следовательно, домен экспрессии kn1 расширяется (Рис. D). Сильная экспрессия kn1 наблюдается внутри дополнительных цветков, начинающихся от меристемы колосков на более поздних стадиях (рис.E, стрелки) подтверждая меристематическое происхождение дополнительных цветков. Все другие аспекты экспрессии kn1 внутри цветков, включая отсутствие в боковых органах и слое L1, кажутся нормальными.

Локализация in situ kn1 в меристемах колосков A632 и ids1 – mum2 .( A ) Экспрессия kn1 в неразветвленной меристеме колосков A632. Пруток, 50 мкм. ( B ) Экспрессия kn1 внутри ветвящейся меристемы колоска A632. Выражение можно увидеть в зарождающемся нижнем цветочке. Пруток, 50 мкм. ( C ) Экспрессия kn1 в неразветвленной меристеме колосков ids1 – mum2 . Пруток, 50 мкм. ( D ) Экспрессия kn1 в пределах раннего ветвления ids1 – mum2 меристема колосков.По обе стороны от меристемы колосков видны зарождающиеся соцветия. Пруток, 60 мкм. ( E ) Экспрессия kn1 в более старом колоске ids1 – mum2 . Внутри развивающихся соцветий сохраняется сильное выражение. Пруток, 80 мкм. Стрелки указывают на зарождающиеся соцветия в B, D, и E.

Анализ выражения

ids1

Первоначальная характеристика экспрессии ids1 с использованием гель-блоттинга РНК показала, что ген экспрессируется как в вегетативных, так и в цветочных тканях.РНК-гель блоттинг с 3′-частью кДНК ids1 показывает, что транскрипт ids1 присутствует во всех протестированных тканях (рис. A). Наименьшее количество экспрессии наблюдалось в ткани эмбриона, а наибольшее — в тканях эмбриона. в ткани соцветия.

Анализ экспрессии ids1 в различных органах кукурузы B73.( A ) РНК-гель-блот, содержащий 1 мкг поли (A) ⁺ РНК, выделенной из эмбрионов через 17 дней после опыления ( E ), меристемы побегов, включая нерасширенный стебель и самые молодые зачатки листьев ( M ), колос примордии соцветий длиной до 2 см ( I ), первичные корни семян, проросших во влажном воздухе ( R ), и лопаточная часть полностью распустившихся молодых листьев ( L ) были промоканы и гибридизированы с 3 ‘частью. из кДНК ids1 , которая не включает домен AP2.( B ) Контрольная гибридизация. Блот в A зондировали кДНК убиквитина кукурузы, чтобы показать относительную нагрузку.

Для определения уровней транскрипта ids1 в мутантах ids1 – mum , поли (A) ⁺ РНК выделяли из мутантных ушей и сравнивали с РНК из ушей дикого типа. Как показано на рисунке А, транскрипт размера дикого типа отсутствует. был обнаружен в аллеле ids1 – mum .Вместо этого наблюдались слабые транскрипты с более высокой молекулярной массой, которые могут быть результатом химерного или альтернативного склеенные транскрипты. Этот результат демонстрирует, что вставки элементов Mu в ids1 не сплайсируются, и что как ids1-mum1 , так и ids1-mum2 могут представлять аллели с потерей функции.

Анализ экспрессии ids1 в ушах мутанта ids1 – mum .( A ) РНК-гель, содержащий 1 мкг поли (A) ⁺ РНК, выделенную из 2-сантиметровых ушей из A632 ( 1 ), ids1 – mum2 ( 2 ) и ids1 – mum1 ( 3 ) подвергали блоттингу и гибридизовали с 3′-частью кДНК ids1 . ( B ) Контрольная гибридизация. Блот в A зондировали кДНК убиквитина кукурузы, чтобы показать относительную нагрузку.

Для более точной локализации временного и пространственного паттерна экспрессии ids1 мы использовали гибридизацию in situ.На рисунке А показаны продольные срезы вегетативного побега дикого типа. apex зондировали меченной дигоксигенином антисмысловой РНК, полученной с 3′-конца клона ids1 . Положение листьев в побеге кукурузы было описано с помощью индекса пластохрона (Lamoreaux et al. 1978), в котором самый молодой лист обозначен как пластохрон 1 или P ₁ , а последующие листья — как P ₂ , P ₃ и т. Д. Положение зарождающегося листа в меристеме обозначается как P ₀ . ids1 Экспрессия обнаруживается на флангах меристемы в дискретной зоне (рис. A). С позиции самого молодого листа (обозначено как P ₁ ), мы предполагаем, что эта зона экспрессии меристемы находится в положении, в котором будет инициироваться следующий лист (обозначенный как P ₀ ). Выражение также наблюдается на кончиках следующих двух старых листьев, P ₁ и P ₂ .

Локализация in situ в вегетативных и цветочных верхушках B73 с использованием 3′-части кДНК ids1 .( A ) Апикальная меристема побега с молодыми зачатками листьев (P ₁ и P ₂ ) и зарождающимися зачатками листьев (P ₀ ). Пруток, 65 мкм. ( B ) Молодое колосовое соцветие. ids1 экспрессия может быть замечена в акропетально инициирующих зачатках пары колосков. Пруток, 70 мкм. ( C ) Колосковые неразветвленные меристемы. Выражение можно увидеть в меристеме колосков, но не в чешуях. Пруток, 36 мкм. ( D ) Ветвистые колосковые меристемы. Сильное выражение можно увидеть во внутренней и внешней леммах, а также в зоне между инициирующие верхние и нижние соцветия (стрелка без надписи).Эта зона экспрессии постепенно исчезает в более старом колоске. ниже. В инициирующих цветочных меристемах экспрессии не обнаружено. Пруток, 70 мкм. ( E ) Цветочек верхний с зарождающимися тычинками. Дискретные области экспрессии ids1 могут наблюдаться в инициирующих зачатках тычинок и палеа. ids1 Выражение сохраняется в расширяющихся внутренних и внешних леммах. Пруток, 70 мкм. ( F ) Более старый цветочек с лодикулами. Выражение тычинок теперь локализуется в камерах локул пыльника.Никакого выражения не может быть замечено в лодикулах (ло). Пруток, 70 мкм. ( G ) ids1 – mum2 колоск, зондированный с ids1. Мало или нет ids1 расшифровка не может быть обнаружена. Стрелки указывают на соцветия. Пруток, 130 мкм.

В продольных срезах ткани цветков экспрессия ids1 обнаруживается в нескольких различных зачатках боковых органов, а также в паре колосков и меристемах колосков.На рисунке B продольные срезы меристем ранних соцветий, исследованные с помощью ids1 , показывают полосы экспрессии в повторяющемся паттерне, который, очевидно, соответствует зачаткам пары колосков. На более позднем этапе после образования ножек и сидячих колосков экспрессия ids1 обнаруживается по всей меристеме колосков, но не в первых двух зачатках боковых органов, образованных из колоска. меристема, внешняя и внутренняя чешуйки (рис.C). Вскоре после зарождения цветковых меристем (рис. D) экспрессия ids1 присутствует в инициирующих внутренних и внешних листьях прицветника леммы, прилегающих к цветкам, но отсутствует в Сама цветочная меристема. Кроме того, видна сильная полоса экспрессии в области между верхними и нижними цветочками. (Рис. D, стрелка без надписи). У немного более старых колосков, как показано в нижней части рисунка D, эта полоса экспрессии начинается исчезнуть.Микрофотография колосков на эквивалентных стадиях, полученная с помощью сканирующего электронного микроскопа, показана на рисунке В. В более зрелой кисточке. соцветия (Рис. E), дискретные группы клеток меристемы цветков, которые образуют тычинки, а палеа экспрессирует ids1. Экспрессия сохраняется на более поздних стадиях в более древних расширенных палеа и лемма, а также в камерах локул пыльника (рис. F). В жёлтях или гинеце уха экспрессия была незначительной или отсутствовала (рис.F; данные не показаны). Как показано на рисунке G, когда зонд anti-sense ids1 используется на колосках ids1 – mum , экспрессия ids1 не обнаруживается.

Обсуждение

Регулирование количества цветков, инициированных меристемой колосков, является важным шагом в определении морфологии колосков.Мутации в гене ids1 влияют на детерминированность меристемы колосков. Вместо того, чтобы давать только верхний и нижний соцветия, меристема колосков ids1 – mum продолжает инициировать дополнительные соцветия в дистихической филлотаксии. Понимание того, как ids1 способствует определению меристемы колосков, требует изучения различных моделей инициации цветков кукурузы.

Одна модель зарождения цветков предполагает, что нижний цветочек начинается латерально, тогда как верхний цветочек — терминальный, в результате превращения меристемы колосков в верхний цветочек (рис.A) (ирландский язык, 1997 г.). У некоторых видов трав, таких как anthoxanthum, колоск заканчивается цветком, причем семяпочка является конечной структурой (Clifford 1987). Если верхний цветочек является терминальной структурой в нормальном развитии кукурузы, белок IDS1 может действовать, способствуя трансформации. меристемы колосков в верхний цветочек. IDS1 может делать это самостоятельно или посредством активации идентичности цветочной меристемы. гены, такие как ортологи LEAFY и APETELA1 , которые могут преобразовывать меристемы соцветий в цветочные меристемы (Mandel and Yanofsky 1995; Weigel and Nilsson 1995).Если бы это было так, мы бы предположили, что трансформация меристемы колосков в меристему цветков задерживается у мутантов ids1 – mum , позволяя меристеме колосков сохраняться и инициировать больше цветков. Такое толкование использовалось объяснить фенотип доминантных мутантов кукурузы Ts6 , у которых образуются лишние соцветия (Irish 1997). Мутанты Ts6 отличаются от мутантов ids1 – mum , однако, тем, что они также влияют на определение пола и вызывают отсутствие подавления карпеля внутри кисточки, но не в ухо.

Модели для инициации цветков кукурузы. ( A ) Конечная модель верхнего цветочка. Колосковая меристема разветвляется один раз латерально, образуя нижний цветочек. Остаточный колоск меристема (показанная черным) затем трансформируется в верхний цветочек (черный). ( B ) Модель с боковым разветвлением.Меристема колосков имеет боковое ветвление, образуя нижние, а затем верхние соцветия. В остаточная меристема колосков (показана черным) находится в небольшой области между цветками. Зачаток колоска меристема находится в рахилле в зрелом колоске (черный).

Альтернативная модель предполагает, что и верхние, и нижние соцветия являются латеральными продуктами меристемы колосков.Два соцветия кукурузы интерпретируются как боковые ветви рахиллы с небольшим остатком оси или без остатка оси между ними цветочки (Bonnett 1953). Если ветвление верхнего цветочка латеральное, то в рахилле может быть обнаружен сильно редуцированный зачаток меристемы колосков. после зарождения верхнего цветочка (рис. Б). Согласно этой модели IDS1 будет участвовать в подавлении неопределенного роста внутри меристемы колосков, что препятствует регенерации меристемы колосков после ветвления верхнего цветочка.У мутантов ids – mum остаточная меристема колосков пролиферирует и продолжает образовывать соцветия.

На основании паттерна экспрессии ids1 и времени появления дефектов ids1 – mum , мы отдаем предпочтение второй модели и предполагаем, что функция IDS1 подавляет неопределенный рост в колоске. меристема. Согласно первой модели, переключение судьбы меристемы колосков происходит только после инициирования нижнего цветочка.Однако дефекты в меристемах колосков ids1 – mum впервые наблюдались в меристемах колосков до зарождения нижних цветков (Рис. E). Сроки дефект указывает на то, что изменение в детерминации судьбы происходит раньше, в соответствии с экспрессией ids1 , наблюдаемой в меристеме колосков до того, как происходит ветвление цветков (Fig. C). Первая модель также предполагает, что вся меристема колосков превращается в верхний цветочек, не оставляя остаточной меристемы колосков.Тем не менее, экспрессия ids1 была обнаружена в зоне между верхними и нижними соцветиями у дикого типа (рис. D), в которой остаточный колоск ожидается, что меристема будет локализована. Дополнительное свидетельство того, что эта область представляет собой остаточную меристему колосков, появляется. из наблюдения, что он регенерирует после ветвления цветков у мутантов ids1 – mum (Рис. F, G). Более того, ожидание от первой модели состоит в том, что ids1 будет выражаться по всему будущему верхнему цветку, чтобы способствовать его преобразованию в цветочную идентичность.Вместо этого, как показано на рисунке D мы не видим экспрессии ids1 ни в верхней, ни в нижней цветочной меристеме. Наконец, если детерминированность меристемы колосков просто задержка у мутантов ids1 – mum в соответствии с первой моделью, можно было бы ожидать, что рахилла в конечном итоге оканчивается цветком. Это было не наблюдается ни у самца, ни у самки ids1 – мама колосков (рис. F; данные не показаны).

Считается, что развитие критического размера меристемы у кукурузы дает сигнал к возникновению ветвления (Sundberg and Orr 1996). Одним из механизмов, с помощью которого IDS1 может подавлять неопределенный рост, является ограничение размера остаточной меристемы колосков. так, что он больше не может начинать соцветия. У мутантов ids1 – mum размер остаточной меристемы колосков может быть нарушен и увеличиваться до большего, чем обычно.Колоск большего размера меристема потенциально может позволить большему количеству событий ветвления произвести дополнительные соцветия. В поддержку этой идеи ids1 – mum меристема колосков кажется более удлиненной, чем обычно, до образования цветков (Рис. E). Также более крупная меристема колосков диаметр наблюдается вскоре после зарождения первого цветочка у мутантов ids1 – mum (Рис. D).

Однако важно понимать, что судьба меристемы не всегда зависит от размера меристемы.Например, верхний Цветочная меристема намного больше, чем нижняя цветочная меристема во время инициации (Рис. B), и тем не менее обе они одинаково решил сделать цветочки. Таким образом, наличие более крупной меристемы колосков не обязательно наделяет ее большей неопределенностью. Не менее важным компонентом различия между определенными и неопределенными судьбами меристемы колосков является способность регенерировать после зарождения цветков.Меристемы с неопределенной судьбой могут проявлять большую способность к самовосстановлению. независимо от их первоначального размера. Измененная морфология, наблюдаемая в меристемах колосков у мутантов ids1 – mum , может быть просто отражением этой способности.

Возможно, что одним из способов, которым IDS1 функционирует для поддержания детерминированности меристемы колосков, является подавление этих необходимых факторов. для сохранения неопределенности.Гомеобокс kn1 ген экспрессируется в нескольких типах неопределенных меристематических тканей, но не в определенных органах, таких как листья. (Смит и др., 1992; Джексон и др., 1994). Мутанты с потерей функции kn1 кукурузы демонстрируют пониженное ветвление метелки и меньшее количество колосков. Постулировалось, что этот фенотип является результатом потери неопределенного клетки соцветия, которые в отсутствие kn1, приняли определенную судьбу (Kerstetter et al.1997). Если kn1 на самом деле поддерживает неопределенность меристемы, то экспрессия kn1 должна сохраняться в пределах меристемы колосков ids1 – mum и демонстрировать расширенный домен. Хотя это наблюдалось (Fig. D), важно отметить, что kn1 обычно экспрессируется как в колосковой, так и в цветочной меристеме (Fig. A, B). Таким образом, тот факт, что домен экспрессии kn1 расширен у мутантов ids1 – mum , может просто отражать дополнительные области инициации цветков.

Ген ids1 был клонирован по гомологии с геном AP2 Arabidopsis , и было показано, что он содержит два повтора высококонсервативного домена AP2. Хотя белок IDS1 показывает большее сходство с AP2 по сравнению со всеми другими AP2 -подобными генами, клонированными на данный момент, ген ids1 может не представлять фактический ортолог AP2 кукурузы.Гомология аминокислот между IDS1 и AP2 не распространяется за пределы домена AP2. Кроме того, Экспрессия ids1 не была обнаружена в плодолистых, как обнаружено для AP2 (Jofuku et al. 1994). Наконец, предварительные эксперименты показывают, что сверхэкспрессия кДНК ids1 в Arabidopsis не дополняет мутантный фенотип ap2-1 (G. Chuck unpubl.). Дополнительные члены семейства AP2 , вероятно, будут присутствовать в геноме кукурузы, поскольку гибридизация с низкой строгостью с доменом ids1 AP2 в качестве зонда на саузерн-блотах кукурузы показывает несколько полос гибридизации (данные не показаны).Кроме того, несколько выраженных Было показано, что теги последовательностей из библиотек кДНК кукурузы содержат домены AP2 (Klucher et al. 1996).

Несмотря на то, что ids1 экспрессируется в зачатках вегетативных и цветочных боковых органов, явных мутантных фенотипов в этих органах обнаружено не было. В этих органах может действовать определенный уровень генетической избыточности, который может быть обнаружен только путем анализа двойного мутанты.Например, двойные мутанты ap2 и aintegumenta демонстрируют фенотипы цветочных органов, не наблюдаемые ни у одного из одиночных мутантов Arabidopsis (Elliot et al. 1996). Учитывая большое количество AP2 -подобных генов, присутствующих в геноме Arabidopsis (Okamuro et al. 1997), неудивительно, что такая функциональная избыточность встречается у кукурузы. Недавно было высказано предположение, что два тесно связанных гена MADS-бокса, zag1, и zmm2, , играют избыточную роль в определении идентичности плодолистиков и тычинок кукурузы (Mena et al.1996).

Хотя органы цветков ids1 – мама соцветий кисточки полностью функциональны и напоминают цветки дикого типа, дефекты органов цветков наблюдались у ids1 – мама женских колосков. Возможное объяснение этого дефекта может заключаться в том, что у нормальной самки происходит выкидыш нижнего цветочка. колоски. Если различие между верхними и нижними соцветиями утрачено у мутантов ids1 – mum , то все соцветия могут получить сигнал об прерывании беременности, который обычно присутствует только в нижних цветках дикого типа.Двойной мутантный анализ с мутантом tasseled 2 , у которого не происходит выкидыша нижних цветков (DeLong et al. 1993), будет полезен для проверки этой модели.

В свете того факта, что многие представители семейства трав обладают неопределенными колосками, есть соблазн предположить, что AP2 -подобные гены играют роль в регулировании количества цветков у других трав. Колоски с множеством цветков считаются древним признак, учитывая, что производные виды почти повсеместно эволюционировали, уменьшив количество цветков (Стеббинс, 1987).Возможный механизм такого снижения может включать изменение функции или домена экспрессии гена ids1 , чтобы включить меристему колосков в дополнение к различным латеральным органам, где он обычно экспрессируется. Анализ экспрессии ids1 как в современных, так и в древних травах будет интересно проанализировать в этом отношении.

Материалы и методы

Клонирование гена

ids1

Сорок тысяч бляшек библиотеки кДНК B73, построенных из ушей соцветий размером от 1 до 3 см (Jackson et al.1994) были исследованы при пониженной строгости при 55 ° C в 50% формамиде (Schmidt et al. 1993) с полноразмерной кДНК AP2 из Arabidopsis (Jofuku et al. 1994). Было выделено примерно 75 положительных клонов. Далее был проанализирован только самый сильный гибридизирующий класс. Представитель клон из этого класса был использован для исследования библиотеки кДНК вегетативной меристемы B73 (Lambda ZapII, Stratagene), из которой полноразмерный Была выделена кДНК размером 1,9 т.п.н. КДНК была субклонирована в pSK- и обе цепи секвенировали с помощью секвенатора ABI.Анализ последовательности было сделано с использованием GCG (Wisconsin Genetics Group) и сервера E-MAIL Национального центра биотехнологии.

Гель-блоты РНК и гибридизация in situ

РНК

выделяли из зародышей, ушей, вегетативных меристем и корней, как описано ранее (Kerstetter et al. 1994). Гибридизацию in situ проводили, как описано Jackson et al.(1994) с использованием 3′-концевого зонда между нуклеотидами 1330 и 1835 вне консервативного домена AP2 . Этот же фрагмент ДНК использовали для зондирования всех гель-блотов РНК. Наблюдается единственная полоса, гибридизующаяся с этим зондом. на ДНК-гель-блотах (данные не показаны), поэтому перекрестная гибридизация с другими членами семейства AP2 маловероятна.

Выделение рецессивных аллелей

ids1 методом ПЦР

Приблизительно 42000 растений F ₁ растений от скрещиваний между запасами, содержащими активных мобильных элементов Mu , были выращены и подвергнуты скринингу с помощью ПЦР в Pioneer Hi-Bred International для вставки в ID1 (Bensen et al.1995) с праймером ZAP2-1 (5′-CCGGTGGCGCCAGCGAAGAA-3 ‘) и Mu-9242 (5′-CCCTGAGCTCTTCGTC (CT) ATAATGGCAATTATCTC-3’), вырожденный праймер, который связывается с концевым инвертированным повторением Mu. ПЦР-реакций проводили на гелях, блотировали и зондировали с помощью кДНК ids1 . Продукты ПЦР, которые гибридизуются с кДНК ids1 , идентифицировали людей, которые, вероятно, имеют вставки Mu в ген ids1 . Такой скрининг идентифицировал девять кандидатов с использованием праймера ZAP2-1.ДНК-гель-блот анализ расщепленной ДНК, полученной из самоопыляемое потомство каждого кандидата выявило полиморфизмы только для двух из девяти семейств при зондировании с помощью кДНК ids1 . Эти же два семейства были единственными, которые генерировали ids1 продуктов ПЦР с использованием праймеров ZAP2-1 и Mu 9242. Вероятно, что семь других семейств, которые не показали полиморфизмов представляют собой события соматической вставки Mu в ids1 , которые не передались в зародышевую линию.Каждый аллель ids1 – mum был получен от скрещивания активной линии Mu и инбредной линии A632. Оба аллеля были однократно скрещены с A632 и подверглись самоопылению для наблюдения фенотипов. у гомозигот. Фенотипы также наблюдались после второго обратного скрещивания с A632 и обратного скрещивания с инбредным W23.

Сканирующая электронная микроскопия

Ткань фиксировали в FAA (50% этанол, 5% уксусная кислота, 3.7% формальдегида) при 4 ° C в течение ночи и обезвоживание в этаноле серию до 100%. Затем образцы были высушены до критической точки и напылены палладием. Образцы были просмотрены на ISI 30 РЭМ при ускоряющем напряжении 10 кВ.

Благодарности

Благодарим Дж. Окамуро и Д.Джофуку (Калифорнийский университет, Санта-Крус) за дар кДНК AP2 , Р. Керстеттеру за использование его РНК-блоттинга и К. Канаде (Pioneer Hi-Bred International) за идентификацию вставок ids1 . Мы также признательны Э. Фолльбрехту, П. Макстину, Л. Рейзеру, Ф. Хемпелю и сотрудникам лаборатории Хека. за рецензирование рукописи и полезные обсуждения. G.C. был поддержан стипендией Калифорнийского университета. Работа поддержана Институтом У.S. Департамента сельского хозяйства и частично выполняются в рамках Совместных исследований и разработок. Соглашение с Pioneer Hi-Bred International, Inc.

Расходы на публикацию этой статьи были частично покрыты за счет оплаты страницы. Поэтому эта статья должна быть настоящим помечены как «реклама» в соответствии с разделом 1734 Кодекса США 18 исключительно для того, чтобы указать на этот факт.

MULTI-FLORET SPIKELET1, который кодирует белок AP2 / ERF, определяет судьбу меристемы колосков и идентичность стерильной леммы в рисе

Abstract

Колосок представляет собой уникальную структуру соцветий травы.Молекулярный механизм, контролирующий развитие колоска, остается неясным. В этом исследовании мы идентифицировали мутант колосков риса ( Oryza sativa ), multi — floret spikelet1 ( mfs1 ), который показал замедленную трансформацию меристем колосков в цветочные меристемы, что привело к появлению дополнительных шелухообразных орган и удлиненная рахилла. Кроме того, стерильная лемма гомеотически преобразовалась в рудиментарную чешуйку, а тело палеа дегенерировало в mfs1 .Эти результаты предполагают, что ген MULTI — FLORET SPIKELET1 ( MFS1 ) играет важную роль в регуляции детерминированности меристемы колосков и идентичности органов цветка. MFS1 принадлежит к кладе с неизвестной функцией в семействе APETALA2 / этилен-чувствительный фактор (AP2 / ERF). Слитый белок MFS1-зеленый флуоресцентный белок локализован в ядре. MFS1 матричная РНК экспрессируется в различных тканях, особенно в меристемах колосков и цветков.Кроме того, наши результаты показывают, что MFS1 положительно регулирует экспрессию LONG STERILE LEMMA и INDETERMINATE SPIKELET1 ( IDS1 )-подобных генов SUPERNUMERARY BRACT и OsIDS1 .

В репродуктивной фазе покрытосеменных меристема побега трансформируется в меристему соцветия, которая затем производит цветочную меристему, из которой начинают развиваться цветочные органы в соответствии с механизмом, известным как модель ABCDE (Coen and Meyerowitz, 1991; Coen и Nugent, 1994; Dreni et al., 2007; Ohmori et al., 2009). Соцветие можно классифицировать как детерминантное или неопределенное в зависимости от того, трансформирована ли его апикальная меристема в конечную цветочную меристему. В неопределенном соцветии боковая меристема постоянно дифференцируется от апикальной меристемы, которая не превращается в конечную цветочную меристему, как это происходит во время развития соцветий Arabidopsis ( Arabidopsis thaliana ) и львиного зева ( Antirrhinum majus ). .Напротив, в детерминированном соцветии апикальная меристема трансформируется в конечную цветочную меристему после образования фиксированного числа боковых меристем, как это происходит во время развития соцветий табака ( Nicotiana tabacum ) и томатов ( Solanum lycopersicum ; Bradley et al., 1997; Ratcliffe et al., 1999; Sussex and Kerk, 2001; Chuck et al., 2008).

В целом соцветия трав состоят из ветвей и колосков (Coen, Nugent, 1994; Itoh et al., 2005; Кобаяши и др., 2010). У этих организмов меристема ветвей детерминирована. Он дает несколько боковых меристем колосков, за которыми следует конечная меристема колосков. Колосок, специфическая единица соцветия травы, состоит из пары прицветников и от одного до 40 цветков; он показывает определенность или неопределенность в зависимости от вида (Clifford, 1987; Malcomber et al., 2006). У видов с детерминированным колоском, таких как рис ( Oryza sativa ), после образования фиксированных боковых цветочных меристем меристемы колосков превращаются в терминальные цветочные меристемы, что приводит к прекращению судьбы меристемы колосков.Напротив, у видов с неопределенным колоском, таких как пшеница ( Triticum aestivum ), судьба меристемы колосков сохраняется постоянно и дает различное количество боковых цветочных меристем.

Было показано, что у Arabidopsis ген TERMINAL FLOWER1 ( TFL1 ) сохраняет неопределенность в судьбе соцветия. У мутанта tfl1 меристемы соцветий были преобразованы в цветочные меристемы раньше, чем у дикого типа, но эктопическая экспрессия TFL1 привела к трансформации цветочных меристем на более поздней стадии развития во вторичные меристемы соцветий (Bradley et al. al., 1997; Рэтклифф и др., 1999; Mimida et al., 2001). У риса сверхэкспрессия любого из -подобных генов TFL1, RICE CENTRORADIALIS1 ( RCN1 ) или RCN2 задерживала переход меристем ветвей в меристемы колосков и, наконец, приводила к образованию большего количества ветвей. и колоски, чем у дикого типа (Nakagawa et al., 2002; Rao et al., 2008).

На сегодняшний день не зарегистрировано ни одного гена, который поддерживает неопределенность меристемы колосков.Однако было показано, что два класса генов участвуют в прекращении неопределенности меристем колосков. Один из них — группа генов идентичности терминальных меристем цветков. Специфическая для травы кладка LEAFY HULL STERILE1 ( LHS1 ) из подсемейства SEPALLATA ( SEP ) относится к этому классу. LHS1 -подобные гены, как было обнаружено, экспрессируются только в терминальной цветочной меристеме у видов с детерминированностью колосков, что предполагает, что они исключительно определяют продукцию терминальной цветочной меристемы, посредством которой колосковая меристема приобретает детерминированность (Cacharroón et al., 1999; Малкомбер и Келлогг, 2004 г .; Зан и др., 2005). Другой класс включает гены, подобные INDETERMINATE SPIKELET1 ( IDS1 ), которые принадлежат к семейству APETALA2 / этилен-чувствительный фактор ( AP2 / ERF ). В отличие от LHS1 -подобных генов, этот класс генов регулирует правильное время перехода меристемы колосков в меристему цветков, но не определяет идентичность терминальной меристемы цветков. У кукурузы ( Zea mays ) потеря функции IDS1 дает дополнительные соцветия (Chuck et al., 1998). Кроме того, мутация SISTER OF IDS1 ( SID1 ), паралога IDS1 кукурузы, не привела к дефектам развития колосков. Однако двойной мутант ids1 + sid1 не способен генерировать органы цветков и вместо этого развивает более прицветниковые структуры, чем обнаруживаются у растений дикого типа (Chuck et al., 2008). Геном риса содержит два IDS1 -подобных гена, SUPERNUMERARY BRACT ( SNB ) и OsIDS1 .Потеря активности SNB или OsIDS1 приводила к образованию дополнительных рудиментарных чешуек, а у двойных мутантных растений snb + osids1 развивались более рудиментарные чешуи, чем у любого из его родительских мутантов (Lee et al., 2007; Lee and An, 2012). Эти результаты показали, что мутировавшие IDS1 -подобные гены продлевали активность меристемы колосков.

У большинства представителей Oryzeae колосок отличается от колосов других злаков тем, что он состоит из пары рудиментарных чешуек, пары стерильных чешуек (пустых чешуек) и одного цветочка (Schmidt and Ambrose, 1998; Ambrose et al. al., 2000; Келлог, 2009; Hong et al., 2010). Рудиментарные чешуйки обычно считаются сильно редуцированными прицветниками, но происхождение стерильных чешуек широко обсуждается. Недавние исследования показали, что стерильные леммы являются рудиментарными леммами двух боковых цветочков. Ген LONG STERILE LEMMA ( G1 ) / ELONGATED EMPTY GLUME1 ( ELE1 ) является членом семейства генов, специфичных для растений. У мутанта g1 / ele1 было обнаружено, что стерильные леммы гомеотически трансформировались в леммы (Yoshida et al., 2009; Hong et al., 2010). Было показано, что гены OsMADS34 и EXTRA GLUME1 ( EG1 ) определяют идентичность стерильных лемм. У мутантов osmads34 и eg1 стерильные леммы были увеличены и приобрели идентичность лемм (Li et al., 2009; Gao et al., 2010; Kobayashi et al., 2010). Кроме того, SEP -подобный ген LHS1 / OsMADS1 , который определяет идентичность как леммы, так и палеи, не выражался в стерильных леммах, а эктопическая экспрессия в стерильных леммах приводила к трансформации стерильных лемм в леммы (Jeon et al., 2000; Ли и др., 2009; Танака и др., 2012). Эти результаты позволяют предположить, что лемма о стерильности может быть гомологичной лемме. Тем не менее, некоторые исследователи все еще считали, что стерильные леммы представляют собой рудиментарные прицветники, похожие на рудиментарные чешуйки (Schmidt and Ambrose, 1998; Kellogg, 2009; Hong et al., 2010).

В этом исследовании мы выделили ген риса MULTI — FLORET SPIKELET1 ( MFS1 ), который принадлежит к кладе с неизвестной функцией в семействе генов AP2 / ERF .Было показано, что мутация MFS1 задерживает трансформацию меристемы колосков в меристему цветков и приводит к дегенерации стерильной леммы и палеи. Эти результаты подтверждают, что MFS1 играет важную роль в регуляции детерминированности колосков и идентичности органов. Наши результаты также показывают, что MFS1 положительно регулирует экспрессию G1 и IDS1 -подобных генов SNB и OsIDS1 .

РЕЗУЛЬТАТЫ

Мы идентифицировали два рецессивных мутанта, связанных с развитием рисового колоска, mfs1-1 и mfs1-2 (; дополнительный рисунок S1). Тест на аллелизм показал, что два мутанта были аллельными. Учитывая, что mfs1-1 показал более серьезные дефекты, чем mfs1-2 , остальная часть этой статьи сосредоточена в первую очередь на мутанте mfs1-1 .

Фенотипы колосков у дикого типа и mfs1-1 . A и B, Колосок дикого типа.C-1, Эпидермальная поверхность палеи дикого типа. C-2, Эпидермальная поверхность леммы дикого типа. D и E, Гистологический анализ колосков дикого типа. F и G, mfs1-1 колоск с дегенерированной палеей. H, Эпидермальная поверхность дегенерированного палеа у G. I, mfs1-1 колоск с дополнительной оболочкой и нормальным палеа. J, Гистологический анализ колоска mfs1-1 с дополнительной оболочкой и нормальной палеей. K and L, mfs1-1 колоск с дополнительной оболочкой и дегенеративными бледными краями.M, Эпидермальная поверхность дегенерированной палеа в L. N и O, гистологический анализ колоса mfs1-1 с дополнительной оболочкой и дегенерированными палеэ. P, Эпидермальная поверхность стерильной леммы и рудиментарной чешуи у дикого типа. От Q до T, эпидермальная поверхность дегенерированной стерильной леммы и рудиментарной чешуи в mfs1-1 . U, относительные уровни экспрессии генов идентичности органов цветка в органах цветка дикого типа (wt) и mfs1-1 органов. dp, дегенерированная палеа; dsl, вырожденная стерильная лемма; эр, удлиненная рахилла; hl, корпус (lemma / palea) -подобный орган; ле, лемма; вот, lodicule; па, палеа; приятель, палеа-подобный орган; пи, пестик; rg, рудиментарная чешуйка; sl, стерильная лемма; ул, тычинка.Черные стрелки обозначают сосудистые пучки. Столбцы = 1000 мкм в A, B, F, G, I, K и L и 100 мкм в C – E, H, J, M и N – T. Столбцы ошибок в U указывают SD.

mfs1-1 показывает плейотропные дефекты в развитии колосков

Обычно рисовые колоски дикого типа состоят из одной пары рудиментарных чешуек, одной пары стерильных чешуек и одного конечного плодородного цветочка. Цветочек состоит из четырех оборотов цветковых органов: одной леммы и одной палеи в обороте 1, двух лодикул в обороте 2, шести тычинок в обороте 3 и одного пестика с двумя рыльцами в обороте 4 ().

Было показано, что у колосков дикого типа стерильная лемма больше, чем рудиментарная чешуйка (). Большая часть эпидермиса стерильной леммы была гладкой и состояла из регулярно расположенных плоских клеток и редких клеток с трихомами на абаксиальной стороне (). Эпидермальные клетки рудиментарных чешуек расположены нерегулярно и несут множество выступов и трихом (). Напротив, стерильная лемма была уменьшена в разной степени, даже напоминающая по размеру рудиментарную чешуйку у мутанта mfs1-1 (; дополнительный рис.S1). Обильные выпячивания и трихомы располагались на среднем и нижнем эпидермисе дегенерированных стерильных чешуек, которые были очень похожи на таковые из рудиментарной чешуи (). Между тем, регулярные и гладкие клетки, как и клетки стерильной леммы дикого типа, все еще оставались в верхней области вырожденных стерильных лемм (). Эти результаты показали, что вырожденная стерильная лемма у мутанта mfs1-1 имела идентичность как стерильных лемм, так и рудиментарных чешуек.

Было обнаружено, что 65% из колосков mfs1-1 развили дополнительный корпус (lemma / palea) -подобный орган (; дополнительный рис. S1A). Лемма дикого типа имела четыре клеточных слоя, силикатные клетки, фиброзную склеренхиму, губчатые паренхиматозные клетки и несиликатные клетки, а также развивала пять сосудистых пучков. По сравнению с леммой палеа имела три сосудистых пучка и состояла из двух частей: тела палеа (bop) и двух краевых областей палеа (mrp). Клеточная структура bop была очень похожа на структуру lemma, но mrp демонстрировала характерный гладкий эпидермис, у которого отсутствовало эпикутикулярное силикатизированное утолщение, обнаруженное в lemma и bop ().У мутанта mfs1-1 дополнительный корпусообразный орган обнаруживал сходную гистологическую структуру и имел пять сосудистых пучков, напоминающих лемму дикого типа (). Мы обнаружили уровни мРНК гена идентичности lemma DROOPING LEAF ( DL ), генов идентичности lemma и palea OsMADS1 , OsMADS14 и OsMADS15 и гена идентичности mrp OsMAD OsMAD. -1 дополнительных корпусных органов. Обнаружены избыточные уровни транскриптов OsMADS1 , OsMADS14 , OsMADS15 и DL , но не было обнаружено экспрессии OsMADS6 ().Эти результаты показали, что дополнительный корпусообразный орган имел тождество леммы.

Из mfs1-1 колосков с дополнительными леммоподобными органами 38% не имели нормальной палеа. Два палеоподобных органа наблюдались в положении, обычно занимаемом палеей (; дополнительный рис. S1A). Интересно, что каждый палеоподобный орган состоял из двух mrps и меньшего bop с двумя сосудистыми пучками (). Каждый mrp и bop имел текстуру, аналогичную палеа дикого типа (). OsMADS1 , OsMADS14 и OsMADS15 экспрессировались нормально (), тогда как DL не экспрессировалась в палеоподобных органах, как и в случае палеа дикого типа (). OsMADS6 экспрессия была более интенсивной в палеоподобных органах mfs1-1 , чем в палеоподобных органах дикого типа (). Эти находки указывают на то, что палеоподобные органы были дегенерированными бледными, и повышенная экспрессия OsMADS6 в палеоподобных органах, вероятно, была вызвана относительным обилием тканей mrp.

У 21% из колосков mfs1-1 палеа была дегенерирована в различной степени (дополнительный рис. S1A). Большая часть дегенерированных палеа содержала нормальную mrp и уменьшенную bop (дополнительный рис.S1, D и E). В нескольких случаях дегенерированная палеа сохраняла только mrp-подобные структуры, которые содержали несиликатный верхний эпидермис без трихом и выступов (). Эти результаты позволяют предположить, что разработка mfs1-1 боп серьезно пострадал.

Одновременно мы исследовали дефекты трех внутренних оборотов у мутанта mfs1-1 . У цветков (41%) с нормальными цветками идентичность и количество органов трех внутренних оборотов не изменились (дополнительная таблица S2).У цветков (59%) с дегенерированными пледами количество органов трех внутренних оборотов было различным, но они сохранили свою идентичность (дополнительная таблица S2; дополнительный рис. S1, F – I). Кроме того, 81% из колосков mfs1-1 имели удлиненные рахиллы (; дополнительный рисунок S1A).

mfs1-1 Показано аномальное раннее развитие колосков

Мы исследовали молодые колоски дикого типа и мутантов на разных стадиях развития с помощью сканирующей электронной микроскопии.На стадии 4-го колоска (Sp4) лемма и зачатки палеа у цветка дикого типа начали развиваться, а верхушка леммы была выпуклой и была крупнее палеа (). У мутанта mfs1-1 некоторые колоски развили лишние леммоподобные зачатки органов, и их палея была либо нормальной (), либо дегенерированной (). В то же время цветочная меристема была увеличена на участках колосков с дегенеративными бледными краями (). У других колосков лишнего леммоподобного органа не было, а их палеа зачатки были уменьшены в размерах ().Во время Sp5 и Sp6 цветок дикого типа образовал шесть сферических зачатков тычинок; Развитие одного зачатка тычинок на стороне леммы задерживалось, тогда как других развивалось синхронно (). Не наблюдалось значительных различий у цветков с лишним леммоподобным органом и нормальной палеа (). Однако у некоторых цветков с дополнительными леммоподобными органами и аномальными бледными краями развитие тычинок не было синхронным, и количество тычинок варьировалось (; дополнительный рис. S1, F и G; дополнительная таблица S2).У цветков с дегенерированными бледными пятнами мы не обнаружили явных дефектов, за исключением количества тычинок (; Дополнительная таблица S2). На стадиях Sp7 и Sp8 (формирование зачатков пестика) лемма и палеа перешли в дальнейшую стадию развития. У мутанта mfs1-1 наблюдались очевидные лишние леммоподобные органы и дегенерированные палеэ ().

Колоски на ранних стадиях развития у дикого типа и mfs1-1 . От A до D, колоски дикого типа на стадиях Sp4 (A), Sp5 до Sp6 (B), Sp7 (C) и Sp8 (D).От E до P, mfs1-1 колоск на стадиях Sp4 (E, I и M), от Sp5 до Sp6 (F, J и N), Sp7 (G, K и O) и Sp8 (H, L , и P). dsl, Вырожденная стерильная лемма; эл — дополнительный орган, похожий на лемму; fm — цветочная меристема; ле, лемма; вот, lodicule; па, палеа; приятель, палеа-подобный орган; пи, пестик; sl, стерильная лемма. Звездочками обозначены тычинки. Штанги = 100 мкм.

Мы также исследовали стерильную лемму на разных стадиях развития. На стадиях от Sp4 до Sp6 стерильная лемма была больше, чем рудиментарная чешуйка у дикого типа ().У мутанта mfs1-1 размер стерильной леммы был подобен размеру рудиментарной чешуи (). На стадиях Sp7 и Sp8 стерильная лемма резко дифференцировалась и была намного крупнее рудиментарной чешуи у дикого типа (). Однако стерильная лемма mfs1-1 была меньше, чем у дикого типа, напоминая рудиментарную чешуйку на этих стадиях (Sp7 и Sp8;). Между тем, эпидермальные клетки начали удлиняться в стерильных чешуях и все еще сохраняли свой размер в рудиментарной чешуе у дикого типа (), тогда как их размеры сохранялись как в рудиментарной чешуе, так и в стерильной чешуе мутанта mfs1-1 ( ).Эти результаты предполагают, что идентичность стерильной леммы mfs1-1 была затронута, а стерильная лемма у мутанта mfs1-1 обнаружила паттерн развития, подобный таковому у рудиментарной чешуи.

Развитие стерильной леммы у дикого типа и mfs1-1 колосков на ранних стадиях. От A до D, развитие леммы о стерильности у дикого типа на стадиях Sp4 (A), Sp5 — Sp6 (B), Sp7 (C) и Sp8 (D). От E до H, развитие стерильной леммы в mfs1-1 на стадиях Sp4 (E), от Sp5 до Sp6 (F), Sp7 (G) и Sp8 (H).dsl, Вырожденная стерильная лемма; hl, корпусный орган; ле, лемма; па, палеа; приятель, палеа-подобный орган; rg, рудиментарная чешуйка; sl, стерильная лемма. Штанги = 100 мкм.

Паттерны экспрессии генов идентичности цветочных органов на ранних стадиях развития цветка

Паттерны экспрессии DL , OsMADS1 и OsMADS6 , которые, как известно, участвуют в регуляции идентичности lemma и palea, были исследованы на ранних стадиях развития цветка.

В цветках дикого типа DL сначала экспрессировался в зачатках леммы на стадиях от Sp4 до Sp6 (), а затем также в зачатках пестика после SP7 (), тогда как транскрипты DL все еще сохранялись в лемме на Sp8 ( ). В цветках mfs1-1 сигналы DL были выражены в дополнительном леммоподобном органе в дополнение к лемме и пестику (). Эти данные доказали, что у колосков действительно развивались дополнительные листочки на ранней стадии развития цветка.

Экспрессия гена DL в цветках дикого типа и mfs1-1 . От А до D, цветы дикого типа. От E до H, mfs1-1 цветов. В столбцах 1–3 показаны продольные сечения цветков на стадиях от Sp4 до Sp7, а в столбце 4 показаны поперечные срезы цветков на стадии Sp8. el, лишний леммоподобный орган; ле, лемма; па, палеа; приятель, палеа-подобный орган; пи, пестик; vb, сосудистый пучок. Штанги = 50 мкм.

На стадиях от Sp4 до Sp8 OsMADS1 экспрессировался в нижних конечностях и палеоцветах дикого типа ().У мутанта mfs1-1 сигналов OsMADS1 наблюдались в дополнительном lemma-подобном органе, lemma и palea (). На стадиях от Sp4 до Sp7 экспрессия OsMADS6 не показала значительных различий между mfs1-1 и цветками дикого типа и была обнаружена в меристеме цветков и зачатках mrp, lodicule и пестика (). В Sp8, в поперечном срезе цветков дикого типа, транскриптов OsMADS6 были обнаружены в mrp, lodicule и пестике ().У мутанта mfs1-1 сигналов OsMADS6 были обнаружены в двух mrps каждого палеоподобного органа, lodicule и pistil (). Эти результаты также свидетельствуют о том, что палеоподобные органы произошли от paleae у мутанта mfs1-1 .

Экспрессия OsMADS1 и OsMADS6 в цветках дикого типа и mfs1-1 цветков. A – D: экспрессия OsMADS1 в цветках дикого типа. E-H, экспрессия OsMADS1 в цветках mfs1-1 .Экспрессия OsMADS6 от I до L в цветках дикого типа. M к P, экспрессия OsMADS6 в цветках mfs1-1 . В столбцах 1–3 показаны продольные сечения цветков на стадиях от Sp4 до Sp7, а в столбце 4 показаны поперечные срезы цветков на стадии Sp8. el, лишний леммоподобный орган; fm — цветочная меристема; ле, лемма; вот, lodicule; па, палеа; приятель, палеа-подобный орган; пи, пестик. Штанги = 50 мкм.

Молекулярное клонирование и идентификация

MFS1

Ген MFS1 ранее был картирован в области около 350 т.п.н. на хромосоме 5 (Ren et al., 2012). Здесь расположение MFS1 было сужено до физического расстояния 67 т.п.н. между маркерами вставки / удаления IND17 и IND24 (), в которых есть 16 аннотированных генов (http://www.gramene.org/). Анализ секвенирования выявил однонуклеотидную замену от C на T в пределах предсказанного транскрипционного фактора AP2 / ERF ( LOC_Os05g041760 ) в разных положениях двух аллелей mfs1 , вызывая аминокислотные мутации Ala-66 в Val-66. в мутанте mfs1-1 и от Thr-51 до Ile-51 в мутанте mfs1-2 ().Чтобы проверить, были ли эти мутации причинно связаны с мутантным фенотипом, был трансформирован геномный фрагмент Os05g041760 дикого типа, который содержал кодирующую последовательность, 2925 п.н. последовательности перед стартовым кодоном и 938 п.н. последовательности ниже стоп-кодона. в мфс1-1 . В результате этого мутантные фенотипы были полностью спасены в трансгенных растениях (дополнительный рис. S2, A – C). Далее мы выполнили РНК-интерференцию (РНКи), чтобы заглушить MFS1 в сорте japonica Zh21.В трансгенных растениях уровень транскрипта MFS1 был значительно снижен () и наблюдались плейотропные дефекты колосков, аналогичные дефектам mfs1-1 (). Взятые вместе, эти результаты подтвердили, что Os05g041760 является геном MFS1 .

Выделение гена MFS1 и субклеточная локализация белка MFS1. A. Отобразите положение локуса MFS1 . Показаны относительные положения клонов бактериальных искусственных хромосом (ВАС).Ниже представлена ​​геномная структура MFS1 . Показаны сайты мутации в mfs1 . Стрелки указывают сайты предсказанных генов в интервале от IND17 до IND24. Б — Фенотип растений Ж21. C к F, анализ РНКи MFS1 и фенотипов трансгенных растений. С до Е, Фенотипы растений, трансгенных с РНКи. Зеленые стрелки указывают на вырожденную стерильную лемму. dp, дегенерированная палеа; эр, удлиненная рахилла; hl, корпус (lemma / palea) -подобный орган; ле, лемма; па, палеа; sl, стерильная лемма.F, Экспрессия MFS1 в трансгенных растениях с РНКи. WT, Дикий тип. G к L, анализ субклеточной локализации белка MFS1 с использованием протопластов риса. G к I, слитый белок GFP. G, изображение управления цифровым изображением. H, изображение в светлом поле. I. Объединенное изображение слитого белка GFP. J к L, MFS1-GFP. J, изображение управления цифровым изображением. K, изображение в светлом поле. L, объединенное изображение слитого белка MFS1-GFP. Полосы = 1000 мкм от B до E и 50 мкм от G до L.

MFS1 Кодирует белок домена ERF

Генное семейство AP2 / ERF специфично для растений и включает четыре подсемейства: AP2, RAV, DREB, и ERF (Sharoni et al., 2011). Филогенетический анализ показал, что MFS1 и его ортологи из мха, голосеменных, двудольных и злаковых составляют MFS1-подобную кладу, тогда как хорошо известные белки домена ERF FZP и BD1 и их ортологи составляют другую кладу в подсемействе ERF (). Эти результаты свидетельствуют о том, что гены MFS1 и FZP / BD1 разошлись до появления голосеменных и что гены MFS1 отличаются от хорошо известных генов AP2 / ERF .Кроме того, филогенетический анализ также показал, что другие известные гены домена AP2 ( SNB , OsIDS1 и SHAT1 ) имеют отдаленную эволюционную связь с MFS1 -подобным и FZP / BD1 -подобные гены.

Филогенетическое дерево белков MFS1. Филогенетическое дерево было построено с использованием метода максимального правдоподобия, основанного на матричной модели Джонса-Тейлора-Торнтона. Gy / Mo, голосеменные растения и мхи.[См. Онлайн-статью для цветной версии этого рисунка.]

Анализ последовательности показал, что все MFS1-подобные белки содержат высококонсервативный домен ERF, расположенный близко к их N-концу. Между тем, консервативный С-концевой домен был идентифицирован в MFS1-подобных белках трав и двудольных растений, которые имеют общий мотив DLNEPP ^185-190 . Уникальный сайт (V ³⁷ ) и мотив (SPWH ^132-135 ) также были идентифицированы в MFS1-подобных белках трав (дополнительный рисунок S3).Кроме того, ген MFS1 имеет низкое сходство последовательности с известными генами AP2 / ERF вне домена AP2 / ERF (дополнительный рисунок S3).

Векторы, содержащие слитый белок MFS1ORF-GFP, слитый белок SL1ORF-GFP и единственный белок GFP, временно экспрессировались в протопластах риса. Белок SL1ORF-GFP действовал как положительный ядерный генный контроль (Xiao et al., 2009). Зеленая флуоресценция была обнаружена в ядрах протопластов риса для слитых белков MFS1ORF-GFP и SL1ORF-GFP (; дополнительный рис.S2, D – F). В клетках, которые экспрессировали только GFP, зеленое цветение наблюдалось равномерно по всей клетке, за исключением вакуоли (). Эти результаты предполагают, что MFS1 кодирует ядерный белок, который может действовать как фактор транскрипции.

Паттерны экспрессии

MFS1

Количественный анализ обратной транскрипции-ПЦР (qPCR) показал, что MFS1 универсально экспрессируется в различных тканях, включая корни, стебли, листья и метелки, с более высокими уровнями в молодых метелках (2 см или меньше), чем в других исследованных тканях ().Кроме того, образец экспрессии MFS1 исследовали гибридизацией in situ. Во-первых, MFS1 был высоко экспрессирован в меристемах ветвей и колосков (). Далее сильные сигналы наблюдались в местах зарождения бесплодия lemma primordium (). Когда сформировались зачатки леммы и палеа, обильные транскриптов MFS1 были обнаружены в лемме, палеа и цветочной меристеме (). Впоследствии выражение MFS1 было в основном ограничено леммой, палеей, лодикулой и тычинкой ().После образования пестика сигналы MFS1 исчезли с леммы и пестика, но остались в лодикуле, тычинке и пестике ().

Шаблон выражения MFS1 . A, Экспрессия MFS1 в различных тканях, обнаруженная с помощью кПЦР. R, корень; S, стержень; L, лист. B к J, гибридизация in situ в метелках и цветках дикого типа с использованием антисмыслового зонда MFS1 . bm — меристема ветвей; fm — цветочная меристема; ле, лемма; вот, lodicule; па, палеа; пи, пестик; rg, рудиментарная чешуйка; sl, стерильная лемма; см, колосковая меристема.Звездочками обозначены тычинки. Штанги = 50 мкм.

MFS1 влияет на экспрессию генов, связанных с развитием колосков

Учитывая, что у мутанта mfs1-1 обнаружены дефекты колосков, мы исследовали уровни экспрессии IDS1 -подобных генов SNB и OsIDS1 которые тесно связаны с переходом и детерминацией меристемы колосков у риса (Lee et al., 2007; Lee and An, 2012). Транскрипты SNB накапливались в основном в молодых метелках длиной менее 2 см, и их уровни были ниже у мутанта mfs1-1 , чем у дикого типа ().Затем уровни транскриптов SNB резко снизились в метелках длиной более 2 см, и не было обнаружено различий в уровнях экспрессии SNB между метелками дикого типа и mfs1-1 с длиной от 2 до 5 см ( ). OsIDS1 транскриптов были впервые обнаружены в молодых метелках менее 0,5 см, и их больше было в метелках дикого типа длиной от 0,5 до 5 см (). По сравнению с таковой у дикого типа, экспрессия OsIDS1 не показывала очевидных изменений в метелках с длиной менее 0.5 см, тогда как у mfs1-1 метелок длиной от 0,5 до 5 см она резко уменьшилась (). Эти результаты означают, что MFS1 положительно регулирует экспрессию IDS1 -подобных генов SNB и OsIDS1 .

Экспрессия SNB , OsIDS1 и G1 в цветках дикого типа и mfs1-1 . A, анализ qPCR SNB , OsIDS1 и G1 в развивающихся метелках дикого типа (wt) и mfs1-1 метелок на разных стадиях.B до F, экспрессия G1 в цветках дикого типа. G к K, экспрессия G1 в цветках mfs1-1 . le, лемма; вот, lodicule; па, палеа; sl, стерильная лемма; см, колосковая меристема. Штанги = 50 мкм.

Мы использовали кПЦР для изучения экспрессии гена G1 , который, как было показано, участвует в спецификации идентичности стерильной леммы (Yoshida et al., 2009; Hong et al., 2010). У дикого типа высокий уровень экспрессии G1 был обнаружен в метелках короче 2 см, но уровни мРНК были значительно снижены в метелках размером от 2 до 5 см ().В мутанте mfs1-1 , G1 показал более низкие уровни экспрессии в молодых метелках короче 5 см (). Гибридизация in situ показала, что у дикого типа сигналы G1 сильно детектировались в стерильных леммах на стадии дифференцировки и формирования стерильных зачатков лемм, а впоследствии они заметно уменьшались, когда стерильные леммы начинали удлиняться (). Экспрессия G1 была слабой в стерильных зачатках леммы колоска mfs1-1 во время анализируемых стадий (), что согласуется с результатами анализа qPCR.Эти данные предполагают, что MFS1 положительно регулирует экспрессию G1 .

ОБСУЖДЕНИЕ

В этом исследовании мы охарактеризовали новый ген домена AP2 / ERF , MFS1 , который участвует в регуляции детерминации меристемы колосков и идентичности цветковых органов у риса. MFS1 способствует экспрессии генов SNB , OsIDS1 и G1 , участвующих в развитии колосков.

MFS1 влияет на детерминацию меристемы колосков

У большинства колосков у мутантных растений mfs1-1 развивается дополнительная лемма.Около 27% этих колосков давали нормальные соцветия после появления дополнительных лемм, что свидетельствует о том, что эти колоски состояли из конечного цветочка и дегенерированного бокового цветочка, который содержал только лемму. У других колосков с аномальными цветками наблюдались два палеоподобных органа, что соответствовало дополнительной лемме и исходной лемме. Вместе с развитием цветочной меристемы, которая достигла большего, чем обычно, размера на более ранней стадии (), эти результаты означают, что эти колоски имели тенденцию давать два цветочка, и детерминированность меристемы колосков была нарушена у мутанта mfs1-1 .Сходным образом у мутанта tangari-boushi1 ( tob1 ) у некоторых колосков был дополнительный лемма / палеа-подобный орган между стерильной леммой и исходной леммой (Tanaka et al., 2012). У мутанта snb у некоторых колосков развились избыточные рудиментарные чешуйки, дополнительные лемматические или палеоподобные структуры или боковые соцветия до того, как появился последний цветочек (Lee et al., 2007). Двойной мутант snb + osids1 даже продуцировал больше прицветников-подобных органов, включая рудиментарные чешуйки, чешуйки или палеевидные чешуи, чем одиночные мутанты (Lee and An, 2012).Эти результаты предполагают, что SNB , OsIDS1 , TOB1 и MFS1 регулируют судьбу меристемы колосков, обеспечивая правильное время перехода меристемы колосков в конечную меристему цветков. Напротив, потеря детерминированности меристемы колосков произошла до образования рудиментарной чешуи у мутантов snb и osids1 , но после появления стерильных чешуек у мутантов tob1 и mfs1-1 .Это предполагает, что MFS1 и TOB1 функционируют позже, чем SNB и OsIDS1 . Кроме того, снижение экспрессии SNB и OsIDS1 было обнаружено в мутантных молодых метелках mfs1-1 , что свидетельствует о том, что MFS1 положительно регулирует экспрессию SNB и OsIDS1 .

MFS1 определяет идентичность стерильной леммы

В мутанте mfs1-1 выродившаяся стерильная лемма продемонстрировала идентичность как стерильной леммы, так и рудиментарной чешуи.У мутанта snb не было обнаружено стерильных лемм на участках, где присутствовали дополнительные рудиментарные чешуйки (Lee et al., 2007), что указывает на гомеотическую трансформацию стерильной чешуи в рудиментарную чешуйку. У мутанта osids1 одна из стерильных лемм иногда заменяется рудиментарной чешуей (Lee and An, 2012). SNB и OsIDS1 , как было ранее показано, кодируют белок домена AP2 / ERF (Lee et al., 2007; Lee and An, 2012).Эти результаты предполагают, что MFS1 , SNB и OsIDS1 наделяют важные функции в развитии стерильной леммы. Сообщалось, что G1 / ELE , OsMADS34 и EG1 определили идентичность стерильной леммы. У этих мутантов стерильная лемма гомеотически трансформировалась в лемму (Li et al., 2009; Yoshida et al., 2009; Gao et al., 2010; Hong et al., 2010; Kobayashi et al., 2010). Эти результаты предполагают, что G1 / ELE , OsMADS34 и EG1 предотвращают преобразование стерильной леммы в лемму, тогда как MFS1 , SNB и OsIDS1 предотвращают стерильное вырождение лемма о рудиментарной чешуе.

Существовали две преобладающие гипотезы о происхождении и эволюции бесплодной леммы (Takeoka et al., 1993). Один из них утверждает, что предполагаемый предок рода Oryza имел колоск, который содержал конечный цветочек и два боковых цветочка, которые впоследствии дегенерировали в ходе эволюции, оставив только лемму (Arber, 1934; Kellogg, 2009). по-видимому, произошли от морфологической модификации остатков этой леммы (Yoshida et al., 2009; Kobayashi et al., 2010). Другая гипотеза предполагает, что колосок Oryza spp. имеет только один цветочек, а стерильная лемма и рудиментарная чешуйка повсеместно считаются сильно редуцированными прицветниками (Schmidt and Ambrose, 1998; Terrell et al., 2001; Hong et al., 2010). В мутантах g1 / ele1 , osmads34 и eg1 стерильные леммы были расширены и преобразованы в леммы, что подтверждает первую гипотезу. У мутанта mfs1-1 стерильная лемма выродилась и приобрела идентичность рудиментарной чешуйки, что подтверждает вторую гипотезу.Фактически, у большинства видов трав в колоске отсутствуют стерильные органы, похожие на чешуйки, и есть только один или несколько соцветий и прицветниковых чешуек, которые считаются эквивалентами рудиментарных чешуек Oryza spp. (Takeoka et al., 1993; Yoshida et al., 2009; Hong et al., 2010). Прицветник-подобный орган чешуек напоминает лемму по размеру и структуре у некоторых видов трав, таких как кукуруза и пшеница (Kellogg, 2001; Yoshida et al., 2009), тогда как у Oryza spp.(Bommert et al., 2005; Li et al., 2009). Следовательно, лемма, стерильная лемма и рудиментарная чешуйка могут быть гомологичными структурами.

MFS1 Регулирует развитие палеи

Считалось, что у травяных цветов палеа имеет иную идентичность и происхождение от леммы. В целом, палеа считается гомологичной профиллу (первый лист, образованный пазушной меристемой), который формируется на оси цветочка, тогда как лемма соответствует прицветнику (лист, прилегающий к пазушной меристеме), который формируется на колоске. ось (Kellogg, 2001; Ohmori et al., 2009). Недавно появились некоторые свидетельства того, что рисовая палеа — это орган, образованный в результате врожденного слияния боп и мрп, которые потенциально имеют различное происхождение (Francis, 1920; Cusick, 1966; Verbeke, 1992, Zanis, 2007). В частности, во-первых, было показано, что клеточная структура bop очень похожа на структуру леммы, но отличается от структуры mrp (Prasad et al .., 2005; Sang et al .., 2012). Во-вторых, у растений с двойной РНКи superwoman1 ( spw1 / osmads16 ) и MADS2 + MADS4 мутантных растений класса B риса обнаружена трансформация лодикул в органы, похожие на mrp, но не на bop.Более того, мутанты генов арабидопсиса B-класса претерпевают гомеотическую трансформацию лепестков (эквивалентных lodicules) в чашелистики (Nagasawa et al., 2003; Yadav et al., 2007; Yao et al., 2008). Эти находки указывают на то, что mrp, но не bop, гомологичен чашелистнику. У депрессивного мутанта palea1 ( dp1 ), palea, как было показано, замещалось двумя mrp-подобными структурами, и боп был потерян (Luo et al., 2005; Jin et al., 2011). В мутанте с задержкой палеа1 ( rep1 ) развитие bop было задержано, тогда как сверхэкспрессия REP1 вызывала гипердифференцировку клеток mrp (Yuan et al., 2009). У мутанта mfs1-1 боп дегенерировал у большинства цветков и даже отсутствовал в некоторых случаях. Кроме того, недавние исследования показали, что ХИМЕРНЫХ ЦВЕТОЧНЫХ ОРГАНОВ1 ( CFO1 / OsMADS32 ) и МОЗАИЧНЫХ ЦВЕТОЧНЫХ ОРГАНОВ1 ( MFO1 / OsMADS6 ) были экспрессированы в мутации mrp, что привело к мутации mrp. mrp в леммоподобные или bop-структуры (Ohmori et al., 2009; Li et al., 2010; Sang et al., 2012). Эти результаты показали, что две части палеи контролируются разными регуляторными путями. В то время как MFS1 , DP1 и REP1 определяют идентичность боп, MFO1 и CFO1 участвуют в регуляции идентичности mrp. В соответствии с этими гипотезами фенотипы палеа mfs1 предполагают, что палеа риса является органом, продуцируемым слиянием mrp и bop, которые имеют разное происхождение.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Растительные материалы

Два мутанта риса ( Oryza sativa ), mfs1-1 и mfs1-2 , были идентифицированы из обработанного этилметансульфонатом сорта Jinhui 10.cv Jinhui 10 использовали в качестве штамма дикого типа для фенотипического наблюдения. Все растения выращивали на рисовых полях в Чунцине и Хайнане, Китай.

Клонирование на основе карты

MFS1

Мутант mfs1-1 был скрещен с cv Xinong1A, и 1418 растений F2 с мутационным фенотипом были отобраны и использованы в качестве популяции для картирования. Первоначальное картирование генов проводилось с использованием простых маркеров повторов последовательности из общедоступных баз данных по рису, включая Gramene (http: // www.gramene.org) и Программу геномных исследований риса (http://rgp.dna.affrc.go.jp/publicdata/caps/index.html). Затем было выполнено точное картирование с использованием маркеров вставки / делеции, разработанных на основе сравнений геномных последовательностей из сортов Xinong1A и Jinhui 10 в нашей лаборатории. Последовательности праймеров, используемых при картировании и анализе генов-кандидатов, перечислены в дополнительной таблице S1.

Микроскопический анализ

Метелки собирали на разных стадиях развития и фиксировали в 50% этаноле, 0.9 м ледяной уксусной кислоты и 3,7% формальдегида в течение ночи при 4 ° C, дегидратировали серией градуированных этанолов, пропитывали ксилолом и заливали парафином (Sigma). Срезы толщиной 8 мкм переносили на предметные стекла, покрытые поли-L-Lys, депарафинизировали в ксилоле и дегидратировали через серию этанола. Срезы последовательно окрашивали 1% сафранином (Amresco) и 1% Fast Green (Amresco), затем дегидратировали серией этанола, пропитывали ксилолом и, наконец, помещали под покровное стекло.Световая микроскопия выполнялась на микроскопе Nikon E600. Для сканирующей электронной микроскопии свежие образцы исследовали с помощью растрового электронного микроскопа Hitachi S-3400 с охлаждающим столиком –20 ° C. Стадии раннего развития колосков были такими же, как и определенные ранее (Ikeda et al., 2004).

Выделение РНК

и анализ кПЦР

РНК из корня, стебля, листа, соцветия и молодого цветка выделяли с использованием набора RNeasy Plant Mini Kit от Watson. Первую цепь комплементарной ДНК синтезировали из 2 мкг общей РНК с использованием праймеров oligo (dT) ₁₈ в реакционном объеме 25 мкл с использованием набора для обратной транскриптазы SuperScript III (Invitrogen).РНК с обратной транскрипцией (0,5 мкл) использовали в качестве матрицы ПЦР с ген-специфичными праймерами (дополнительная таблица S3). Анализ qPCR выполняли с помощью системы обнаружения последовательностей ABI Prism 7000 и набора SYBR Supermix Kit (Bio-Rad). Было выполнено не менее трех повторов, и были использованы средние значения экспрессии каждого гена.

Гибридизация in situ

Ген-специфический зонд MFS1 длиной 482 п.н. амплифицировали с праймерами MFS1 -F и MFS1 -R и метили с помощью набора для маркировки DIG RNA Labeling Kit (SP6 / T7) от Roche.Зонды для известных генов цветочных органов были приготовлены с использованием того же метода. Предварительную обработку срезов, гибридизацию и иммунологическое обнаружение проводили, как описано ранее (Sang et al., 2012). Последовательности праймеров перечислены в дополнительной таблице S1.

Конструкция вектора

Для теста комплементации с использованием праймеров MFS1 com- F и MFS1 com-R.Полученные продукты ПЦР расщепляли с использованием Xba I и Eco RI, а затем вставляли в бинарный вектор pCAMBIA1301. Рекомбинантные плазмиды вводили в mfs1-1 с помощью метода трансформации, опосредованной Agrobacterium tumefaciens-, как описано ранее (Sang et al., 2012). Чтобы создать конструкцию для РНКи, мы амплифицировали фрагмент длиной 267 пар оснований комплементарной ДНК MFS1 с праймерами MFS1 Ri-F ( Spe I, Kpn I) и MFS1 Ri-R ( Sac I, Bam HI), как показано в дополнительной таблице S1.Полученные продукты ПЦР сначала расщепляли с использованием Spe I и Sac I, а затем лигировали в вектор pTCK303 (Wang et al., 2004) для получения промежуточного вектора. Затем продукты ПЦР расщепляли с использованием Kpn I и Bam HI и лигировали в промежуточный вектор. Рекомбинантные плазмиды трансформировали в растения Zh21 с помощью метода трансформации, опосредованной A. tumefaciens-. Последовательности праймеров перечислены в дополнительной таблице S1.

Субклеточная локализация

Кодирующая область MFS1 без стоп-кодона была амплифицирована с использованием пары праймеров MFS1 OE-F и MFS1 OE-R, которые содержат сайтов Xba, I и Bam HI, соответственно. (Дополнительная таблица S1).Фрагмент был клонирован в кассету экспрессии 35S-GFP (S65T) -NOS (pCAMBIA1301) с соответствующими модификациями, в результате чего был получен вектор слияния MFS1 -GFP. Плазмиды GFP и MFS1 -GFP трансформировали в протопласты риса, как описано ранее (Li et al., 2009). Через 8–16 ч инкубации при 28 ° C флуоресценцию GFP наблюдали с помощью микроскопа Nikon E600.

Последовательности белков и филогенетический анализ

Последовательности белков были получены путем поиска в GenBank (http: // www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/), используя последовательность MFS1 в качестве запроса. Филогенетическое дерево было построено с использованием MEGA 5.0 (Tamura et al., 2011). Дерево было построено с использованием метода максимального правдоподобия на основе модели на основе матрицы JTT с самыми низкими оценками байесовского информационного критерия (Jones et al., 1992; Tamura et al., 2011). Значения поддержки начальной загрузки для каждого узла из 500 реплик показаны рядом с ветвями (Felsenstein, 1985). Исходное дерево для эвристического поиска было получено автоматически следующим образом.Когда количество общих сайтов было меньше 100 или меньше четверти от общего количества сайтов, использовался метод максимальной экономии; в противном случае использовался метод соединения биососедов с матрицей кластерных расстояний Маркова. Дискретное γ-распределение использовалось для моделирования различий в скорости эволюции между участками (пять категорий [+ G ], параметр = 0,6362). Дерево было нарисовано в масштабе, с длиной ветвей, измеренной количеством замен на сайт.

Данные о последовательностях из этой статьи можно найти в библиотеках данных GenBank / EMBL под номерами доступа: SNB ({«type»: «entrez-protein», «attrs»: {«text»: «ABD24033″, » term_id «:» 87130803 «,» term_text «:» ABD24033 «}} ABD24033), OsIDS1 ({» type «:» entrez-нуклеотид «,» attrs «: {» text «:» NM_001058244 «,» term_id » : «297601901», «term_text»: «NM_001058244»}} NM_001058244), G1 / ELE ({«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «AB512480», «term_id» : «270309057», «term_text»: «AB512480»}} AB512480), DL ({«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «AB106553», «term_id»: » 40645410 «,» term_text «:» AB106553 «}} AB106553), OsMADS1 ({» type «:» entrez-нуклеотид «,» attrs «: {» text «:» NM_001055911 «,» term_id «:» 115451550 » , «term_text»: «NM_001055911»}} NM_001055911), OsMADS6 ({«type»: «entrez-нуклеотид», «attrs»: {«text»: «FJ666318», «term_id»: «25

78″, » term_text «:» FJ666318 «}} FJ666318), OsMADS14 ({» type «:» entrez-нуклеотид «,» attrs «: {» te xt «:» NM_001057835 «,» term_id «:» 115455398 «,» term_text «:» NM_001057835 «}} NM_001057835) и OsMADS15 ({» type «:» entrez-nucleotide «,» attrs «: {» text «:» NM_001065255 «,» term_id «:» 115470242 «,» term_text «:» NM_001065255 «}} NM_001065255).