Праймером Ultrabond iNails я осталась довольна, свою функцию выполняет в полном объёме. К покупке рекомендую как профессионалам, так и начинающим любителям маникюра.

Прямая ссылка на праймер

Кисотный и бескислотный праймер: отличия, применение, нюансы в работе обзор мастеров Cosmake.by

В работе мастера маникюра нет мелочей: для результата важен каждый этап. Праймер – материал, предназначенный для подготовки ногтевой пластины к наращиванию или нанесению покрытия. Он применяется сразу поле механической обработки и обеспечивает лучшую сцепку слоев. Существует две группы праймеров, отличающихся друг от друга составом.

Как работает праймер

Благодаря компонентам в составе средство вступает во взаимодействие с кератиновыми чешуйками: поднимает их, делает поверхность рыхлой, повышает адгезивные свойства. За счет этого обеспечивается стойкость покрытия. Некоторые праймеры придают дополнительную липкость и действуют как двусторонний скотч.

Преимущества

Использование праймера обусловлено следующими факторами:

·         деликатно подготавливает пластину к нанесению базы или материалов для моделирования;

·         снижает риск развития грибка и воспалительных процессов благодаря бактерицидным свойствам;

·         продлевает срок носки покрытия;

Кислотные праймеры

Материал предназначен в первую очередь для работы с ногтями, склонными к гидратации. Праймер подсушивает пластины, устраняя избыток влаги.

Предназначение

Этот материал предпочтителен и при наращивании ногтей – он обеспечивает сцепку с моделирующими материалами, имеющими больший вес по сравнению с гелевым лаком.

Применение

И все же мастеру следует помнить, что в составе средства раствор кислоты. Достаточно капли средства, чтобы получить эффект. Кислотный праймер наносится на ногтевую пластину предварительно отжатой кистью, тонким слоем. Контакта с кожей следует избегать, а при попадании средства на кутикулу или боковые валики нужно сразу удалить средство безворсовой салфеткой.

В полимеризации в УФ или ЛЛЭД-лампе большинство праймеров не нуждаются. Нужно просто дать подсохнуть ногтям 60-120 секунд естественным образом.

Бескислотные праймеры

Базовые покрытия премиум качества не нуждаются в применении кислотного праймера.

Несмотря на название, в большинстве современных материалов этой группы содержится кислота. Но по сравнению с кислотными препаратами ее содержание минимальное. Кроме того, в состав входит этилен и различные типы растворителей. Поэтому в работе нужна та же деликатность.

Назначение

Лайфхак с бескислотным праймером

Очень выручает этот материал при работе со слайдерами. Тонкой кистью нужно нанести праймер на мнущиеся края пленки, уже выложенной на ноготь, и он их сгладит. После картинку следует перекрыть базой или топом. Кислотный праймер может растворить узор или повлиять на цвет покрытия, его для этих целей лучше не применять.

Отличия и особенности

У кислотного праймера более выраженный эффект. В то же время использовать его без обоснованной необходимости нет смысла. Мастеру целесообразно иметь в арсенале средства обоих видов и выбирать то, которое подходит конкретным рукам. Домашним пользователям, выполняющим маникюр только себе и не делающим наращивание, можно ограничиться одним бескислотным.

При работе с кислотной группой в помещении желательно обеспечить циркуляцию воздуха. Пары имеют уксусный запах и вызывают неприятные ощущения. На ногтевой пластине кислотный праймер оставляет белесый след – этого не следует опасаться. Бескислотные материалы прозрачны, однако это может сбить с толку неопытного мастера: не стоит их наносить повторно, если не осталось следов использования.

Хранение

В особых условиях праймеры не нуждаются. Средство может быть упаковано в прозрачный или затемненный флакон из стекла, поскольку света, в отличие от полимеризующихся гелевых материалов, оно не боится. Однако выставлять его под прямые солнечные лучи не стоит. Желательно хранить праймер в прохладном помещении вдали от окна.

10 лучших праймеров для ногтей 2021: рейтинг, отзывы, советы экспертов

Маникюр — одна из самых популярных бьюти-процедур. Чтобы ногти выглядели красиво и аккуратно, а покрытие держалось долго, мастер должен использовать проверенные профессиональные средства. Одно из таких средств — праймер.

Праймер — это жидкость, которая обезжиривает ноготь, подсушивает его. От качества средства зависит, насколько хорошо гель-лак «сцепится» с ногтевой пластиной.

Как отмечает Анна Рубен, мастер маникюра и педикюра, основатель студии и инструктор по маникюру: важно подобрать для клиента подходящий праймер, в зависимости от строения и особенностей ногтей.

На российском рынке представлено множество видов этого средства — кислотные, бескислотные, бондеры. Публикуем рейтинг лучших праймеров 2021 года с отзывами и советами от эксперта.

Выбор эксперта

Yoko Праймер для ногтей

Грунтовое средство с метакриловой кислотой. Производитель отмечает: данный праймер можно применять и с гель-лаком, и с акрилом. Рекомендуется при гипергидрозе ногтей (повышенной влажности ногтевой пластины).

Плюсы и минусы

можно использовать и с акрилом, и гелем; подходит при гипергидрозе

едкий и резкий запах

Рейтинг топ-10 лучших праймеров для ногтей по версии КП

1. BLUESKY, Luxury Silver Primer

Бескислотный праймер, подходит для ногтей с гипергидрозом. У клиенток с повышенной влажностью ногтей покрытие держится плохо. Данный праймер поможет решить проблему. Наносят его тонкой кисточкой. Пусть вас не пугает маленький объем средства (10 мл): у праймера экономичный расход.

Плюсы и минусы

сцепляет покрытие и ноготь даже с гипергидрозом, экономичный расход

резкий запах, лучше использовать в хорошо проветриваемом/вентилируемом помещении

2. CANNI

Праймер этого известного бренда обеспечивает отличную «сцепку» базового слоя с ногтем. Производитель отмечает: благодаря праймеру покрытие держится по 4-5 недель, без сколов, потертостей и отслоек. Праймер поставляется из Китая, его можно купить в интернет-магазинах или бьюти-лавках.

Но на упаковке не указан состав, а потому нельзя говорить о его безопасности. Запах у праймера присутствует, но не такой «химический», как у многих других средств.

Плюсы и минусы

благодаря этому праймеру покрытие держится долго

нет состава на упаковке, отсутствует дата производства

3. JessNail

Бескислотный праймер для ногтей, без запаха. Производитель в описании заявляет, что средство обеспечивает надежное сцепление натурального ногтя с гель-лаком или акрилом (можно использовать и с тем, и с тем). В составе три ингредиента, в том числе спирт. Тонкая удобная кисточка с ворсом средней длины.

Подходит как для домашнего, так и профессионального использования. Можно применять даже при чувствительных ногтях — не сушит кожу.

Плюсы и минусы

можно использовать и с гелем, и акрилом, отсутствие химического запаха

спирт в составе (может сушить кутикулу, если случайно задеть ее)

4. TNL Professional

Бескислотный праймер-бонд, подходящий для профессионалов и новичков в маникюре. Можно наносить под гель-лак, использовать при наращивании ногтей акрилом или гелем. Те, кто уже пользовался этим праймером, отмечают, что покрытие действительно долго держится — по 4-5 недель без сколов, трещин и отслоек.

У праймера резковатый химический запах, но он быстро рассеивается.

Плюсы и минусы

можно использовать и перед покрытием, и перед наращиванием, подходит для профессионалов и новичков

резковатый запах

5. Olystyle

Праймер этого бренда также обещает идеальное сцепление ногтя с гель-лаком или акрилом — будь то обычное покрытие или наращивание. Праймер будто склеивает ноготь с материалом, не портит при этом ногтевую пластину, выступает как защитный слой. Средство не меняет цвет гель-лака.

У него маслянистая текстура, резкий запах. Производитель обещает и стойкость покрытия, и легкость снятия.

Плюсы и минусы

работает как защитный слой, покрытие держится долго

резкий запах, масляная структура (некоторым мастерам неудобно работать)

6. UNO

Профессиональный праймер, не подходит для домашнего применения, он довольно дорогой. Зато мастера маникюра с радостью с ним работают. Этот праймер обеспечивает отличную «сцепку» ногтя с гель-лаком, гелем для наращивания, акрилом и даже простым лаком.

Иными словами, праймер работает во всех системах. Подходит для слабых, истонченных, слоящихся ногтей.

Плюсы и минусы

отличная сцепка, работает во всех системах, подходит для слабых ногтей

7. Irisk Professional

Праймер, несмотря на демократичную цену, относят к профессиональным средствам. Irisk Professional Gel Primer, как отмечает сам производитель, «дарит крепкое и надежное сцепление натурального ногтя с гелем или акрилом». Маникюр с этим праймером может продержаться максимально долго.

Мастера заметили, что средство удобно в использовании — у него удобная кисточка, быстро сохнет на воздухе. Но есть и нарекания: мол флакончик негерметично закрывается. Маленький объем — всего 5 мл.

Плюсы и минусы

быстро сохнет, создает хорошую защиту ногтей

маленький объем, флакон негерметично закрывается

8.

Бескислотный праймер, обеспечивает крепкую сцепку ногтя с покрытием. Однако многие отмечают, что он очень долго сохнет — конкуренты справляются за 15-30 секунд, а Bagheera Nails надо сушить целую минуту. Однако, сцепка у него отличная, цвет лака не искажает и не меняет, отслоек нет.

Производитель отмечает, что лучше всего праймер «сработается» с другими средствами этого бренда. У него хорошая консистенция — не жидкая и не густая. Во флаконе кисточка небольшого размера, не оставляет ворсинок.

Покупательницы отмечали, что средство имеет едкий спиртовой запах — это большой минус. Ведь высыхает праймер долго, а у чувствительных людей от него слезятся глаза.

Плюсы и минусы

удобная кисточка, отличная сцепка, хорошая защита ногтя

долго сохнет, имеет спиртовой запах

9. Kodi Ultrabond

Праймер этой марки не только обеспечивает хорошую сцепку материала с ногтем, но и спасает ногтевую пластину от воздействия лучей и химических средств. Можно использовать с лаком, гелем, акрилом. Праймер не дает ногтю под покрытием желтеть.

Является безопасным средством, его можно использовать людям с ослабленными ногтями — в составе нет метакриловой кислоты. У праймера удобная кисть, оптимальная текстура и жидкая консистенция, расходуется экономично.

Плюсы и минусы

можно использовать и с гелем, и с акрилом

яркий запах ацетона

В составе этого праймера есть лечебный компонент — кератин. Праймер не только создает хорошую сцепку, но и восстанавливает ногтевую пластину. Для полного высыхания Riki требуется чуть больше времени — 45 секунд.

В составе праймера нет метакриловой кислоты, а значит, его можно использовать и аллергикам. Многие заметили хорошее качество ворса кисточки, она не линяет.

Плюсы и минусы

безопасный состав, удобная кисть

довольно долго высыхает

Как выбрать праймер для ногтей

— В арсенале мастеру нужно иметь и кислотный праймер, и бескислотный, ведь ногтевые пластины у клиентов разные, — говорит Анна Рубен. — Купите оба вида, цены у этих средств весьма доступные. Мастер обязан уметь разбираться в типах ногтей и праймерах: этому учат на профессиональных курсах. Если закрадываются сомнения, какой праймер выбрать, посоветуйтесь с консультантом, зайдя в магазин профессиональной косметики.

Итак, праймеры бывают нескольких видов.

Бескислотные праймеры

Название говорит за себя — в этих праймерах нет метакриловой кислоты. Формула у них безопасная, подходит и для нормальных, и для ослабленных ногтей. В основе средства этилацетат — растворитель, который не вызывает аллергии и не наносит вреда ногтям. Еще плюсы бескислотных праймеров: их удобно использовать при наращивании, быстро высыхают.

Кислотные праймеры

В основе средства метакриловая кислота, 80% от всего состава. Благодаря этой кислоте праймер сильно воздействует на пластину, поэтому его стоит использовать только на крепких и прочных ногтях. Ни в коем случае не стоит наносить средство на слабые и изношенные ногти! В данном виде праймера тоже есть этилацетат — он отвечает за обезжиривание и очищение ногтевой пластины, что необходимо перед нанесением покрытия.

Бондеры и усилители праймера (преп-праймеры)

Как альтернативу праймеру мастера используют бондер. Это разные средства, хотя их функции во многом схожи.

Бондер, как и праймер, помогает сцепиться ногтю с покрытием (гель-лаком или акрилом) и выполняет защитные функции. Бондер тоже можно назвать «невидимой защитой» — на ногтевой пластине он создает пленку, которая защитит ноготь от воздействия ультрафиолетовых лучей во время сушки.

Но бондер применяется как скрепляющее средство, в то время как праймер, в первую очередь, очищает и обезжиривает. Бондер выглядит как гель, его нужно сушить в лампе. Праймер же имеет легко испаряющийся состав, который высыхает самостоятельно. Бондер и праймер можно использовать вместе.

Бондер также называют преп-праймером или усилителем праймера. Он наносится перед использованием кислотного или бескислотного праймера.

Популярные вопросы и ответы

На вопросы о важности нанесения праймера и другие отвечает Анна Рубен — мастер маникюра и педикюра, основатель студии и инструктор по маникюру.

Нужно ли наносить праймер под базу?

— Да, кислотный и бескислотный, — считает Анна Рубен. — Кислотный используется при проблемных, гипергидрозных (по-другому, влажных) ногтях. Если пренебрегать его использованием, то покрытие через пару дней начнет отслаиваться. Бескислотный используется для «защиты» ногтевой платины от базы. При его нанесении образуется пленка. Подходит только для очень хороших, здоровых, крепких ногтей, иначе покрытие держаться не будет. Вывод: можно обойтись без праймера, но, по показаниям, обязательно использовать кислотный праймер.

Что лучше: дегидратор или праймер?

— У них совершенно разные роли, — объясняет эксперт. — Первый используется для обезжиривания и обезвоживания ногтевой пластины, второй для сцепки базы и ногтя. Работают они в тандеме. Убери один из них, и качество покрытия испортится.

Что будет, если не нанести праймер под гель-лак?

— Покрытие будет плохо держаться, — рассказывает Анна Рубен. — Скажу больше, если нанести клиенту «не тот» праймер, оно тоже будет плохо держаться. Поэтому, в первую очередь, мастеру нужно научиться разбираться в типах ногтей и праймерах, и только потом использовать эти средства в работе.

Чем можно заменить праймер для ногтей?

— По моему мнению, ничем, — отвечает эксперт «КП». — И смысла в замене нет. Во-первых, стоит средство недорого, во-вторых, хватает его надолго, в-третьих, воздействие на качество ногтевой пластины минимальное. И самое главное: правильный праймер — залог качественного покрытия, которое будет долго держаться.

Зачем нужен праймер для ногтей и как его использовать

Красивые ухоженные ногти — та мелочь, которая придает завершенность вашему образу. Для того, чтобы ногти были ровными, красивыми и ухоженными, используется процедура наращивания, которую невозможно представить без праймера.

Праймер для ногтей: что это и для чего он нужен?

Праймер — это жидкое, реже — гелеобразное — средство для ногтей, которое используется для обезжиривания, подсушивания и защиты ногтевой пластины. Также праймер защищает ноготь от пожелтения и расслаивания. Основная функция средства — усиление сцепления материала для наращивания с ногтем. В итоге наращенные ногти дольше держатся, материал ложится на ногтевую пластину ровным слоем.

Основная часть праймеров не имеет цвета и запаха. Обычно праймер используется перед наращиванием ногтей, иногда мастера используют его и для маникюра гель-лаком.

Как выбрать праймер для ногтей

1. Определите, какой вид праймера вам нужен. Средства делятся на разновидности в зависимости от кислотности.

Кислотный праймер имеет в составе от 30 до 90% метакриловой кислоты. Кислотное средство размягчает ногтевую пластину, увеличивая ее сцепление с материалами для наращивания. В итоге наращенные ногти держатся дольше. При работе с кислотным праймером стоит быть особо внимательными, потому что он обладает высокой токсичностью и едкостью. Использовать праймер можно только на крепких и здоровых ногтях.

Бескислотный праймер не содержит кислот. Его используют на ломких и хрупких ногтях, потому что он не повреждает ногтевую пластину. Не вызывает раздражение, не оставляет ожогов на коже, не токсичен. Бескислотный праймер используется не только для наращивания, но и для маникюра гель-лаком, педикюра, наращивания биогелем.

2. Обращайте внимание на цену. Очень дешевые материалы не могут быть качественными и безопасными, поэтому выбирайте праймер средней ценовой категории и выше.

3. Выбирайте материалы проверенных производителей.

4. Почитайте отзывы перед покупкой. Конечно, в интернете полно заказных отзывов, но их легко отличить от настоящих. Доверяйте подробным разборам материалов, с фотографиями и указанием нюансов.

Как использовать праймер для ногтей: пошаговая инструкция

1. Сделайте обычный подготовительный маникюр, удалите кутикулу и блеск с поверхности ногтя, уберите ногтевую пыль, обезжирьте ноготь.
2. Тонким слоем нанесите праймер на ногти. Как правильно наносить праймер: достаете кисточку из флакона, снимите лишнее с обеих сторон кисточки о край флакона. Начинайте наносить праймер с середины ногтя, чтобы равномерно распределить его по ногтевой пластине, размазывайте средство не более одного раза.
3. Подождите, когда средство высохнет. Обычно этот этап занимает не более одной минуты. Некоторые праймеры требуют дополнительной сушки в УФ-лампе, об этом производители предупреждают в инструкции. При высыхании бескислотный праймер становится прозрачным и немного липким, а кислотный матовым с белым оттенком.
4. Сделайте обычный маникюр гель-лаком или наращивание ногтей.

В нашем каталоге представлены праймеры ведущих производителей по выгодным ценам. Доставляем заказы по Перми и всей России.

для чего он нужен, как наносить, рейтинг марок + видео и отзывы

Нейл-индустрия продолжает развиваться, и сегодня модницам доступны сотни продуктов по уходу за ногтями. Одним из самых эффективных и интересных средств является праймер.

Праймер для ногтей – что это такое?

Под праймером подразумевают специальное жидкое или густое гелиевое вещество. Оно великолепно очищает, дезинфицирует и сушит ногти. Средство используют перед нанесением гелиевого или акрилового покрытия после обработки ногтя (отодвигания кутикулы, выравнивания краев и полировки).

Естественная ногтевая пластина – гладкая и эластичная, а покрытию нужно за что-то «уцепиться». В качестве связующего звена и применяют праймер.

Вещество отлично впитывается в ноготь, и не выступает отдельным искусственным материалом. Дегидратация, обязательный этап моделирования ногтевой пластины, с его помощью происходит мягко, только в верхних слоях. Ноготь не обезвоживается.

Косметическое средство продается в небольших бутылочках из темного стекла, что гарантирует длительное и качественное использование вещества. К флакону в комплекте идет тонкая кисточка для нанесения продукта.

Какой праймер лучше: кислотный или бескислотный

Есть две разновидности этого искусственного материала: кислотный и бескислотный. У каждого вида есть свои особенности нанесения.

Оба великолепно готовят ногтевую пластину к моделированию.

Кислотный праймер

В кислотном материале содержится определенный процент метакриловой кислоты – токсичного вещества, используемого для акрилового наращивания ногтей. Он помогает ногтевым чешуйкам приподняться и крепко сцепиться с гелем.

Распространенное мнение, что кислотный праймер истощает поверхность ногтей, – заблуждение.

Уровень метакриловой кислоты в нем настолько низкий, что существенного вредоносного влияния данное средство не оказывает. Ногтевая пластина в любом случае истощается при моделировании, прежде всего во время шлифовки и полировки.

Подходит девушкам с жирными ногтевыми пластинами. Обладательницам сухих ногтей лучше использовать следующий вариант.

Бескислотный праймер

Вид считается самым безопасным, его также называют «ультрабонд». Напоминает двустороннюю липкую лента. В нем нет химических кислот и других вредных соединений, он не влияет на рН уровень.

Плюс такого искусственного материала – для его сушки не нужна ультрафиолетовая лампа.

Идеальный вариант для девушек с тонкими и чувствительными ногтевыми пластинами. Бескислотная основа применяется для биолака, шеллака. Для акрилового ногтевого покрытия он не подойдет.

Как пользоваться праймером для ногтей

Нужно избегать попадания материала на кутикулу или кожные покровы.

Техника нанесения предельно проста:

• Ногтям придается нужная форма.
• Проводится предварительная обработка: убирается кутикула и глянец, ногти шлифуются, обезжириваются.
• Нанесение: нужно оставить на ногтевой пластине маленькую каплю праймера и подождать, пока она растечется по всей поверхности.
• Накладывать материал на ноготь лучше всего с середины.
• Перед каждым следующим пальцем кисточку чистят при помощи салфетки, чтобы не было слишком густого или толстого слоя.

Затем через 2-3 минуты наносится база, а следом и цветное покрытие. Завершающий этап – нанесение топа.

Лучшие праймеры для ногтей – обзор фирм

Lady Victory

Один из самых популярных брендов. Производитель выпускает несколько видов для каждого способа моделирования. Вещество обеспечивает надежное сцепление искусственного материала и ногтевых пластин, хорошо обезжиривает, предотвращает отслоение геля. В составе нет вредных кислот, поэтому его могут смело использовать в работе даже мастера-новички, не боясь повредить кутикулу или кожные покровы клиента.

Le Vole Ultra Bond

Марка хорошо дезинфицирует, сушит ногтевые пластины, сохраняя их естественный водный баланс. Основа идеально подходит для моделирования под акрил или гель-лак. Не проникает глубоко внутрь ногтя, не нарушает его структуру, а действует только на верхних слоях. В случае попадания на кожу, последствия в виде раздражения или высыпания встречаются крайне редко.

EZ Flow

Производитель выпускает все виды материалов для работы с любым типом ногтевого покрытия. В продукции нет красителей, ароматизаторов, вызывающих раздражение. Один из главных плюсов – праймер этой марки быстро сохнет, в течение 5-7 секунд. Ногти приобретают белесый оттенок.

IBD

Один из лидеров в нейл-индустрии. Компания успешно работает больше 30-ти лет. Выпускает продукцию, которая подходит клиентам, страдающим от гипергидроза и очень ломких ногтей. IBD Stick Primer – самая сильная основа по мнению многих мастеров. Большая часть состава – метакриловая кислота, а значит, отслаивание материалов исключается.

Kodi professional

Праймеры этой марки обеспечивают комфортное и безопасное моделирование. Принцип воздействия на пластины максимально щадящий. Исключено отслаивание материалов.

Видео нанесения праймера

Предлагаем подробное объяснение разницы между кислотным и бескислотным праймером с примерами известных марок.

Праймер для ногтей. Для чего он нужен?

Создание маникюра, довольно-таки насыщенный процесс. Может быть местами даже утомительный, но плоды у него обалденные. После маникюра, ручки оживляют, становятся еще красивее, ухоженнее, а сколько уверенности появляется у модных дамочек, это даже нельзя передать — это нужно почувствовать. Известно, что в списке шагов выполнения маникюра встречаются ряд различных средств, один из которых является нанесение праймера.

Итак, что это за средство такое — праймер, зачем оно нужно, из чего состоит и насколько безопасно его использование? В нашей статье вы найдете ответы на данные вопросы.

Праймер для ногтей. Его функции

Праймер — Название этого препарата говорит само за себя – «праймер», то есть «начальный» или «первый». Это означает, что primer наносится на ногтевую пластину в первую очередь, до того, как выполняется декоративное покрытие. Иными словами — это средство для подготовки ногтей к нанесению покрытия. Продукт обезжиривает и подсушивает ногтевую пластину, чем улучшает сцепку декоративного материала с ногтем и увеличивает срок носки. Принцип работы праймера заключается в склеивании разных по плотности поверхностей – ногтя и базы. 

Что делает праймер?

— Подсушивает ногти.

— Обезжиривает поверхность.

— Очищение – удаляет частички кожного жира, которые могли остаться после применения обезжиривателя.

— Делает поверхность ногтя более ровной и гладкой.

— Препятствует пожелтению, расслаиванию, возникновению трещин на ногтях.

— Повышает адгезии между натуральным ногтем и материалом покрытия.

—  Подготавливает основу для дальнейшего нанесения декоративных покрытий

— Защищает ноготь от воздействия химических компонентов, тех, что будут поверх него.

— Повышает надежность и качество нарfщенных ноготков.

— Использование праймера — это формирование нулевого покрытия, своеобразной базы, которая поможет равномерно распределить последующие слои косметических препаратов.

— Продлевает стойкость маникюра. Особенно на местах частых сколов и отслоения акрила или геля, а именно на боковых частях свободного края, а также возле кутикулы.

Виды праймеров для ногтей

От производителей встречаются следующие виды праймеров:

— преп-праймер или бонд

— кислотные. 

— бескислотные (ультрабонд).

Итак, преп-праймер или бонд

Нейл-мастера называют преп-праймеры «легкой» версией этого средства. В его составе нет ароматизаторов, красителей и других агрессивных веществ. Поэтому такое покрытие отличается мягким деликатным воздействием на ногти. Преп-праймер не используется для акрилового покрытия, так как его состав слишком слабый, но как основа для других видов преп подходит великолепно. Бонд или преп-праймер чаще используют в качестве дополнительной защиты для ослабленных и ломких ногтей.

Кислотный праймер

Применяется в большинстве случаев для выполнения маникюра с акриловым покрытием. Такой праймер обладает хорошими адгезивными свойствами.

В основу кислотного праймера входит метакриловая кислота, которая является основным компонентов. Чего только не пишут про нее! Что это – смертельно опасное вещество, канцероген! На самом деле метакриловая кислота — вещество, конечно, не полезное. Как, впрочем, и многое из того, что окружает нас в быту: шампуни содержат лаурилсульфат, кремы для рук – глицерин, а сливочное масло — холестерин! Как видите во всем есть свои минусы, однако несмотря на это, все ими пользуются. Так неужели ничтожно малое количество метакриловой кислоты, наносимое на ногти раз в 3-4 недели, сильно повлияет на ситуацию?!

Кислотный праймер можно применять обладательницам жирной ногтевой пластины, потому что он подсушивает ноготь. Но обязательно стоит взять во внимание: при неправильном использовании может вызвать ожоги и нарушить структуру ногтевой пластины. По этому он предназначен для профессионалов.

Теперь бескислотный праймер

Применяется для выполнения маникюра с гелевым и гель-лаковым покрытием. На этикетке бескислотные грунтовки отмечаются как «non acid» или «acid free». 

Бескислотный праймер – это альтернатива метакриловому средству. Продукт позволяют улучшить сцепку слоев покрытия с ногтем, при этом, не оказывая вредного влияния на ногти и прилегающую кожу. Даже само название говорит о том, что этот праймер не содержит в себе никаких кислот, по этому является безопасным. Подойдет для тонких, проблемных, чувствительных. Идеально подойдет как новичкам, так и профессионалам. 

Большое преимущество этой разновидности праймера в том, что для его сушки не потребуется УФ-лампа.

Правила использования праймера

— перед покупкой изучите этикетку, чтобы узнать, для каких материалов подходит Primer. Некоторые средства этой категории предусмотрены исключительно для гелей или только для акрила.

— не наносите средство больше, чем в 2 слоя. Каждый новый слой средства «вдавливает» в ногтевую пластину вредные компоненты наносимого состава, которые не испаряются и не вымываются из ногтя, а также могут всасываться в ногтевое ложе и попадать в кровоток.

— если вы мастер, а клиент жалуется на жжение в ногте или около ногтевой области, обязательно промой участок проточной водой. Возможно, это связано с повышенной чувствительностью. Игнорирование этого факта может спровоцировать ожог.

— мастер должен использовать перчатки, и надевать очки на время работы с грунтовкой. Пары средства могут повредить носоглотку и глаза, особенно, при постоянном использовании.

— наносить средство аккуратно и тонким слоем, чтобы избежать попадания на кожу. Применение грунтовки — этот тот самый случай, когда больше – не значит лучше.

— не стоит наносить праймер в несколько слоев. Избыток химикатов на ногтях может привести к ожогу тканей.

— если используете типсы для наращивания ноготков, следите, чтобы праймер не попадал и на них.

— наносите праймер только специальной кисточкой, которая должна быть в комплекте.

Особенности пользования праймером

— Для сушки праймера не нужна ультрафиолетовая лампа.

— Праймер наносят на натуральные ноготки, уже после применения дегидратора и перед базисным покрытием.

— Перед нанесением праймера, кисточку необходимо отжать о банку, далее просушить безворсовыми салфетками, и только затем нанести на ноготь.

Как выбрать праймер для ногтей

Как выбрать самый лучший праймер для ногтей? Читайте ниже:

— Состав. Первый и главный фактор. У кислотного праймера в перечне ингредиентов вы наверняка заметите метакриловую кислоту, на 80% формирующую содержимое. В то время как на флаконе с бескислотным аналогом можно увидеть пометку «non-acid», говорящую о безопасности и лайтовости средства. Про метакриловую кислоту мы говорили выше, она конечно вредна, но использование в небольших количества и не часто, вряд ли принесет прям такой большой вред.

— Не ведитесь на обещания производителей. Покупайте только у профессионалов и проверенных на качество брендов.

— Читайте отзывы реальных покупателей, прислушиваясь к критике или комплиментам со стороны.

На заметку: После всего прочитонного наверняка вы успели заметить, что, праймер – это действительно необходимое средство для создания стильного маникюра гель-лаком, а также для наращивания. 

Вы начинающий мастер и ищите качественный праймер? Посетите наш онлайн-магазин Global Fashion.

Используйте праймеры и наслаждайтесь красотой маникюра. Надеемся, что наша статья поможет вам в выборе хорошего и подходящего для вас праймера.

Читайте также:

1.Гель — лак. Все самое интересное

2.Топ для гель-лака. Для чего необходим?

3.База для ногтей. Все ее тонкости

4.Аппаратный маникюр — супер технология!

Что такое праймер? Как использовать праймеры для макияжа как Pro

Ваше лицо — это идеальный холст, и нанесение праймера перед макияжем действительно может иметь решающее значение. Но новички в мире макияжа часто ломают голову над вопросом: «А что такое праймер?» Рад, что ты спросил. Праймеры для макияжа используются под тени для век, тональный крем, губную помаду, тушь для ресниц и даже лак для ногтей, чтобы создать гладкую основу, которая помогает другим вашим продуктам оставаться на месте в течение всего дня.

Праймеры также могут уменьшить количество используемого макияжа и облегчить нанесение.По сути, они предназначены для создания барьера между продуктом и вашей кожей, что дает вам красивые и долговечные результаты. Поскольку существуют определенные варианты для разных частей нашей косметической процедуры, мы разберем каждую из них с помощью профессиональных визажистов Джульетт Перре и Линдси Троп.

Знакомьтесь, эксперт

• Джульетт Перре — визажист из Нью-Йорка.
• Линдси Троп — визажист, специализирующийся на макияже для свадеб, редакций, телевидения, кино и подиумов.

Прочтите, чтобы узнать, для чего используется праймер, как он действует и как лучше всего его наносить.

Что такое грунтовка?

Думайте о грунтовке для макияжа, как о грунтовке для рисования — она ​​используется в качестве основы для улучшения остальной части вашего макияжа. Праймер можно использовать для улучшения многих аспектов вашей косметической рутины, включая глаза, лицо, ресницы, губы и ногти. Праймер для лица, например, можно использовать для сглаживания пор, создания основы для стойкого макияжа, ухода за жирной кожей или предотвращения чрезмерного блеска, объясняет Перре.Троп добавляет: «Если у вас сухая кожа, жирная кожа, тусклая кожа, вас беспокоят прыщи, гиперпигментация, защита от солнца, загрязняющие вещества или есть несколько проблем, для вас есть праймер».

А если вы хотите свести к минимуму количество продуктов, которые вы используете в целом, возьмите страницу из книги Тропа. «Когда я работаю с клиентами, я иногда пытаюсь свести к минимуму количество необходимых продуктов, поэтому я использую грунтовку, которая действует как универсальное средство: увлажняющее, разглаживающее и осветляющее».

Типы праймеров под макияж

• Матирующий праймер для лица: Если у вас жирная кожа, матирующий праймер станет вашим помощником, чтобы продлить стойкость тонального крема.В частности, Trop рекомендует использовать крем на основе силикона, поскольку он создает отличный матирующий барьер между кожей и макияжем, а также имеет дополнительное преимущество в виде размытия и сглаживания пор.
• Увлажняющий праймер для лица: «Увлажняющие праймеры идеально подходят для сухой кожи, особенно для тех, которые содержат такие ингредиенты для ухода за кожей, как гиалуроновая кислота и антиоксиданты», — предполагает Троп. «Избегайте использования праймера на основе силикона, если вы относитесь к этому типу кожи, так как он может« пролиться »на сухую кожу».
• Праймеры для коррекции цвета : Цвет этих праймеров разработан для нейтрализации нижележащих тонов кожи.Например, зеленые праймеры используются для коррекции покраснения, а синие праймеры компенсируют желтые или желтые тона.
• Blurring primer: По словам Perreux, размывающие праймеры предназначены не столько для матирования, сколько для разглаживания, что идеально подходит для зрелой кожи, чтобы уменьшить вид тонких линий и морщин.
• Праймер для теней: Тени для век, как известно, стираются к середине дня, и они редко остаются на месте во время тренировок в тренажерном зале или в дождливые или влажные дни.Простая грунтовка может исправить все это, а также помогает с подводкой для глаз. «Праймеры для век могут корректировать цвет века перед нанесением макияжа, питать и разглаживать веко, а также предотвращать повреждение натуральных масел кожи под макияжем», — объясняет Троп.
• Праймер для туши: Если у вас не получается удерживать ресницы изгибом, попробуйте праймер для туши. В их состав также часто входят питательные ингредиенты, которые кондиционируют ресницы и добавляют дополнительный объем и длину.
• Праймер для губ: Не всем понадобится праймер для губ, но если вы любите обыгрывать губы и хотите получить цвет на весь день, это хороший шаг.Он может предотвратить растекание помады и создать гладкую поверхность, которая дольше сохранит цвет, что идеально подходит для нанесения под матовую жидкую помаду яркого цвета для губ. Если вы стремитесь к естественному виду, это также может быстро улучшить естественность губ.
• Грунтовка для ногтей: Для мастеров, занимающихся маникюром своими руками, грунтовка для ногтей может добавить слой защиты, благодаря которому лак дольше будет выглядеть великолепно. Как и другие виды праймеров, он придает ногтям гладкость и способствует равномерному прилипанию лака.Также рекомендуется под акриловые ногти.

Как наносить грунтовку

Не знаете, как использовать праймер для лица? Это просто. Если вы используете увлажняющий крем, сначала нанесите его, а затем дайте коже высохнуть в течение нескольких минут. Начиная с центра лица, нанесите легкий слой праймера, промокнув его пальцами или спонжем для макияжа. Дайте грунтовке высохнуть в течение нескольких минут перед нанесением тонального крема. Главное — убедиться, что выбранная вами грунтовка дополняет ваш тональный крем.Например, если у вас есть грунтовка на силиконовой основе и основа на водной основе, ваша основа может «накапливаться» поверх грунтовки, говорит Троп. «Если у вас грунтовка на основе силикона, лучше всего нанести поверх нее основу на основе силикона», — говорит она.

Что касается праймера для теней, Trop отмечает, что их можно наносить пальцами, кистью или губкой. «Для корректирующих цвет праймеров для глаз я предпочитаю использовать кисть, чтобы убедиться, что мое нанесение нацелено на меня», — объясняет она. «Для полупрозрачных грунтовок мне нравится использовать пальцы, чтобы определить, сколько продукта наносится и где.»

Чтобы нанести праймер для туши, завейте ресницы, затем нанесите праймер от основы до кончиков. Делайте только один глаз за раз, потому что вы хотите нанести свою любимую тушь, прежде чем праймер высохнет. В итоге ваши ресницы будут выглядеть пышными и сказочными.

Для праймеров для губ это зависит от типа упаковки. По словам Тропа, он может поставляться с палочкой, трубкой для выжимания или горшком. «С помощью палочки и тюбика вы можете нанести его прямо на губы. Если он в кастрюле, он, вероятно, имеет более густую консистенцию, поэтому я бы рекомендовал использовать пальцы, так как после этого может быть трудно очистить кисть», она предлагает.

Вам действительно нужна грунтовка?

Да и нет. Выслушайте нас. Они могут быть полезны в определенные сезоны (подумайте: помогая вашим теням оставаться на месте во время таяния). Кроме того, как отмечает Перре, зимой вокруг нас есть элементы (например, ветер, снег и, следовательно, слезящиеся глаза), которые могут сделать грунтовку для глаз вашим другом. Для особых мероприятий и Perreux, и Trop говорят, что грунтовка может быть полезной. «Особые случаи [например, свадьба] вызывают слезы, пот и много объятий и поцелуев, поэтому праймер может быть очень полезным, чтобы просто удержать все на месте и не размазывать или перемещать», — говорит Перре.

Тем не менее, Perreux предпочитает проверять контроль блеска с помощью пудры или промокательной бумаги. «Если вы используете увлажняющий крем, подходящий для вашего типа кожи, тональный крем должен хорошо держаться и давать красивый вид», — говорит она. «Однако, если у вас серьезные проблемы с кожей, такие как текстура, покраснение или тусклость, грунтовка только поможет, а не повредит».

Купить наши любимые праймеры для макияжа

Пособие Косметика Праймер POREfessional Pore Minimizing Primer 32 доллара США

Разгладьте поры этой размывающей грунтовкой, как рекомендовано Trop.Количество размером с горошину — это все, что вам нужно для создания безупречной основы. Кроме того, он сделан из производного витамина Е, который защищает кожу от свободных радикалов.

MAC Тени для век Pro Longwear Paint Pot 23 доллара США

Горшок для краски MAC Pro Longwear Paint Pot — идеальный выбор для невест, которым нужен макияж глаз, чтобы оставаться на месте всю ночь. Он не только нейтрализует обесцвечивание и неровные прожилки на веках, но также имеет различные варианты отделки, в том числе мерцание.

Честная красота Тушь для ресниц 2-в-1 Extreme Length Mascara + Lash Primer 17 долларов США

Перре рекомендует этот выбор от Honest Beauty.«Это двусторонняя тушь с праймером и тушью, она закрепляет ваши ресницы на одном месте, так что вы не наносите лишний продукт, пытаясь расчесать ресницы на месте. Она также помогает удерживать локоны ресниц и предотвращает их размазывание, » она говорит.

Анастасия Беверли Хиллз Праймер для губ 16 долларов США

Такой продукт, как праймер для губ Anastasia Beverly Hills, предотвратит растекание помады и создаст гладкую поверхность, которая дольше сохранит цвет.

Дебора Липпманн Двухсекундный праймер для ногтей 14 долларов США

Отличный праймер для ногтей, подобный этому от Деборы Липпманн, делает гораздо больше, чем любое базовое покрытие.Он может очищать и питать ваши ногти, а также укреплять их, чтобы под лаком они оставались здоровыми. Обычно его наносят перед базовым слоем, и большинство формул сохнут за секунды. Это достойное вложение, если вы хотите сохранить красивый цвет.

На вынос

Праймеры под макияж могут быть полезны для одних, но не для других — все дело в предпочтениях. Если вы можете увлажнить, сиять и защитить лицо от солнца с помощью средств по уходу за кожей, этого может быть достаточно для вас, и в этом случае праймеры могут не понадобиться.Если у вас есть такие проблемы, как жирность, расширенные поры или покраснение, грунтовки могут улучшить ваш внешний вид.

Оптимизация наборов праймеров и протоколов обнаружения SARS-CoV-2 коронавирусной болезни 2019 (COVID-19) с использованием ПЦР и ПЦР в реальном времени

Рекомендации по разработке и оптимизации праймеров

В предыдущем исследовании мы признали важность процесс проверки и оптимизации наборов праймеров, используемых для тестирования на вирусы. Поэтому в этом исследовании мы сначала описываем подробные рекомендации по разработке и оптимизации наборов праймеров в три важных этапа (рис.1а). Первым шагом является выбор целевых генов ( RdRP , N , E и S ) для обнаружения в интересующем геноме (SARS-CoV-2) и разработка праймера на основе целевой последовательность каждого гена. Для оптимальной целевой последовательности, когда в транскрипте гена присутствует вариант сплайсинга, предпочтительна целевая область в более распространенном варианте сплайсинга. Для фактического дизайна праймера использовались различные инструменты, доступные на веб-сайте Primer3 (http://primer3.wi.mit.edu).Primer3 позволяет выбрать оптимальный праймер на основе T _м , длины праймера и стабильности 3′-конца, что следует учитывать при разработке каждого набора праймеров. Второй этап — это проверка in silico последовательностей праймеров и ампликонов. Идентификация вторичной структуры ампликона и возможность образования само- или гетеродимера самой последовательностью праймера были предсказаны на другом веб-сайте idtdna.com (https://sg.idtdna.com/pages/tools/oligoanalyzer).На этом сайте тенденцию к само- или гетеродимеризации можно оценить, рассчитав значение ΔG. Наконец, на веб-сайте gemone.ucsc.edu (https://genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr) инструмент ПЦР in silico можно использовать для прогнозирования возможности неспецифических реакций в том же геноме, а также геномы разных видов. Третий шаг — экспериментальное подтверждение и оптимизация набора праймеров в биологической лаборатории. Мы оптимизировали условия ПЦР, такие как температура отжига ( T _a ), с помощью градиентной ПЦР, установив температуры отжига от 50 до 65 ° C и определив температуру, при которой была достигнута максимальная амплификация.В качестве меры предосторожности важно отметить, что конечная концентрация праймера, установленного в смеси для ПЦР, имеет решающее значение для целевой ПЦР. При концентрациях, превышающих оптимальную, праймеры могут образовывать димеры и мешать специфичной для мишени ПЦР. Следовательно, для каждого набора праймеров необходимо тестировать концентрации в диапазоне от 100 до 500 нМ на образование димеров. При подтверждении результата ПЦР с помощью электрофореза необходимо проверить эффективность реакции на основании того, являются ли размер полосы ампликона и количество добавленного шаблона подходящим или нет.

a Трехэтапное руководство по конструированию и оптимизации праймеров для ПЦР. Шаг 1: гены-мишени были выбраны из геномных баз данных, и были созданы праймеры с использованием Primer3. Шаг 2: наборы праймеров были оптимизированы in silico, чтобы избежать вторичной структуры в праймерах или нецелевой амплификации. Шаг 3: разработанные праймеры были оптимизированы на уровне влажной лаборатории для достижения высокой специфичности и эффективности обнаружения мишеней. b Расположение генов-мишеней и выбранных наборов праймеров в геноме SARS-CoV-2. c Структура SARS-CoV-2 с указанием каждого белка и его названия.

Чтобы продемонстрировать важность процедуры оптимизации праймеров, мы провели ПЦР (35 циклов) с использованием различных наборов неоптимальных праймеров с матричной ДНК или без нее (кДНК SARS-CoV-2) и различных условий T _a (рис. ). Первый пример продемонстрировал появление ложного образования праймер-димер (рис.2а). Димер праймера — это побочный продукт ПЦР, состоящий из молекул праймера, которые гибридизуются друг с другом из-за цепочек комплементарных оснований в праймерах ²² . В первом примере мы провели ПЦР с ранее описанным набором праймеров SARS-CoV-2_IBS_RdRP1 ⁹ . Полученные данные электрофореза показали появление ложных коротких димерных полос примерно на 30–50 пар оснований (п.н.) вместе с темной полосой с ожидаемым размером ампликона 118 п.н. в условиях шаблона (рис.2а). Фактически, полосы праймер-димер были обнаружены во всех условиях, независимо от присутствия матрицы. Кроме того, интенсивность полос праймер-димер имела тенденцию к снижению с повышением температуры. Появление полос праймер-димер позволяет предположить, что концентрация праймера и T _a не являются оптимальными и должны быть оптимизированы путем уменьшения концентрации праймера и увеличения T _a .

Результаты электрофореза после ПЦР (35 циклов) с различными наборами неоптимальных праймеров с матричной ДНК или без нее (кДНК SARS-CoV-2) и в различных условиях T _a . a Пример появления димеров коротких праймеров во всех условиях, выполненный с набором праймеров SARS-CoV-2_IBS_RdRP1. b Пример появления димеров коротких и длинных праймеров под низким T _a , с набором праймеров SARS-CoV-2_IBS_S1. c Пример появления длинных димеров праймеров под низким T _a , с набором праймеров SARS-CoV-2_IBS_E1. d Пример низкоэффективных праймеров в ПЦР, проводимой с набором праймеров CDC_RNAse P. e Пример появления неспецифической полосы при низком уровне T _a в ПЦР, проведенной с набором праймеров SARS-CoV-2_IBS_N1. Красные звездочки указывают на длинные димеры праймеров.

Второй пример продемонстрировал появление ложного длинного димера вместе с более короткой полосой праймер-димер (рис.2б, в). В этих примерах мы провели ПЦР с ранее опубликованными наборами праймеров SARS-CoV-2_IBS_S1 (рис. 2b) и SARS-CoV-2_IBS_E1 (рис. 2c) ⁹ . Хотя в условиях, включая матричную ДНК, были сильные положительные полосы ожидаемого размера, длинные димерные полосы появлялись при низком T _a = 50 ° C и 55 ° C, но не при высоком T _a = 60 ° C, в условиях отсутствия шаблона (красные звездочки на рис. 2б, в). Эти результаты предполагают, что, когда набор праймеров показывает возможность образования длинного побочного продукта ПЦР, этого можно избежать, увеличив T _a .

Третий пример показал набор малоэффективных праймеров. В этом примере мы провели ПЦР с ранее описанным набором праймеров CDC_RNAse P ⁹ (фиг. 2d). Полученные данные электрофореза показали, что во всех условиях наблюдались сильные ложные длинные и короткие полосы праймеров и слабые полосы или их отсутствие (рис. 2d). Появление этих сильных полос праймеров указывает на то, что набор праймеров проявляет тенденцию к чрезмерной димеризации, которая сильнее, чем его тенденция к гибридизации с матрицей.Эти результаты предполагают, что этот набор праймеров следует выбросить, а новый набор праймеров должен быть разработан и оптимизирован.

Последний пример продемонстрировал появление очень длинной неспецифической полосы. В этом примере мы провели ПЦР с SARS-CoV-2_IBS_N1. Полученные данные электрофореза показали отсутствие полосы праймер-димер и сильную ожидаемую полосу в условиях, содержащих матричную ДНК (рис. 2e). Однако имелась ложная очень длинная неспецифическая полоса около 400 п.н. при низком T _a = 50 ° C и 55 ° C, но не при высоком T _a = 60 ° C в отсутствие матричная ДНК (рис.2д). Отсутствие полосы праймер-димер указывает на то, что сам набор праймеров является оптимальным набором праймеров. Однако наличие неспецифической полосы при низком уровне T _a предполагает, что оптимальное значение T _a было выше и было близко к T _a = 60 ° C.

Таким образом, наборы праймеров, которые демонстрируют образование праймер-димер, можно просто оптимизировать, увеличив T _a , тогда как набор праймеров, используемый на рис. 2d, необходимо изменить.Без оптимизации образующиеся ложные димеры праймеров и побочные продукты могут привести к появлению ложноположительной кривой при высоких значениях C _t , близких к 35 циклам, и низких температурах плавления, независимо от наличия или отсутствия шаблон в ПЦР в реальном времени ²³ . При разработке нового набора праймеров можно следовать трехэтапным рекомендациям, которые мы предложили на рис. 1а.

Дизайн и оптимизация праймера SARS-CoV-2

В этом исследовании мы планировали разработать протокол обнаружения для традиционной ПЦР, а также ПЦР в реальном времени.Кроме того, мы планировали разработать протокол обнаружения для мультиплексной ПЦР, а также мультиплексной ПЦР в реальном времени. Мы разработали и оптимизировали наборы праймеров для каждого протокола в соответствии с рекомендациями, показанными на рис. 1а. Список недавно разработанных наборов праймеров, а также наиболее оптимизированные наборы праймеров из предыдущего исследования ⁹ показаны в таблице 1. Наши наборы праймеров были разработаны специально для SARS-CoV-2, поэтому они не нацелены на другие коронавирусы человека. , таких как человеческий коронавирус OC43 (HCoV-OC43), человеческий коронавирус NL63 (HCoV-NL63), человеческий коронавирус HKU1 (HCoV-HKU1) и человеческий коронавирус 229E (HCoV-229E).

Среди наборов праймеров, которые были разработаны для обнаружения SARS-CoV-2 на основе ПЦР в реальном времени в предыдущем исследовании ⁹ , некоторые наборы праймеров были повторно оценены и отобраны на основе рекомендаций по дизайну и оптимизации представлены на рис. 1а (табл. 1). Используя выбранные наборы праймеров, мы провели традиционную ПЦР, как показано на фиг. 3, и ПЦР в реальном времени, как показано на фиг. 4, 5. Кроме того, новые наборы праймеров позволили получить ампликоны размером от 100 до 400 пар оснований.Эти новые наборы праймеров нацелены на гены RdRP , E , N и S SARS-CoV-2 (рис. 1b, c) и были использованы для мультиплексной ПЦР на рис. 6 (таблица 1) . Для обнаружения человеческого IPC мы разработали новые наборы праймеров, нацеленные на гены ACTB (актин бета), TBP (TATA-Box Binding Protein), 18S рРНК и GAPDH генов Homo sapiens ( Таблица 1). Эти наборы праймеров IPC использовали для контроля качества добровольной кДНК образца и проверки ПЦР.Новые наборы праймеров для множественной ПЦР-детекции были оптимизированы, как показано на фиг. 6a, b, в соответствии с рекомендациями, показанными на фиг. 1a.

Результаты гель-электрофореза в результате ПЦР (35 циклов) с использованием наборов праймеров SARS-CoV-2_IBS_E2, SARS-CoV-2_IBS_RdRP2, SARS-CoV-2_IBS_S2 и SARS-CoV-2_IBS_N1. Праймеры GAPDH использовали в качестве набора праймеров IPC. Прогнозируемый размер ампликонов составлял примерно 100 п.н. Пять нанограммов кДНК SARS-Cov-2 (4.5 × 10 ⁸ копий / реакция) или кДНК HEK-293T (1,5 × 10 ³ копий / реакция) использовали для каждой реакции. Условие отсутствия матрицы не содержало кДНК.

ПЦР в реальном времени выполняли с использованием наборов праймеров SARS-CoV-2 SARS-CoV-2_IBS_E2, SARS-CoV-2_IBS_RdRP2, SARS-CoV-2_IBS_S2 и SARS-CoV-2_IBS_N1. Набор праймеров GAPDH использовали в качестве набора праймеров IPC. Каждая строка представляет каждый набор праймеров.Слева каждый график представляет собой график амплификации, который показывает изменение значений log (ΔRn) в зависимости от номера цикла ПЦР. Ось Y представляет нормализованное репортерное значение (Rn), которое было рассчитано как сигнал флуоресценции от SYBR Green, нормализованный к сигналу флуоресценции эталонного красителя. Графики справа представляют графики кривой плавления, которые отображают данные, собранные на этапе кривой плавления. Пики на кривой плавления могут указывать на температуру плавления ( T _m ) мишени или идентифицировать неспецифическую ПЦР-амплификацию.На оси Y производное репортера (-Rn ‘) вычисляли как отрицательную первую производную Rn, генерируемую репортером во время ПЦР-амплификации. Зеленая кривая соответствует образцу кДНК U добровольца. Синяя кривая — кДНК SARS-CoV-2. Пурпурная кривая соответствует условию отсутствия шаблона. Все данные представлены как среднее значение ± S.E.M.

Мультиплексные результаты ПЦР в реальном времени для наборов праймеров SARS-CoV-2 SARS-CoV-2_IBS_E2, SARS-CoV-2_IBS_RdRP2, SARS-CoV-2_IBS_S2 и SARS-CoV-2_IBS_N1.Набор праймеров GAPDH использовали в качестве набора праймеров IPC. Графики слева представляют графики амплификации. Графики справа представляют собой графики кривых плавления. Конечная концентрация смеси праймеров составляла 500 нМ. Зеленая кривая соответствует образцу кДНК U добровольца. Синяя кривая — кДНК SARS-CoV-2. Пурпурная кривая соответствует условию отсутствия шаблона. Все данные представлены как среднее значение ± S.E.M.

, B Гель-электрофорез результаты ПЦР с наборов праймеров SARS_CoV-2_IBS_m_RdRP 1, SARS_CoV-2_IBS_m_RdRP 2, SARS_CoV-2_IBS_m_S 1, SARS_CoV-2_IBS_m_S 2, SARS_CoV-2_IBS_m_N 1, SARS_CoV-2_IBS_m_N 2, 18S рРНК , IBS_m_ACTB 1, IBS_m_ACTB 2, IBS_m_TBP 1 и IBS_m_TBP 2. Ожидаемые размеры продуктов ПЦР указаны в таблице 1. c , d Результаты гель-электрофореза, полученные в результате мультиплексной ПЦР в SARS-CoV-2, HEK-293T, Voulteer U и реакции без матрицы с использованием смеси из четырех наборов праймеров для обнаружения c SARS-CoV-2 (SARS-CoV-2_IBS_E2, SARS-CoV-2_IBS_m_RdRP 1, SARS-CoV-2_IBS_m_S 1 и SARS- CoV-2_IBS_m_N 1). d Смесь трех наборов праймеров использовали для обнаружения человеческого IPC (IBS_m_TBP 1, IBS_m_ACTB 1 и 18S рРНК). Расположение каждого предсказанного продукта ПЦР в геле указано справа.

Разработка традиционного протокола ПЦР для обнаружения SARS-CoV-2

Для разработки традиционного протокола обнаружения ПЦР для SARS-CoV-2, который может быть легко реализован в любой биологической лаборатории по всему миру, мы разработали протокол на основе ПЦР с использованием лучшие наборы праймеров среди ранее разработанных наборов праймеров ⁹ после оптимизации каждого набора праймеров в соответствии с рекомендациями, показанными на рис.1а. Мы использовали кДНК SARS-CoV-2 в качестве положительного контроля, кДНК человеческого происхождения HEK-293T в качестве человеческого IPC и CDC_RNAae P (рис. 2d) в качестве праймер-димерного контроля. Мы провели ПЦР (35 циклов) для каждого набора праймеров с использованием полимеразы Taq (рис. 3). Результаты электрофореза показали, что наборы праймеров SARS-CoV-2 SARS-CoV-2_IBS_E2, SARS-CoV-2_IBS_RdRP2, SARS-CoV-2_IBS_S2 и SARS-CoV-2_IBS_N1 давали только темные полосы соответствующего размера (~ 100 п.н.) в присутствии матрицы кДНК SARS-CoV-2, а не в условиях кДНК HEK-293T или без матрицы (рис.3). Наборы праймеров SARS-CoV-2 человека IPC показали несколько признаков образования ложных праймер-димерных полос (рис. 3), что указывает на то, что набор праймеров был высоко оптимизирован по сравнению с неоптимизированными наборами праймеров. Мы использовали праймеры GAPDH в качестве набора праймеров IPC человека и обнаружили, что, хотя наборы праймеров SARS-CoV-2 не давали детектируемой полосы с кДНК HEK-293T, набор праймеров GAPDH давал положительную полосу в присутствии кДНК HEK-293T ( Рис.3). Результаты GAPDH показали, что кДНК HEK-293T была приготовлена ​​должным образом.Поскольку геномная РНК SARS-CoV-2 была первоначально получена из клеточной линии Vero, выделенной из эпителиальных клеток почек, выделенных из африканской зеленой обезьяны ( макака-резус ) ¹⁹ , положительная полоса GAPDH была получена в присутствии SARS- КДНК CoV-2 показала, что кДНК клетки Vero была случайно включена в кДНК SARS-CoV-2 (рис. 3). Это было подтверждено с помощью инструмента ПЦР in silico, как показано на рис. 1а. Взятые вместе, результаты показали, что мы разработали традиционный протокол обнаружения SARS-CoV-2 на основе ПЦР, который можно будет использовать во всем мире в любой биологической лаборатории, оснащенной обычным ПЦР-аппаратом.

Улучшение протокола обнаружения ПЦР в реальном времени для SARS-CoV-2

В нашем предыдущем отчете мы предоставили 9 уникальных наборов праймеров, нацеленных на SARS-CoV-2 ⁹ . Однако эти наборы праймеров не были оптимизированы в соответствии с рекомендациями, показанными на рис. 1а. Поэтому в этом исследовании мы оптимизировали и выбрали лучшие наборы праймеров в попытке улучшить протокол на основе ПЦР в реальном времени. Используя выбранные наборы праймеров для SARS-CoV-2_IBS_E2, SARS-CoV-2_IBS_RdRP2, SARS-CoV-2_IBS_S2 и SARS-CoV-2_IBS_N1, мы провели ПЦР в реальном времени для каждого набора праймеров и Volunteer U или SARS-CoV- 2 образца кДНК или контроль без матрицы (рис.4). Результаты ПЦР в реальном времени отображаются на двух отдельных графиках для каждого набора праймеров: график амплификации и график кривой плавления (рис. 4). График амплификации показывает изменение значений log (ΔRn) в зависимости от номера цикла ПЦР, тогда как график кривой плавления показывает динамику плавления диссоциации цепей ДНК и последующего высвобождения ДНК, связанной с красителем SYBR® Green I ²⁴ . Форма и положение этой кривой плавления ДНК зависят от соотношения GC / AT, длины и последовательности и могут использоваться для дифференциации ампликонов, разделенных менее чем на 2 ° C при температуре плавления ²⁴ .Результаты амплификации и график кривой плавления для каждого набора праймеров показали отсутствие достоверно положительного сигнала при значениях C _t ниже 37 для всех четырех наборов праймеров SARS-CoV-2 (SARS-CoV2_IBS_RdRP2, SARS-CoV2_IBS_S2 , SARS-CoV2_IBS_E2 и SARS-CoV2_IBS_N1), тогда как при использовании кДНК образца U добровольца был положительный сигнал для GAPDH (зеленая кривая, рис. 4; дополнительная таблица 1). Это сильно контрастировало со значительно положительными сигналами, полученными с кДНК SARS-CoV-2 (синяя кривая, рис.4). Положительные сигналы на графике амплификации постоянно представлены острыми пиками на соответствующем графике кривой плавления (рис. 4). Несоответствие между положениями пиков на кривых плавления GAPDH для образцов SARS-CoV-2 и Volunteer U, скорее всего, было связано с 11% -ной разницей в последовательностях ампликонов между двумя видами приматов ( Homo sapiens и макака-резус ), на что указывает ПЦР in silico (дополнительная таблица 1). Для определения наличия SARS-CoV-2 мы использовали те же критерии, которые описаны в предыдущем документе ⁹ : если был обнаружен какой-либо один из генов SARS-CoC-2, он записывался как «обнаружен SARS-CoV-2. », Или, если обнаружен только ген IPC человека, он был записан как« SARS-CoV-2 НЕ обнаружен ».Основываясь на этих результатах и ​​применяемых критериях, мы пришли к выводу, что доброволец U, скорее всего, был отрицательным по SARS-CoV-2. Взятые вместе, эти результаты показывают, что использование оптимизированных наборов праймеров вместе с анализом кривой плавления может обеспечить улучшенный протокол обнаружения SARS-CoV-2 без ложных срабатываний.

Разработка протокола мультиплексной ПЦР в реальном времени для обнаружения SARS-CoV-2

С помощью оптимизированных наборов праймеров для ПЦР в реальном времени мы попытались разработать альтернативный протокол обнаружения, приняв мультиплексную ПЦР в реальном времени, в которой все наборы праймеров смешивают в одном реакционном буфере.Разработав протокол мультиплексной ПЦР в реальном времени, мы рассчитывали сократить необходимое количество образца и реагентов, время подготовки, стоимость и трудозатраты. Для получения смеси с набором праймеров мы смешали все наборы праймеров, нацеленных на SARS-CoV-2, вместе в реакционном буфере, и набор праймеров IPC растворяли отдельно в реакционном буфере. Таким образом, нам удалось снизить общее количество реакций с 15 до 6, когда мы приняли метод мультиплексирования. Чтобы уменьшить образование праймер-димер, когда все наборы праймеров были смешаны вместе, мы пропорционально уменьшили концентрацию каждого набора праймеров так, чтобы конечная концентрация всех наборов праймеров составляла 500 нМ (по 125 нМ каждый).В остальном процедура была такой же, как и для ПЦР в реальном времени. Мы получили очень похожие результаты на графиках амплификации для мультиплексной ПЦР в реальном времени (рис. 5), что и результаты, полученные с помощью ПЦР в реальном времени (рис. 4). В частности, график амплификации показал одну объединенную кривую реакции для всех четырех наборов праймеров со значительно более низким значением C _t (фиг. 5; дополнительная таблица 1) по сравнению с таковой для каждого набора праймеров (фиг. 4). Точность эксперимента была подтверждена графиком кривой плавления, так как кривая плавления для положительного сигнала показывала несколько пиков, причем каждый пик представлял каждый ампликон для соответствующего набора праймеров (рис.4, 5; Дополнительная таблица 1). Основываясь на этих результатах, мы пришли к выводу, что доброволец U, скорее всего, был отрицательным на SARS-CoV-2. Взятые вместе, результаты демонстрируют, что недавно разработанный протокол мультиплексной ПЦР в реальном времени можно использовать для быстрого и точного обнаружения SARS-CoV-2 в качестве экономичной альтернативы протоколу ПЦР в реальном времени.

Разработка протокола мультиплексной ПЦР для обнаружения SARS-CoV-2